РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Характеристика реактивів, що використовувалися в роботі
В роботі були використані реактиви наступних фірм:
1. "Reanal" (Угорщина): НАДФH, НАДH, Na2ЕДТА, ?-N-бензоїл-L-аргінин-етиловий етер (БАЕЕ), нітротетразолій синій, лецитин.
2. "Serva" (Німеччина): тріс, 2-ТБК, алоксан, 5,5'-дітіонітробензойна кислота, феназинметасульфат, АТФ, АДФ, АМФ.
3. "Sigma" (США): глутатіон відновлений, глутатіон окиснений, діcтеріаїлфосфатидилхолін (ДСФХ), арахідонова кислота, цГМФ, цАМФ.
4. "Global Biomarketing Group" (США): стандартні набори реактивів для визначення в плазмі (сироватці) крові ЗХС, ХС ЛПВЩ, ТАГ, активностей лужної фосфатази, КФК, аспартатамінотрансферази (АСТ) та аланінамінотрансферази (АЛТ).
Всі інші реактиви, що застосовувалися в експериментах, були вітчизняного виробництва кваліфікації "х.ч." та "ч.д.а.".
Для приготування водних розчинів та середовища інкубації застосовували бідистильовану воду. Її очищення від органічних домішок здійснювали за допомогою повторної перегонки в присутності KMnO4 і концентрованого розчину H2SO4.
2.2. Характеристика фармакопейних та перспективних препаратів, що використовувалися в роботі
Як засоби корекції порушень ПАР за умов опосередкованих ОС патологічних станів організму ми використовували ряд фармакопейних та перспективних препаратів:
1. Натрію сукцинат (натрієва сіль бурштинової кислоти) виробництва фірми "Serva", ФРН.
Це натрієва сіль бурштинової кислоти - одного з метаболітів циклу трикарбонових кислот. Має широкий спектр фармакологічної активності: виявляє адаптогенну та стреспротективну дію, має актопротекторну та радіопротекторну активність; покращує мікроциркуляцію, потенціює дію антигіпоксантів, використовується в комплексному лікуванні багатьох захворювань, зокрема, серцевої недостатності, ішемічної хвороби серця, атеросклерозу, депресивних станів, патології легенів, нирок, травного каналу тощо. Виявляє антиоксидантну активність на експериментальних моделях променевого ураження та цисплатинової інтоксикації.
DL50 при різних шляхах введення, мг?кг-1: 4000 (внутрішньочеревинно, миші), 5600 (внутрішньовенно, миші), 2000 (внутрішньовенно, морські свинки).
В наших дослідах препарат вводили щурам внутрішньочеревинно в дозах 200-400 мг?кг-1.
Джерела інформації по фармакологічним властивостям натрію сукцинату [318, 321, 337, 341, 343, 349, 356, 359, 361, 363, 368, 379, 594-599].
2. Суфан (калієва сіль N-сукцин-d,l-триптофана)
В роботі використовували субстанцію суфану, ампульований 5 % розчин суфану (ампули по 5 мл), ректальні супозиторії суфану (0,25 г) та сублінгвальні таблетки по 0,25 г дослідного виробництва Українського НДІ фармакотерапії ендокринних захворювань (м. Харків). Розроблений нами спосіб отримання ректальних супозиторіїв суфану та фармакологічні властивості суфану в ректальних супозиторіях захищені патентом України.
Суфан - похідне бурштинової кислоти, неглікозидний кардіотонік. За ступенем кардіотонічного ефекту наближається до еталонних інотропних агентів. Ефективний у лікуванні гострої та хронічної серцевої недостатності. Підвищує в тканинах рівень окислених форм нікотинамідів, вміст АТФ, відношення АТФ/АДФ. Виявляє кардіопротекторну дію, знижуючи токсичність серцевих глікозидів. In vitro попереджає в мітохондріях розвиток ОС, що викликається пероксидом гідрогену, а in vivo - виявляє АО дію на експериментальних моделях гострої серцевої недостатності, променевого ураження та цисплатинової інтоксикації.
DL50 суфану при різних шляхах введення, мг?кг-1: 1408 (внутрішньочеревинно, миші), 3095 (перорально, миші), 1000 (внутрішньочеревинно, щури), 1890 (перорально, щури), 1410 (ректально, щури), 1430 (ректально, щури).
В наших дослідах щурам вводили препарат в наступних дозах: внутрішньом'язево (курсове введення) - 35 мг?кг-1, внутрішньочеревинно - 70-140 мг?кг-1 (0,05-0,10 від DL50 при цьому шляхові введення), внутрішньовенно, ректально та сублінгвально - 140 мг?кг-1, внутрішньовенно для вивчення фармакокінетики - 50 мг?кг-1; кролям: внутрішньовенно, ректально та сублінгвально - 50 мг?кг-1.
Джерела інформації по фармакологічним властивостям суфану [396-404, 600-605].
3. Яктон (сукцинат моно [(2-диметиламіно) етилового етеру] бурштинової кислоти)
В роботі використовували субстанцію яктону дослідного виробництва Інституту органічної хімії НАН України (м. Київ).
Похідне бурштинової кислоти, якому притаманні адаптогенні, стреспротективні, актопротекторні, фригопротекторні та антиоксидантні властивості. Стреспротективна активність яктону співставима з такою для діазепаму. Яктон підсилює регенерацію печінки, активує в ній синтез глікогену. Виявляє АО дію in vivo на експериментальних моделях променевого ураження та цисплатинової інтоксикації.
DL50 при різних шляхах введення, мг?кг-1: 1400 (внутрішньочеревинно, миші), 3000 (перорально, миші), 2950 (перорально, щури).
В наших дослідах щурам препарат вводили внутрішньочеревинно в дозах 70-140 мг?кг-1 (0,05-0,10 від DL50 при цьому шляхові введення).
Джерела інформації по фармакологічним властивостям яктону [409-418, 606].
4. Уфібрат (ундециловий етер n-хлорфеноксиізомасляної кислоти)
В роботі використовували субстанцію уфібрату та таблетки уфібрату по 0,05 г дослідного виробництва Українського НДІ фармакотерапії ендокринних захворювань (м. Харків). Розроблений нами спосіб отримання таблеток уфібрату та фармакологічні властивості уфібрату в таблетках захищені патентом України.
Перший вітчизняний гіполіпідемічний засіб з групи фібратів. Ефективний при гіперліпідеміях типу ІІa, ІІb та IV: сприяє зниженню ЗХС, ТАГ та ЛПНЩ з одночасним підвищенням рівня ЛПВЩ. За ліпідограмою уфібрат поєднує властивості статинів і фібратів. У тварин із змодельованою гіперліпідемією уфібрат попереджує зниження рівня макроергічних сполук в міокарді. Застосування уфібрату призво