Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Характеристика материала исследования
Исследование проведено на препаратах таламуса, полученных от 32 человек обоего
пола в возрасте от 35 до 86 лет, проживавших в г. Харькове и Харьковской
области, умерших от заболеваний, не связанных с патологией центральной нервной
системы. Всего изучено 64 полушария головного мозга.
Применена методика извлечения участка головного мозга без твердой мозговой
оболочки из полости черепа с помощью специального полого перфорированного
цилиндра с заостренным краем входа и последующей фиксацией этого участка
непосредственно в цилиндре, позволяющая сохранить пространственные
взаимоотношения структур мозга («А.С.№ 1119645»).
После вскрытия черепа производили отсечение твердой мозговой оболочки ножницами
на секционном столе. Над мозолистым телом осуществляли плоскостной разрез и
удаляли теменные доли, а также части лобных и затылочных долей. Потом проводили
забор промежуточного мозга, совместив режущую кромку полого перфорированного
цилиндра длиной 70 мм и диаметром 50 мм с утолщением мозолистого тела. Круговым
и вращательным движением цилиндр вводили до упора с костями черепа. Наклонив
голову трупа в направлении к спине, отсекали при помощи скальпеля ствол мозга,
зрительные нервы, воронку. После этого проводили извлечение цилиндра с
промежуточным мозгом.
Затем цилиндр с отобранным участком мозга помещали в 0,5-литровую емкость с 10
% раствором формалина, в котором его выдерживали в течение 7 дней.
Линейным ориентиром служила интеркомиссуральная линия, соединяющая переднюю
(СА) и заднюю (СР) белые спайки мозга (линия СА-СР). Центром системы
внутримозговых координат являлась точка, находящаяся на середине линии СА-СР.
Главная (нулевая) фронтальная стереотаксическая плоскость проходит через данную
точку перпендикулярно линии СА-СР. Срединные сагиттальная и горизонтальная
стереотаксические плоскости проходят через линию
СА-СР – перпендикулярно друг другу и главной фронтальной плоскости. Маркировку
межкомиссуральной линии производили тонким глазным обоюдоострым скальпелем на
каждой половине промежуточного мозга.
Рис. 2.1. Аксонометрическая реконструкция медиального ядра таламуса человека. (
по С.Ю. Масловскому)
На каждый случай была заполнена перфокарта-протокол, в которой были отмечены
пол, возраст, патологоанатомический диагноз, дата вскрытия, № протокола
вскрытия, место вскрытия и основные стереотаксические координаты данного мозга
– длина межкомиссуральной линии.
Таблица 2.1
Распределение материала по полу и возрасту
30-39 лет
40-49 лет
50-59 лет
60-69 лет
70-79 лет
80 лет и
старше
7
6
Таблица 2.2
Распределение материала по полу и длине межкомиссуральной линии.
17мм
18 мм
19 мм
20 мм
21 мм
22 мм
Ж
Таблица 2.3
Распределение материала по возрасту и длине межкомиссуральной линии.
30-39 лет
40-49 лет
50-59 лет
60-69 лет
70-79 лет
80 лет
старше
17 мм
-
18 мм
19 мм
20 мм
21 мм
22 мм
2.2. Методика установления границ ядерных образований зрительного бугра
Из зрительного бугра, фиксированного в 10 % растворе формалина, изготавливали
фронтальные срезы толщиной 3 мм от центра системы внутримозговых координат
(нулевой срез) в направлении к СА и СР.
Для определения границ ядерных образований таламуса применена окраска по L.
Amador.[122]
Каждый срез погружали в раствор №1, приготовленный из кристаллического фенола,
медного купороса и концентрированной соляной кислоты, на 1-2 минуты, подогревая
до температуры 50-60 С. Затем промывали в холодной воде и перекладывали в
раствор №2 холодный, представляющий собой 1 % раствор хлорного железа. В этом
растворе материал держали 2-3 минуты, промывали и перекладывали в раствор №3
также холодный, представляющий собой 1 % раствор желтой кровяной соли. В этом
растворе материал держали до получения нужной окраски.
После окраски участки головного мозга, окрашенные в синий цвет, включающие в
себя правую и левую половины зрительного бугра, в последующем пускались в
проводку с заливкой в парафин по общепринятой методике.[24,76,99]
Рис. 2.1 Фронтальный срез таламуса человека
Окраска по L. Amador
1 – медиальное ядро, 2 – переднее ядро, 3 – латеральное ядро
2.3.Морфометрические исследования
Морфометрические исследования проводились на серийных срезах толщиной 3 мм для
установления формы, размеров и пространственной реконструкции медиального ядра
таламуса и гистологических срезах толщиной в 7 микрон, окрашенных по Нисслю и
гематоксилин-эозином по общепринятой методике. [24,76,99]
Для подсчета нейроно-глиально-капиллярных взаимоотношений медиального ядра
таламуса человека в системе стереотаксических координат проводили
стандартизацию срезов и стандартизацию полей зрения.
Стандартизация срезов осуществлялась следующим образом: выбирали срез,
проходящий через центр системы внутримозговых координат (середина линии СА –
СР), а также учитывали периферийные срезы, имеющие координаты по сагиттальной
плоскости “+6” и “–6” , с присутствием всех тканевых элементов: нейронов,
глиальных клеток и гемокапилляров. Стандартизация полей зрения осуществлялась
так: на каждом выбранном срезе устанавливали центр медиального ядра таламуса.
Подсчет нейронов, глиоцитов и капилляров проводили во всех полях зрения,
проходящих через центр ядра среза в передне-заднем и латерально-медиальном
направлении. В тех случаях, когда не отмечалось выявления всех трех тканевых
элементов таламуса соответственно данным направлениям, подсчет проводили в
полях зрения,
- Киев+380960830922