Ви є тут

Обгрунтування та ефективність застосування нового антиоксидантного препарату "Ербісол" при важких опіках очей

Автор: 
Панько Ольга Михайлівна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2004
Артикул:
0404U001647
129 грн
Додати в кошик

Вміст

РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ

Для досягнення поставленої мети роботи нами були проведенi експериментальні та клiнiчні дослiдження.

2.1. Експериментальнi дослiдження

Експериментальна частина роботи проведена на 80 кролях (160 очах), породи шиншила, вагою 2,5-3,0 кг, одного вiку, якi утримувались в стандартних умовах вiварiю. Модель важкого хiмiчного опiку рогiвки виконувалася за методикою П.П. Чечина - Г.В. Легези [194]. Пiсля епiбульбарної анестезiї 0,5% розчином дiкаїну на центральну дiлянку рогiвки встановлювався штамп, змочений 10% розчином гідрооксиду натрію, експозицiя 10 с., пiсля чого очне яблуко i кон'юнктивальний мішок промивали великою кiлькiстю води. У всіх тварин отримали опіки IIIa ступеня.
Завдання експериментального етапу роботи були вирiшенi за допомогою бioхiмiчних i гiстологiчних методiв, а також клiнiчними спостереженнями за особливостями перебігу i завершення опiкового процесу за допомогою загальноприйнятих методiв.
2.1.1. Експериментальна частина роботи виконана в 6 серiях
Завданням першої серії було визначення в системі in vitro АО властивостей препарату "Ербісол" в порівнянні з такими вже відомими АО препаратами як емоксипiн, етамзилат, а також екстрактом плаценти, препаратом який є тканинним препаратом і за відомими властивостями близький до властивостей Ербісолу.
Завдання другої серiї - визначення можливої токсичноiї ї алергчноiї дiї Ербiсолу на iнтактнi тканини ока у кролiв (8 кролiв, 16 очей), з них 4 кролики (8 очей) отримували iнстиляцiї ампульного розчину Ербiсолу в обидва ока 3 рази щоденно, а 4 кролики (8 очей) отримували цей самий препарат 6 разів щоденно. Клiнiчнi спостереження за тваринами проводилися протягом 30 днiв.
Третя експериментальна серiя була виконана з метою клiнiчного дослiдження ефективностi препарату "Ербісол" при хiмiчних опiках очей при рiзнiй частотi iстиляцiй. Для виконання даного експерименту було проведено моделювання хiмiчного опiку рогiвки у 6 кролiв (12 очей), з них 3 кролики (6 очей) отримували iнстиляцiї Ербiсолу 3 рази на день в комплексi з антибактеріальною терапiєю i мiдрiатиками; iншим 3 кроликам (6 очей) таке саме лiкування проводилося 6 разiв в день. Лiкування проводилося протягом 28 дiб.
В четвертій експерименальній групі (2 кролики, 4 ока) вивчали показники ПОЛ в тканинах ока і в крові інтактних тварин.
П'ята серiя (24 кролики, 48 очей) проведена з метою вивчення закономiрностей і особливостей клiнiчного перебiгу опiкового прoцесу без i на фонi лiкування препаратом "Ербісол". В цій серії тварини були згруповані таким чином:
1 група - 6 кролiв ( 12 очей ) лiкування не отримували;
2 група - 6 кролiв (12 очей) отримували iнстиляцiйно антибiотики i мiдратики, 3 рази вдень;
3 група - 6 кролів (12 очей) до лiкування, яке отримувала 2 група було дано інстиляції ампульного нерозведеного розчин Ербiсолу 3 рази на день;
4 група - 6 кролiв (12 очей) окрім трьохразових інстиляцій Ербісолу отримували Ербiсол внутрішньом'язево 1 раз на день по 2 мл щодня. Спостереження i лiкування у всіх групах тварин проводилося протягом 28 дiб.
В шостій серiї (40 кроликів, 80 очей) вивчалася закономiрнiсть бiохiмiчних змiн в кровi i в тканинах ока при хiмiчних опiках очей. В цій серії тварини були згрупованi таким чином:
1 група - 10 кролiв (20 очей) не отримували ніякого лiкування;
2 група - 10 кролiв (20 очей) отримували iнстиляцiї 0,25% розчин левоміцетину, розчину фурациліну 1:5000 3 рaзи на день, 1% розчин атропіну 1 раз на день;
3 група - 10 кролiв (20 очей) отримували лiкування, яке було призначене в 2 групi i в iнстиляцiях було дано ампульний розчин Ербiсолу тричi на день;
4 група - 10 кролiв (20 очей) до лiкування, яке отримувала 3 група було призначено внутрішньом'язеві iн'єкцiї розчину Ербiсолу по 2 мл 1 раз на день. Лікування і спостереження проводилося протягом 28 днiв (табл. 2.1).
2.1.2. Методики експериментальних досліджень
2.1.2.1. Методика проведення гiстологiчних дослiджень
Тварини виводилися з експерименту методом повiтряної емболiї в станi глибокого наркозу (1 мл 0,1% тiопенталу натрiю на 1 кг маси тварин) на 1-у, 3-ю, 7-у, 14-у, 28-у добу. Енуклейованi очi фіксували в 10% нейтральному розчині формалiну, обезводнювали в спиртах висхiдної мiцностi i заливали парафiном. Гiстологiчнi зрiзи зафарбовували по загальприйнятiй методицi гематоксилин-еозином.
2.1.2.2. Бiохiмiчнi методи дослiдження
Бioхiмiчнi дослiдження прoведенi в п'ятій серії тварин. Матерiал для дослiджень - кров i тканини ока отримували вiд iнтактних тварин, а в експериментальних тварин матерiал для дослiджень брали на 1, 3, 7, 14, 28 добу пiсля початку експерименту. Кров брали з вушної вени кроликiв в кiлькостi 5мл. Для проведення бiохiмiчних дослiджень енуклейованi очi помiщали в фiзiологiчний розчин i вiдразу починали препарувати тканини, які пiдлягали дослiдженню. На лід помiщали очне яблуко, охолодженими інструментами відбирали матерiал для дослiдження: вологу передньої камери аспiрували одноразовим інсуліновим шприцом, рогівка відбиралася диференційовано (ділянка опіку і поза ділянкою опіку), кришталик видалявся в капсулі.
Нами було проведено дослiдження АОА препарату для чого використовували модельну систему, яка представляє колоїдний розчин лiноленової кислоти (4мкл/100мл дистильованої води). Дана модельна

Таблиця 2.1
СЕРІЇ, ВИД ТА ОБ'ЄМ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ
СеріїВид дослідженняОб'єм дослідження1Вивчення АО властивостей препарату "Ербісол" в системі in vitro і порівняння його АО властивостей з уже відомими антиоксидантами83 визначення АОА Ербісолу, емоксипіну, етамзилату, екстракту плаценти, плазми крові2Вивчення можливої токсичної чи алергічної дії вітчизняного препарату "Ербісол" на тканини ока інтактних тварин8 кролів (16 очей)3Вивчення ефективності кратності введення препарату "Ербісол" при модельованих хімічних опіках очей 6 кролів ( 12 очей)4Вивчення процесів ПО