2
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АЭИ - ацетилэгиленимин БПЛ - Р-пропиолакгон ВГ — вирус гриппа
ВПВГП — высокопатогенный вирус грипп птиц
ВСЖ - вируссодсржащая жидкость
ГП - грипп птиц
ДЭИ - димер этиленимина
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИФЛ- иммуиофермептный анализ
кД11К - ДНК- копия с РНК матрицы
КЭ - куриный эмбрион
МЭБ - международное эпизоотическое бюро
НЛФ - неполный адъювант Фрейнда
Н11ВГП - низкоиатогенный вирус |риппа птиц
Г1ЛВ — поверхностно-активные вещества
ГТЛФ - полный адъювант Фрейнда
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЭГ - полиэтиленгликоль
РДП — реакция диффузной преципи тации
РИНА - реакция ингибиции нейраминидазной активности
РГА - реакция гемагглюгинации
PH - реакция нейтрализации
РНК - рибонуклеиновая кислота
РТГА - реакция торможения гемагглютинации
РФ - Российская Федерация
СПФ - свободный от патогенных факторов
ХАО - хориоаллантоисная оболочка
ЭИД 50 - 50% эмбриональная инфицирующая доза (доза вируса, вызывающая инфекционный процесс у 50% инфицированных эмбрионов)
ЭЭЖ - экстраэмбриональная жидкость
- логарифм по основанию десять
- логарифм по основанию два
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Распространение гриппа птиц в мире
1.2 Характеристика вируса гриппа птиц
1.2.1 Классификация вируса ГП
1.2.2 Молекулярная структура генома и организация основных белков при репликации вирусов
1.2.3 Химический состав и устойчивость к действию физико-химических факторов
1.3 Источники и пути передачи вируса гриппа птиц
1.4 Клинические признаки и патологоанатомические изменения при гриппе птиц
1.5 Лабораторная диагностика гриппа птпц
1.6 Специфическая профилактика гриппа птиц
1.7 Основные принципы конструирования и контроля эмульсионных противогриппозных вакцин
1.7.1 Культивирование вируса іриппа птиц
1.7.2 Инактивация вируса и принципы действия инактивантов
1.7.3 Очистка и концентрирование вируссодержащего сырья
1.7.4 Применение адыоваптов в производстве инактивированных вакцин Механизм действия масляных адъювантов
1.7.5 Подбор адъюванта и физические свойства вакцин на основе масляных адъювантов
1.8 Механизм иммунного ответа у птиц и местные тканевые реакции при использовании эмульсионных вакцин
1.9 Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы
2.1.1 Материалы
2.1.2 Методы
Стр.
6
11
11
15
15
17
19
20
24
25 27
34
36
37 40 42 46
48
51
53
56
56
56
59
15
ВГП H5N1 и к подгруппе изолятов Qinghai, впервые выделенных от диких водоплавающих птиц на одноименном озере в 2005 году.
1.2 Характеристика вируса гриппа птиц
1.2.1 Классификация вируса ГП
Вирусы гриппа птиц относятся к семейству Orthomyxoviridae, роду Orthomyxovirus [34]. Па основании антигенных различий в нуклеопротеиде (NP) и матриксном белке (Ml) их разделяют на 3 типа: А, В, С и Thogotovirus.
Вирус гриппа А широко распространен в природе и инфицирует различные виды птиц и млекопитающих, включая людей, лошадей, свиней, китов, тюленей. Вирус гриппа В инфицирует людей, гриппа С - людей и свиней, Thogotovirus изолированы от клещей и комаров [14]. Вес вирусы гриппа птиц относятся к типу
А. Дальнейшее субтипирование основывается на антигенных свойствах двух поверхностных гликопротеидов - гемагглютинина (I IA) и нейраминидазы (NA). На данный момент среди вирусов гриппа типа А идентифицированы 16 подтипов по НА и 9 по NA, которые в клетке хозяина могут реассортировать в различных и неожиданных комбинациях [124, 130, 165, 232, 251].
Согласно Международной номенклатуре обозначение любого штамма вируса гриппа рода А должно проводиться по стандартной схеме, включающей: род/источник изоляции/мссто изоляции/собственный номер изолята/год изоляции/формула вида - серотипы гемагглютинина и нейраминидазы указывают в скобках. После проведения симпозиума в Велтсвилле в 1981 году, использование термина «высокопатогенный грипп птиц» подразумевает, что данный вирус высоковирулентен для кур и соответствует одному или нескольким требованиям МЭБ:
- любой вирус гриппа, вызывающий гибель 6 или более из 8 восприимчивых цыплят в течение десяти дней после внутримышечного введения 0,2 см3 инфицирующей жидкости в разведении 1:10;
- любой вирус гриппа подтипа Н5 или Н7, не соответствующий первому критерию, но имеющий последовательность аминокислот в сайте разрезания гемагглютинина, схожую с таковой вирусов высокопатогенного гриппа птиц;
16
- любой вирус гриппа другого подтипа, способный к размножению на культуре клеток без трипсина и имеющий последовательность аминокислот в сайте разрезания гемагглютинина, схожую с таковой вирусов ВПГП [111, 175].
Вирусы гриппа птиц по их способности вызывать эпизоотии и вирулентности можно разделить на две основные группы. К одной группе относят высоковирулентные вирусы, вызывающие высокую заболеваемость и смертность -это вирусы серотипов Н5, Н7 и некоторые Н9, хотя не все вирусы этих серотипов являются высокопатогенными [240]. Другая группа вирусов обладает средней или слабой патогенностью, но у инфицированных этими вирусами птиц наблюдается снижение яйценоскости и осложнения в перелетах [4, 13, 93, 121]. Однако имеются данные о том, что слабопатогенные вирусы вызывали вспышки заболевания в полевых условиях. Изучение этих вирусов очень важно с экономической точки зрения, поскольку они наносят огромный материальный ущерб птицеводству. В Миннесоте около 30 лет назад более 140 стад индеек были инфицированы слабопатогенным вирусом гриппа птиц, вследствие чего потери составили около 5 миллионов долларов [246].
Многочисленные исследования свидетельствуют о необычайной способности вируса изменять антигенную структуру и как следствие - биологические свойства своих поверхностных гликопро гсидов в процессе циркуляции [12, 22, 211, 212, 222, 229]. Изменчивость приводит к формированию и постоянной замене антигенных детерминант поверхностных антигенов другими, что обеспечивает гетерогенность возбудителей, и, вероятно, основной механизм противодействия популяционному иммунитету. В результате качественных изменений гемагглютинина и нейраминидазы возггикагот новые подтипы вируса гриппа, обуславливающие возникновение пандемий, эпизоотии гриппа. Каждая новая пандемия или эпизоотия вызывается возбудителем, антигенная структура которого в той или иной степени отличается от структуры возбудителя предыдущей вспышки гриппа [30].
Характерной чертой современных эпизоотий гриппа является возможность одновременной циркуляции на протяжении одного и того же периода в одном и том же ареале хозяина нескольких вариантов вируса гриппа, различающихся по антигенной специфичности гликопротеидов.
- Киев+380960830922