Ви є тут

Клініко-функціональне обґрунтування диференційованого застосування фізичних чинників в санаторно-курортному лікуванні дітей з запальними захворюваннями суглобів

Автор: 
Гармаш Ольга Ісааківна
Тип роботи: 
Дис. докт. наук
Рік: 
2007
Артикул:
0507U000466
129 грн
Додати в кошик

Вміст

РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. МЕТОДИКИ ЛЕЧЕНИЯ
Исследования проведены в Украинском научно-исследовательском институте детской курортологии и физиотерапии МОЗ Украины. Под наблюдением находилось 620 детей с заболеваниями суставов, в том числе 400 детей с реактивными артритами и 220 детей с ювенильным ревматоидным артритом, которые получали санаторно-курортное лечение в детском специализированном санатории "Здравница" МОЗ Украины, г. Евпатория. Обследование детей проводилось при поступлении в санаторий и в конце лечения. Для комплексной оценки состояния здоровья и сформировавшихся нарушений в основных системах организма больных с РеА и ЮРА использованы:
1. Клинико-функциональная оценка основных параметров, отражающих физическую активность, состояние периферической гемодинамики, функциональную активность скелетных мышц.
2. Показатели состояния функции эндотелия сосудов микроциркуляторного русла, иммунологического статуса.
3. Оценка психоэмоционального состояния, показателей качества жизни.

2.1. Методы исследования
В процессе исследования помимо анамнеза заболевания, учитывали возраст больного, характер начала заболевания, причины, способствующие его развитию и возникновению обострений, количество и последовательность поражений суставов. Особое внимание уделялось наследственной отягощенности, особенно наличию заболеваний суставов и ревматических болезней в семье. При объективной оценке состояния суставов и функции опорно-двигательного аппарата суставной синдром оценивался по индексу Ричи (болезненность при пальпации, определяемая в баллах), наличие припухлости.
Оценка клинического состояния больных проводилась по совокупности признаков болевого синдрома, наличия припухлости, суставного индекса, продолжительности утренней скованности, состояния окружающих мышц, показателей динамометрии, динамики болевого синдрома. Уделялось внимание жалобам на головные боли, плохое самочувствие, нарушение сна, аппетита, быструю утомляемость, плохое настроение. С целью определения активности воспалительного процесса оценивались показатели общего анализа крови и иммунно-биохимических исследований (клеточное и гуморальное звено иммунитета, протеинограмма, серомукоид, гликопротеиды). Все клинико- лабораторные исследования проведены на основе приказов МОЗ Украины "Об унификации лабораторных методов исследования" № 290 от 11.04.72, № 960 от 15.10. 1974, № 1175 от 21.11.1975.

2.1.1. Методы определения эндотелийзависимых факторов
В настоящее время функцию эндотелия исследуют как с помощью функциональных методик, таких как оценка эндотелийзависимой дилятации сосудов с помощью прямой плетизмографии или УЗИ, а также определение маркеров дисфункции эндотелия (ДЭ) - нитратов/нитритов, фермента NO синтетазы, эндотелинов, которые изучались у больных с РеА и ЮРА [419]. Регулирующее воздействие эндотелия определяет структуры и функции сосудов (табл.2.1). Эндотелиальные клетки регулируют тонус и рост гладкомышечных клеток стенки сосудов, гемостаз, воспаление, поддержание окислительно- восстановительного потенциала.
Таблица 2.1
Обеспечение функций эндотелия
Функции эндотелияФакторы эндотелия, обеспечивающие эту функциюРегуляция
тонуса гладкомышечных клеток
сосудистой стенкиСосудорасширяющие: оксид азота NO, простациклин, фактор гиперполяризации, брадикинин,
С-натрийуретический пептид, адреномедулинСосудосуживающие: эндотелин-1, ангиотензин II, тромбоксан А2, Простагландин Н 2, тромобоцитактивирующий факторРегуляция проницаемости сосудовСвободные радикалы: анион супероксида О2-, анион пероксинитрита (ООNO+), оксид азота NO
Протеинкиназа СРегуляция свертываемости кровиПро- и анти тромботические факторы тромбомодуллин, фактор Виллебранда, гепарин- сульфат протеогликан
Активаторы и ингибиторы фибринолиза: тканевой активатор плазминогена, ингибитор тканевого активатора плазминогена-1Ремоделирование сосудовТромбоцитарный фактор роста, инсулиноподобный фактор роста, трансформирующий фактор роста Р, фактор роста фибробластовКлеточная адгезияЕ- селектин, Р-селектин, внутриклеточная молекула адгезии-1 (IСАМ), молекула адгезии сосудистых клеток (VCAM-1)
Для изучения показателей эндотелия определения нитратов и нитритов, эндотелина-1, синтазы использовали иммуноферментный анализ.
Принцип метода. Определение оксида азота основано на ферментном превращении нитрата в нитрит через нитрат редуктазу, после которого проводится калориметрическое определение нитрита - цветообразующего вещества реакции Грисса (набор для определения произведен фирмой "R&D Systems", UK). Реакция Грисса базируется на двухшаговой реакции диазотизации, при которой окисляющий NO2- вырабатывает нитрозирующее вещество, что реагирует с сульфаниловой кислотой и вырабатывает ионы диозония. Эти ионы потом связываются N-(1-naphthyl) ethylenediamine для формирования окрашенной азопроизводной, абсорбирующей свет при 540 нм. По калибровочной кривой устанавливалось количество нитритов в образцах. Для построения калибровочной кривой из стандарта, с известным содержанием нитритов, делали разведения в 2, 4, 8 и т.д. раз (всего 8 стандартов). Начальный раствор содержал 200 мкмоль/л нитрита. После вычисления ОП каждого стандарта была построена оптимальная кривая (рис.2.1). Данные были линеаризированы, применялся анализ регрессии для логарифмической трансформации. Величина достоверности аппроксимации R2=0,99.

Рисунок 2.1. Стандартная кривая для определения концентрации нитрита в сыворотке крови, мкмоль/л.
Плазма собиралась с использованием цитрата или ЭДТА в качестве антикоагулянта. Образцы крови центрифугировались при 1000 об. в течение 30 мин после забора. Приготовленные аликвоты хранились при температуре -200С. Уровень нитритов у детей контрольной группы составил в среднем 38,78±5,1 мкмоль/л. Снижение уровня стабильных метаболитов оксида азота свидетельствует об угнетении или истощении NO-продуцирующей функции