2
СОДЕРЖАНИЕ
Введение .............................................................5
Глава 1. Обзор литературы. Ингибироры АПФ при лечении хронической сердечной недостаточности. Изучение фармакокинетики лекарственных веществ физико-химическими методами анализа
1.1 Современные подходы к лечению ХСН,
основанные на принципах доказательной медицины.............11
1.2. Ингибиторы АПФ........................................... 13
1.3 Особенности фармакокинетики лекарственных
веществ при сердечной недостаточности.....................18
1.4. Методы определения ингибиторов АПФ
и их производных...........................................21
Экспериментальная часть Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Объект исследования ......................................33
2.2. Методы исследования ......................................35
Глава 3. Результаты разработки методики количественного
определения спираприла гидрохлорида
вольтамперометрическим методом в
растворе стандартного образца и биологических объектах
3.1. Подбор условий определения спираприла
гидрохлорида в модельных растворах.........................45
3.1.1. Подбор электрода и фонового электролита ................45
3.1.2. Подбор оптимальных условий электролиза
и развертки вольтамперограммы ............................48
3.1.3. Установление основных показателей определения
3
спираприла гидрохлорида по разработанной
методике....................................................52
3.1.4. Обоснование возможного механизма анодного окисления спираприла гидрохлорида в подобранных условиях....................55
3.1.5. Подбор условий пробоподготовки при перенесении разработанной методики на
биологические объекты.......................................59
Глава 4. Результаты разработки методики количественного
определения фозиноприла натрия вольтамперометрическим методом в модельном растворе стандартного образца и биологических объектах
4.1. Подбор условий определения фозиноприла
натрия в модельном растворе............................................65
4.1.1. Подбор электрода и фонового электролита ..............................65
4.1.2. Подбор оптимальных условий электролиза
и развёртки вольтамперограммы..........................................67
4.1.3. Установление основных показателей определения фозиноприла
натрия по разработанной методике.......................................70
4.1.4. Обоснование возможного механизма анодного окисления
фозиноприла в подобранных условиях.....................................73
4.1.5. Подбор условий пробоподготовки при перенесении разработанной методики на
биологические объекты ...............................................................................75
Глава 5. Подтверждение специфичности разработанных методик
5.1. Выделение метаболитов лекарственных
веществ методом тонкослойной хроматографии с анализом их
электрохимической активности............................................81
5.2. Анализ сывороток крови методом высокоэффективной жидкостной
14
Спираприла гидрохлорид является ингибитором АПФ с двумя путями элиминации, причем 50 % составляет печеночный метаболизм и 50 % -почечное выделение.
В виду того, что спираприла гидрохлорид является пролекарством, особый интерес представляет процесс его биотрансформации.
Под биотрансформацией, или метаболизмом, понимают комплекс физико-химических и биохимических превращений лекарственных средств, в процессе которых образуются полярные водорастворимые вещества (метаболиты), которые легче выводятся из организма. Различают два типа реакций метаболизма лекарственных препаратов в организме: несинтетические и синтетические. К несинтетическим реакциям относятся окисление, восстановление и гидролиз. В основе синтетических реакций лежит конъюгация лекарственных средств с эндогенными субстратами (глюкуроновая кислота, сульфаты, глицин, глутатион, метальные группы и вода). Соединение этих веществ с лекарственными препаратами происходит через ряд функциональных групп: гидроксильную, карбоксильную, аминную, эпоксидную. После завершения реакции молекула препарата становится более полярной и, следовательно, легче выводится из организма.
При пероральном применении лекарственные вещества, всасывающиеся слизистой оболочкой кишечника, поступают сначала в портальную систему, а лишь затем в системный кровоток. Интенсивные и многочисленные реакции метаболизма протекают уже в стенке кишечника.
Так в молекуле спираприла гидрохлорида, под действием ферментов гидролаз, происходит гидролиз сложно-эфирной группы, с образованием свободного этилового спирта, данная реакция частично проходит уже в кишечнике, данный процесс продолжается в печени с образованием спираприлата (70-85%). Так же особого внимания заслуживает еще один вид метаболизма - конъюгация с глюкуроновой кислотой (10-20%) под действием фермента глюкуронилтрансферазы. Незначительное участие в
15
процессе метаболизма спираприла оказывают цитохром Р 450 редуктазы с образованием гидроксильных форм (1-5%) [6,40].
В отличие от спираприла в структуре молекулы фозиноприла присутствуют остатки фосфинильной группы, которая придает веществу ряд уникальных особенностей, главным образом, высокую липофильность метаболита - фозиноприлата в 20 раз превосходящая, например, липофильность эналаприлата. Это свойство облегчает проникновение препарата через клеточные мембраны во все органы (сердце, сосуды, почки, легкие и надпочечники) и позволяет эффективно подавлять активность не только циркулирующей, но и тканевой ренин-ангиотензин-альдостероновой системы.
Фозииоприл натрия медленно всасывается из желудочно-кишечного тракта (прием пищи уменьшает всасывание), абсорбируется в проксимальной части тонкого кишечника. Биодоступность составляет 36%. Максимальная концентрация лекарственного вещества в крови достигается через 1-2, а метаболита фозиноприлата через 2-4 ч, Т|д — 12-15ч., к концу первых суток концентрация понижается до 20-23% от максимальной. С белками сыворотки связывается на 97-98%, имеет небольшой объем распределения. Не проникает через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), плаценту, секретируется в грудное молоко. Метаболизируется фозиноприл по такой же схеме как и спираприл в такие метаболиты как: фозиноприлат (75%), глюкурониды фозиноприлата (20-30%) и гидроксильные формы (1-5%) [2, 34, 40, 128]. В отличие от спираприла для фозиноприла большое влияние в процессе биотрансформации оказывает метаболизм в кишечнике.
Фозиноприл натрия, так же как и спираприла гидрохлорид является ингибитором АПФ с двумя путями элиминации, 50 % составляет печеночный метаболизм и 50 % - почечное выделение [40,46, 70, 89,91, 128,147]. Важно то, что участие обоих путей в выведении фозиноприлата примерно одинаково и они взаимокомпенсируют друг друга: при снижении функции почек возрастает печеночная фракция выведения и, наоборот, уменьшение
- Київ+380960830922