Ви є тут

Морфофункціональні зміни та реадаптаційні перетворення в кістках скелета при термічному ураженні в умовах впливу на організм солей важких металів в різні вікові періоди (анатомо-експериментальне дослідження)

Автор: 
Моїсеєнко Ольга Семенівна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2007
Артикул:
0407U000800
129 грн
Додати в кошик

Вміст

РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
Дослідження виконані на 216 безпородних білих щурах-самцях статевонезрілого, репродуктивного та старечого віку, які перебували в стаціонарних умовах віварію. На початок експерименту вік тварин становив відповідно 0,5, 4 та 14 місяців з початковою масою 45 - 50г, 150 - 180г, 300 -350г.
Перед початком експерименту тварин оглядали, враховуючи їх локомоторну активність та стан шкірного покриву. Під час дослідів у віварії підтримувалась постійна температура, тварини перебували в умовах належного догляду. Впродовж експерименту регулярно проводилися спостереження за динамікою маси тіла тварин.
Усі експерименти на тваринах проводилися з дотриманням міжнародних принципів Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментів та інших наукових цілей (Страсбург, 1985).
У залежності від впливу екзогенних чинників тварин розділено на три серії: контрольна, яку склали 72 щурі, та дві експериментальні - по 72 тварини в кожній.
Піддослідні тварини серед визначених серій, виходячи з віку, були кількісно розділені на три категорії - статевонезрілого, статевозрілого та старечого віку по 72 щурі в кожній.
Відповідно строкам спостереження (1, 10, 20, 30 доба після термічної травми), категорії та серії розділили на 4 групи.
Серія І - складали інтактні щурі (72 тварини), які знаходилися в звичайних умовах віварію і були поділені на три вікові категорії ( по 24 в кожній) та на чотири групи за терміном спостереження піддослідних них тварин по шість у кожній.
Серія ІІ експериментальна - склали тварини (72 щурі), у яких вивчалися особливості росту, будови та формоутворення кісток при дії на організм термічного фактору та солей важких металів. Тварини також були розділені на три вікові категорії по 24 в кожній та 4 групи по 6 тварин.
Таблиця 1.1.
Розподіл експериментальних тварин за серіями, категоріями та групами.

Категорії щурівСерія ГрупиВсього

1234 Статевонезрілі
НІ666624
НЕІІ666624
НЕ+ КІІІ666624 Статевозрілі
ЗІ666624
ЗЕІІ666624
ЗЕ+ КІІІ666624 Старі тварини
СІ666624
СЕІІ666624
СЕ +КІІІ666624 Всього 216
Серія ІІІ експериментальна - склали тварини (72 щурі), поділені на три вікові категорії, яким після термічного ураження на фоні впливу солей важких металів проводилася корекція морфологічних змін у кістковій системі остеопротектором "Кальцемін Адванс". Препарат вводили тричі на добу перорально протягом місяця після нанесення термічної травми.
Моделювання несприятливих екологічних умов Сумської області проводилося наступним чином: на початку експерименту тварини отримувала з питною водою солі цинку (ZnSO4 x 7H2O) - 5мг/л, хрому (K2Cr2O7) - 0,1мг/л і свинцю (Pb(CH3COO)2) - 0,1мг/л. Ці дози визначаються у воді та ґрунті Шосткінського району Сумської області (згідно "Доповіді про стан навколишнього природного середовища в Сумській області у 2000 році", виданої Міністерством екології та природних ресурсів України, Державним управлінням екології та природних ресурсів у Сумській області, яка є складовою частиною "Національної доповіді про стан навколишнього природного середовища в Україні у 2000 році") [22].
Через місяць з початку вживання води, насиченої солями важких металів, наносилися термічні ушкодження водяною парою на епільовану поверхню спини тварин протягом 35 секунд під рауш-наркозом. Площа ураження складала 18-20% поверхні тіла. Гістологічне дослідження ушкодженої шкіри свідчило про розвиток опіків 3А-3Б ступеню.
Тваринам серії ІІІ зразу ж після термічного ураження почали давати тричі на добу препарат " Кальцемін Адванс" протягом місяця спостереження. Даний препарат реєстрований посвідченням МОЗ України № П.05.03/06821, №Р.10.02/05389. До складу " Кальцеміну Адванс" входять: кальцію цитрат 217 мг; кальцію карбонат - 1312 мг; елементарний кальцій - 500 мг; вітамін Dз 200 МО; бор - 250мкг; цинк - 7,5 мг; мідь - 1 мг, марганець - 1,8 мг; магній - 40 мг. Прийом даного препарату показано для профілактики та комплексного лікування остеопорозу, захворювань опорно-рухового апарату,
а також з метою профілактики остеопенічних станів [156]. Для кожної категорії тварин визначалася відповідна доза. Добова доза дорослої людини "Кальцеміну Адванс" становить у середньому 3 таблетки, для дітей 1-2 таблетки. Маса однієї таблетки 1,8 гр., маса 3-х таблеток - 5,4 гр. Вага середньостатистичної людини рівна 70 кг = 70000гр. Для щура, вагою 100гр, добова доза становить 0,008 гр. ( (3х1,8) : 700). Для експериментальних тварин І категорії добова доза становила - 0,005гр., ІІ категорії - 0,012 гр., ІІІ категорії - 0,027 гр. З метою полегшення дозування таблетку подрібнювали та розбавляли індиферентною речовиною в 100 разів. Оскільки карбонат кальцію (основний компонент) не розчиняється у воді, розбавляли таблетку комбікормом за допомогою кавомолки до гомогенного стану.
Експеримент проводився відповідало до Правил роботи з експериментальними тваринами [69]. Всі тварини утримувалися в стандартних умовах віварію. Впродовж усього експерименту велося спостереження за динамікою приросту маси тіла піддослідних тварин кожні 10 днів. Щоденно слідкували за загальним станом та поведінкою тварин.
Після закінчення експерименту тварин декапітували під ефірним наркозом. Тушки скелетували з виділенням стегнової, тазової кісток та першого поперекового хребця. Кістки зважували на аналітичних вагах ВЛА-200.
Остеометрію проводили за допомогою штангенциркуля з точністю до 0,01 мм. Остеометрія для стегнової кістки передбачала такі показники: найбільша довжина кістки, найбі