РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Матеріали досліджень
В експериментах in vitro та in vivo використані фосфорорганічні пестициди та
синтетичні регулятори росту рослин різних хімічних класів. Відомо, що
фосфорорганічним сполукам притаманна специфічна дія на центральну нервовому
систему, яка обумовлена інгібуванням активності ацетилхолінестерази
(КФ.3.1.1.7). Синтетичні РРР не впливають на активність даного ферменту, але як
і ФОП пригнічують функціональну діяльність центральної нервової системи.
Характерним для першої групи речовин є висока небезпечність для людини,
оскільки при порушенні регламентів їх застосування вони можуть викликати як
гострі, так і хронічні отруєння, а деякі з них спричиняти враження центральної
й периферичної нервової системи (віддалену нейротоксичну дію), що веде до
інвалідизації. Не завжди токсичну дію ФОП можна пояснити антихолінестеразним
ефектом, що ускладнює розробку профілактичних заходів. Синтетичні РРР є мало
токсичні або помірно токсичні сполуки, але механізм їх токсичної дії
недостатньо вивчений. У зв‘язку цим, доцільно було дослідити, в порівняльному
аспекті, роль неспецифічних факторів у токсичності антихолінестеразних і
неантихолінестеразних сполук і визначити деякі біологічні закономірності
токсичного дисгомеостазу. Виходячи з цього вибір даних засобів захисту рослин
для досліджень обумовлений, перш за все, потребами профілактичної й клінічної
токсикології. З точки зору профілактичної токсикології це дозволить визначитись
у загальних підходах щодо регламентування пестицидів і регуляторів росту рослин
в об‘єктах навколишнього середовища, клінічної токсикології – дасть можливість
розробити тактику кваліфікованої медичної допомоги постраждалим за умов гострих
і хронічних інтоксикацій.
Структура досліджених ФОП і синтетичних РРР, умови експериментів in vitro та in
vivo надані в табл. 2.1.
Як видно з табл. 2.1, за хімічною структурою афос, оксифосфонат, хлорофос,
ДДВФ, ТОКФ відносяться до похідних фосфорної кислоти; гетерофос, етафос,
тіоловий і тіоновий ізомери циклофоса, фоксим - до похідних тіофосфорної
кислоти; карбофос, ізомалатіон, малаоксон, фталофос, ЄШ-7 - до похідних
дитіофосфорної кислоти.
Синтетичні РРР за структурою відносяться до різних хімічних груп: похідних
бензотіадиазину - ресин, ацетамідину - сімарп, N-оксид піридину – івін,
хлорованих вуглеводнів - хлорхолінхлорид (ХХХ).
Фосфорорганічні речовини - афос, оксифосфонат, хлорофос, ДДВФ, гетерофос,
етафос, карбофос, ізомалатіон, малаоксон, фталофос, фоксим і ТОКФ синтезовані у
Всесоюзному науково-дослідному інституті хімічних засобів захисту рослин
(ВНДІХЗЗР, м. Москва), циклофос і його ізомери – в Інституті ветеринарії (м.
Казань). РРР – ресин і сімарп синтезовані в Інституті органічної хімії НАН
України, івін і хлорхолінхлорид – в Інституті біохімії та нафтохімії НАН
України (м. Київ).
В дослідах in vitro використані штучні фосфоліпідні мембрани (ШФМ) на основі
фільтрів «Synpor» (Чехословакія) і модельна 2-х фазна водно-ліпідна система,
біологічні мембрани (еритроцити щурів і людини), ліофілізований людський
альбумін сироватки крові (ЛСА) виробництва фірми “Reanal” (Угорщина), IgM
людини фірми Sigma (США), сироватка крові різних видів тварин (щури, кролі,
курки) і людини. Для формування штучної ліпідної мембрани використовували
азолектин (суміш фосфоліпідів із бобів сої) фірми Sigma, США.
Дослідження in vivo проведені на статевозрілих самцях щурів лінії Wistar
розплідника “Глеваха” Київської області (середня маса тіла 160-180 г) і курках
породи Leggorn Васильківської птахофабрики (середня маса тіла 1,5-1,7 кг).
Перед дослідженням тварини проходили двотижневий карантин і клінічне
Таблиця 2.1
Структура фосфорорганічних пестицидів і синтетичних регуляторів росту рослин,
які використані в якості експериментальних моделей
Назва речовин
Структура
Хімічна назва
In vitrо
In vivо
Фосфорорганічні речовини
Афос
О,О-дифеніл-1-ацетокси-2,2,2-трихлоретилфос-фонат
Оксифос-фонат
О,О-дифеніл-1-гидрокси-2,2,2-трихлоретилфосфонат
Хлорофос
(1-гідрокси-2,2,2-трихлоретил)-О,О-диметилфосфонат
ДДВФ
О,О-диметил-О (2,2-дихлорвініл)фосфат
Гетерофос
S-пропіл-О-феніл-О-етилтіофосфонат
Етафос
S-пропіл-О-(2,4-дихлорфеніл-О-етилтіофосфат
Продовж. табл.
Назва речовин
Структура
Хімічна назва
In vitrо
In vivо
Тіоловий ізомер циклофоса
О,S-диметил-О-циклогексилтіофосфат
Тіоновий ізомер циклофоса
О,О-диметил-О-циклогексилтіофосфат
Фоксим
О,О-диетилтіофосфорил-a-оксимоноетилнітрил оцтової кислоти
Фталофос
О.О-диметил-S-(N-метилкарбомоілметил)
дитіофосфат
Карбофос (малатіон)
О.О-диметил-S-[1,2-ди(етоксикарбоніл)етил] дитіофосфат
Ізомалатіон
О.S-диметил-О-[1,2-ди(етоксикарбоніл)етил] дитіофосфат
Продовж. табл.
Назва речовин
Структура
Хімічна назва
In vitrо
In vivо
Малаоксон
О.О-диметил-О-[1,2-ди(етоксикарбоніл)етил] тіофосфат
ЄШ-7
О-метилетил [етилтіоетилметоксикарбоніл] дитиофосфат
ТОКФ
Триортокрезилфосфат
Регулятори росту рослин
Хлорхолін-хлорид
(CH3)3N+CH3CH2Cl . Cl-
Триметил-(2-хлоретил)амоній хлорид
Ресін
5,6,7-трихлор-3-феніл-1,2,4-бензотіадиазин
Симарп
[дихлоргідрат-N1- (3-диметиламіно)-пропілтрихлор-ацетамідин]
Івін
N-оксид
2,6-диметил піридину
обстеження у віварію Інституту екогігієни і токсикології ім. Л.І.Медведя МОЗ
України. Піддослідні й контрольні тварини утримувались у приміщенні при
температурі 21 ± 22 0С, відносній вологості повітря 40-60 %. Раціон щурів
складався з концентрованого
- Київ+380960830922