Ви є тут

Особливості морфогенезу органів кровотворення у поросят

Автор: 
Оліяр Алла Вячеславівна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2003
Артикул:
0403U004308
129 грн
Додати в кошик

Вміст

РАЗДЕЛ 2
ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ, МАТЕРИАЛ
И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объект исследования - поросята Полтавского мясного типа (ПМ-1), выращиваемые в учебно-научно-производственном животноводческом комплексе Крымского государственного аграрного университета. Поросята в течение первых 20 суток жизни содержались в стандартных клетках вместе со свиноматками в типовых свинарниках.
При отборе поросят определяли их живую массу и линейные промеры статей тела (высота в холке, обхват груди за лопатками, длина головы, туловища и хвоста).
Для морфологических исследований органов кроветворения проводили убой суточных (n =12, 3 группы), а также в возрасте 5-ти (n =5), 10-ти (n = 4), 15-ти (n = 3) и 20-суток (n = 6, 2 группы) (табл. 2.1). Всего 30 голов. После исследования топографии и синтопии лимфоидных органов путем анатомического препарирования отбирали необходимый материал для исследования: бедренная кость, 9-й грудной позвонок, левая и правая парные и непарная шейные и грудная доли тимуса, селезёнка, соматические (подподвздошный, поверхностный шейный, нижнечелюстной) и висцеральные (краниальный средостенный, селезёночный, подвздошно-ободочнокишечный) ЛУ (табл. 2.2).
После отбора органов кроветворения определяли их абсолютную (на электронных весах ВЛКТ-500М) и относительную (к живой массе) массу. Из линейных параметров бедренной кости, 9-ого грудного позвонка и тимуса определяли длину; селезёнки и ЛУ - длину, ширину и толщину. Макроморфометрию органов кроветворения осуществляли при помощи штангенциркуля и сантиметровой линейки с ценой деления 1 мм.

Таблица 2.1
Динамика живой массы и линейных промеров статей тела поросят
Возраст (сутки), группыЖивая
масса, гV, %Высота в холке, ммV, %Длина головы, ммV, %Длина туловища, ммV, %Длина хвоста, ммV, %Обхват груди за лопатками, ммV, % 1среднее1025,0±100,1532,44184,83±6,3211,35106,25±2,818,78235,75± 8,5712,0779,08± 4,1417,38210,58±6,3810,06I735,0± 67,58*15,91167,0± 5,565,76100,25± 5,048,70212,50± 3,35*2,7367,25± 3,31*8,51196,25± 7,196,34II968,0± 64,27*13,28182,60± 7,017,68106,40± 4,768,95230,60± 4,88*4,2381,40± 6,5716,14205,60± 5,945,78III1506,67±120,28**11,26212,33±7,08**4,70114,0± 3,244,01275,33± 18,83*9,6491,0± 8,15*12,63238,0± 13,21*7,8351412,0±218,0130,88208,40± 12,0311,55117,0± 3,89*6,65249,20± 9,617,7186,60± 6,6615,38243,60± 14,6112,00101855,0±187,7117,51215,50± 4,233,40120,25± 4,586,59280,75± 11,867,3191,75± 7,9214,93256,75± 7,224,86152300,0± 37,422,29234,33± 8,645,20128,33± 6,877,55287,0± 6,283,0994,33± 3,344,99263,33± 12,366,62 20среднее2815,0±314,6925,04243,83± 14,1112,96138,50± 10,4316,87318,67± 18,9713,3399,00± 3,548,01305,67± 24,1317,68I2176,67±47,083,05215,67± 6,574,30117,67± 5,316,36280,0± 1,410,7198,33± 7,5610,84257,33± 10,986,02II3453,33±74,27***3,03272,0± 3,24**1,68159,33±0,82**0,73357,33±2,16***0,8599,67±4,556,44354,0± 3,94**1,57
Органы универсального гемопоэза и лимфоцитопоэза сначала фиксировали в 5,0% растворе формалина в холодильнике в течение 2-5 суток (в зависимости от их величины), а затем в 10,0% растворе, где хранили на протяжении всего периода исследований.
Таблица 2.2
Распределение материала по методикам исследования
ОрганыМетодикиморфометриямакро-микрорентгенографиягистологическиегематоксилин-эозинимпрегнация
серебромОрганы универсального гемопоэзаБедренная кость3030150-9-й грудной позвонок3030150-Итого6060300-Органы лимфоцитопоэзаТимус30-45048Селезёнка30-15024Лимфатические узлы:нижнечелюстные60-15024поверхностные шейные60-15024подподвздошные60-15024краниальный средостенный30-15024селезёночный30-15024подвздошно-ободочнокишечный30-15024Итого330-1500216
Макро-микрорентгенографию органов универсального гемопоэза проводили на аппарате рентгеновском "РУМ-17" с использованием пленки "Микрат-200", помещенной в "мягкие", светонепроницаемые бумажные кассеты при следующем режиме: фокусное расстояние - 45 см, напряжение на трубке - 150 кВ, сила тока - 7 мА, экспозиция - 120 с. Полученные рентгенограммы исследовали с помощью негатоскопа демонстрационного НД-1 и микроскопа стереоскопического (МБС-10) при увеличении 8х2, 8х4 и 8х7 в проходящем свете. Определяли наличие и ОП в органах диафизарных, эпифизарных и апофизарных ООК, а также особенности структуры губчатой и компактной КТ. Определение ОП ООК на рентгенограммах проводили методом "точечного подсчета" с использованием окулярных тестовых систем (вставок) по методике Г.Г. Автандилова [302]. После подсчета точек, попавших на всю площадь рентгеновского изображения и его ООК, величину ОП ООК вычисляли по формуле:
Sотн. = ,
где Sотн. - ОП ООК, %;
Рк - число точек, приходящихся на площадь ООК, шт.;
Ро - число точек, приходящихся на всю площадь рентгеновского изображения органа, шт.
Качественные характеристики и количественные соотношения тканевых структур органов кроветворения определяли при исследовании тотальных гистосрезов (25-30 мкм), приготовленных на замораживающем микротоме-криостате МК-25М по методике в модификации П.Н. Гаврилина [303, 304]. Перед промывкой из каждого органа кроветворения отбирали пластины (толщиной около 5 мм), учитывая их анатомо-гистологические особенности. Тимус рассекали в сегментальной плоскости, перпендикулярно магистральным сосудам и отбирали пластины из каждой его доли. Селезёнку рассекали во фронтальной плоскости, перпендикулярно её продольной оси и отбирали пластины из средней части. ЛУ рассекали перпендикулярно их воротам и отбирали пластины из среднего участка. Из предварительно декальцинированных костных органов (в 5,0% растворе азотной кислоты на 10% растворе формалина) иссекали срединные пластины. Полученные гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой методике и импрегнировали азотнокислым серебром по сп