2
ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ...........................................................4
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ ИССЛЕДОВАНИЯ..............................7
2.1 .Карбоксиметильная схема модификации полисахаридов - как метод создания новых физиологически активных полимеров....................7
2.2.Синтез карбоксиметилполисахаридов(КМП)..........................7
2.3.ФАН «прививочного тина» с ионными, водородными и координационными связями...................................................10
2.4.Методы фиксации спиртов, аминов и производных гидразина на кар-боксиметилполисахаридной матрице.................................12
2.5.Использование сложных эфиров КМП в синтезе физиологически активных полимеров.................................................22
2.6.Ацилирование аминов карбоновыми кислотами......................30
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ............................................34
3.1.Синтез полисахаридных ацилирующих агентов.....................3-1
3. ]. I Синтез карбоксимстилполисахаридов......................34
3.1.2.Синтез Н+- формы карбоксимегилполисахаридов..............45
3.1.3.Синтез этиловых эфиров карбоксиметилполисахаридов........46
3..2.Ацилирование ароматических аминов.............................48
3.2.1 .Исследование реакций Н4-форм и этиловых эфиров КМП с ароматическими аминами в ДМСО.......................................51
3.2.2.Ацилирование ароматических аминов в диоксане.............59
3.2.3.Реакции КМП и их этиловых эфиров с бензиламином..........68
3.2.4.Ацилирование ароматических аминов в диоксане, содержащем 1-5% воды..................................................73
3.2.5.Ацилирование ароматических аминов в среде низших одноатомных спиртов....................................................78
3.3. Ацилирование гетероциклических аминов.........................84
3.3.1. Ацилирование аминотиазолов..............................87
3.3.2.Ацилирование производных антипирина......................91
3.3.3.Ацилирование производных пиримидина......................93
3.3.4.Ацилирование производных пиридина........................95
3.4.Изучение антимикробной активности некоторых синтезированных производных полисахаридов........................................99
4.ЭКСПЕРИМЕНТ АЛЫ 1АЯ ЧАСТЬ.........................................105
4.1.Приборы и материалы, используемые в исследовании..............105
4.2. Объекты исследования.........................................106
4.3. Химический синтез соединений на основе полисахаридов.........113
4.4. Синтез используемых аминов и модельных соединений............116
4.5. Количественный анализ синтезированных производных полисахаридов .................................................................117
4.6. Определение антимикробной активности соединений..............129
3
ВЫВОДЫ..............................................131
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...................................133
ПРИЛОЖЕНИЯ..........................................150
16
о» имеет и ряд ограничений, связанных с применением водно-органических растворов и необходимостью временной защиты всех не участвующих в реакции функциональных групп аминокислоты |86,110].
Рассматриваемый метод наиболее часто использовали для синтеза сложных эфиров и амидов кабоксиметилцеллюлозы, карбоксиметилсефадек-са, производных сефарозы, хитина, хитозана и др. [57,114,122,133,139,146,
Таким методом получен бензиламид КМД , затем из него получили КМД с заместителем -ОСН2 ССЖНСН2С6Н450зЫа, который проявляет антитромбическую, антикомплементарную, противовоспалительную и противоопухолевую активность, входит в состав стабилизированного фактора роста фибробластов [ 129,140-1431.
Азолидный метод, также как и карбодиимидный, включает предварительную подготовку карбоксильных групп - превращение их в азолиды. «Азолиды» - продукт взаимодействия карбоновой кислоты с N,14:-карбонилдиимидазолом или Ы,Ы’-карбонилдибензтриазолом. В безводной среде азолиды лег ко подверг аются аминолизу или алкоголизу с образованием амидов или эфиров, с гидразином образуются гидразиды [59,109,113]:
где Я - фрагменты полисахаридов или низкомолекулярных веществ
Ацилирование в присутствии реактива Вудворда. В 1961 г. Р. Вудворд с сотрудниками описал применение активированных соединений, полученных на основе Ы-этил-5-фенилоксазолий-3’-сульфоната, в пептидном сигггсзс. Позднее этот метод был использован для получения иммобилизо-
154,156].
О
Я-ё-ОЯ’
ясоон
Аг-С-ОН
17
ванных ферментных препаратов [86}. Преимущество этого метода в том, что реакция протекает быстро и в мягких условиях, целевые соединения легко отделяются от продуктов превращения изоксазолиевых солей, в высоком содержании белка на единицу веса носи геля, в простом кон фоле количества введенных активированных групп носителя [86,130,131].
Акгивация карбоксильной группы изоксазолиевыми солями происходит по следующему механизму:
Реактивом Вудворда активировали карбоксильные группы КМЦ [120}.
«Азидный» метод активации полисахаридкарбоновых кислот известен давно и часто используется для ацилирования аминов, гидразидов и синтеза иммобилизованных ферментов [13,52,54,88]. Одной из первых работ по ковалентному связыванию белков с полимерами была работа Михеля и Эверса, которые в 1949 г. дія этой цели использовали азид карбоксиметилцеллюлозы [132]. Они показали, что азиды реагируют со свободными аминогруппами, гидроксильными и сульфогидрильными группами белка, образуя амиды, сложные эфиры и тиоэфиры.
Азиды карбоновых кислот можно рассматривать, как смешанные ангидриды карбоновых и азотистоводородпой кислот Эти производные являются эффективными ацилирующими агентами [106]. Синтез азидов проводят обычно в несколько этапов: сначала получают эфир карбоновой кислоты, из него гидразинолизом - соответствующий гидразид и уже последний нит-розированием превращают в азид:
- Киев+380960830922