РОЗДІЛ II
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ. ХАРАКТЕРИСТИКА ВЛАСНИХ СПОСТЕРЕЖЕНЬ
Робота базується на експериментальних дослідженнях, проведених на 80 тваринах, яким було виконано шість типів операцій на органах гепатобіліарної зони, та досвіді хірургічного лікування 77 хворих основної та 82 хворих контрольної груп з патологією жовчевивідних шляхів.
З огляду літератури видно, що проблема неспроможності швів в хірургії біліарного тракту далека від свого вирішення та потребує подальшого вивчення (Є.І. Гальперін та інш., 1998; В.М. Мельник., 1996.). Запропоновані методи профілактики не завжди відповідають вимогам надійності та безпеки, як правило, мають незадовільні близькі та віддалені результати (М.П. Брусніцина та інш., 1996; Стрижевський та інш., 1993).
Наші дослідження були спрямовані на розробку пластично-адгезивних методів укриття ліній швів жовчних протоків на основі (н)бутіл-2-цианоакрилатного клею з використанням тканин черевної порожнини. В якості адгезивного матеріалу ми використовували клей Cutseal (Enbucrilate / (n)butyl-2-cyanoacrylate) фірми Rusan Pharma (Індія). Реєстраційне посвідчення № 769/2002 від 13.03.2002 Міністерства охорони здоров'я України. Від усіх відомих аналогів цей клей вигідно відрізняється фізико-хімічними властивостями та простотою практичного використання.
Цианоакрилати за хімічною будовою являють собою полімер на основі циакринової кислоти, який складається з ланцюга гомологічних мономерів.
Хімічна формула цианоакрилатів:
-CH2 - CH2 -
| |
COOR CN
Хімічна формула (н) бутил-2-цианоакрилату:
CN O
| ||
CH2 = CH - C
|
O - (CH2)3 - CH3
В залежності від кількості метильних груп у мономері з'являються різні фізичні властивості та можливості використання. Метил - та етилцианоакрилати відносяться до легко литючих та здатні до швидкої полімерізації. З'єднання з великою кількістю метиленових груп в ланцюгу алкільного замісника навпаки мають довгий процес полімерізації та слабку міцність. Найбільш вигідні властивості має складний ефір бутілцианоакрилат. На відміну від інших ефірів цієї групи він полімерізується на вологих поверхнях, зберігаючи здатність до хімічної адгезії.
В промисловому варіанті (н)бутил-2-цианоакрилат (Enbucrilate) підтримується у стабільному стані за допомогою кислотного стабілізатора, який запобігає реакції полімерізації. При нанесенні клею на вологу поверхню відбувається реакція кислотного стабілізатору з іонізованими молекулами води у присутності атмосферного повітря, що призводить до його інгібіції та початку реакції полімерізації, яка відбувається протягом 10 секунд. За цей час клей розповсюджуєтся у інтерстиціальному просторі.
Експериментальна частина роботи складалась з двох етапів. На першому етапі проводилось вивчення морфологічних змін у різних трансплантатах та тканинах гепатобіліарної зони під впливом цианоакрилатного клею з метою з'ясування можливості його використання в абдомінальній хірургії. Дослідження проводились на 48 білих безпорідних щурах різної статі та віку вагою 200 - 250 гр. В цій групі було виконано чотири типи оперативних втручань, по дванадцять тварин на кожну серію експериментів. Операції проводились під загальною анестезією, яка досягалась внутрішньоочеревним введенням розчину кетаміна гідрохлориду 1 % у кількості до 2 мл. Дослідження морфологічних препаратів в кожній серії експериментів проводилось на 7, 14 та 28 добу (таблиця 2.1). Від кожної тварини досліджувалось по шість гістологічних препаратів, загальна кількість яких склала 288. Еутаназію здійснювали шляхом внутрішньоочеревенного введення розчину тіопенталу-натрія у дозі 0,1 гр.
Таблиця 2.1.
Розподіл експериментального матеріалу першого етапу
Вид операціїТермін експериментуКількість тварин1. З'єднання мобілізованої петлі тонкої кишки з лівою часткою печінки шляхом склеювання їх десерозованих поверхонь.
7-14-28 діб
122. Фіксація ізольованої ділянки апоневрозу прямого м'яза живота з десерозованою ділянкою печінки.
7-14-28 діб
123. З'єднання між відвідною та привідною петлями тонкої кишки.
7-14-28 діб
124. Фіксація частки великого сальника до рани печінки.
7-14-28 діб
12Загальна кількість-48 досліджень на щурах
Другий етап експерименту полягав у створенні моделі операційної ситуації пов'язаної з порушенням цілісності стінки жовчних протоків та застосуванням для закриття дефектів розробленної пластично-адгезивної методики. Також вивчалась біологічна трансформація аутотрансплантата в умовах контакта з жовчю, етапи регенегації слизової оболонки жовчних протоків, поеднаний вплив аутотрансплантата та цианоакрилатного клею на стінку протоки. Дослідження проводилось на 24 безпорідних кролях різної статі та віку, вагою 4,5 - 5 кг. Операції проводились під загальним знеболюванням шляхом внутрішньовенного введення розчину кетаміну дозою 5 мг/кг. Еутаназію здійснювали шляхом передозування наркозу. Проводились гістологічні дослідження тканин, у місті операції, отриманих через 10, 20, 180 діб після початку експерименту. На кожний термін дослідження припадало по вісім тварин. Від кожної тварини досліджувалось по шість гістологічних препаратів, загальна кількість яких склала 144 (таблиця 2.2).
Таблиця 2.2.
Вид операціїТермін експериментуКількість тварин1. Закриття холецистотомічного отвору вільним клаптем паріетальної очеревини
10 діб
82. Те ж20 діб83. -//-//-180 діб8Загальна кількість-24 Розподіл експериментального матеріалу другого етапу на кролях
В другій серії експериментів виконано операції на 8 безпорідних свинях різної статі, вагою 20 - 25,0 кг. З метою знеболювання проводили інтубаційний наркоз з введенням міорелаксантів. Операції на свинях проводили під загальним знеболюванням. Виконувалась пункційна катетеризація в