Раздел 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучено 194 наблюдения рака желудка на секционном и операционном материале, из
них 95 случаев (48,9%) диффузного типа рака, 69 случаев (35,6%) кишечного и 30
случаев (15,5%) смешанного или неклассифицируемого типа. Распределение
материала по полу выявило уже известную из литературных данных закономерность о
более высоком уровне данной патологии среди мужчин по отношению к женщинам в
кишечном типе рака желудка (2,1:1,0) по сравнению с диффузным типом (1,26:1,0),
в случаях смешанного типа рака это соотношение составило 2,3:1,0, т.е. близко к
кишечному типу рака (табл. 2.1).
Таблица 2.1
Распределение материала по полу и возрасту в зависимости от гистологического
типа рака
Характеристики
Гистологический тип
диффузный
кишечный
смешанный
Всего
Пол:
мужчины
женщины
53(55,8%)
42(44,2%)
47(68,1%)
22(31,9%)
21 (70%)
9 (30%)
121
(62,4%)
73
(37,6%)
Возраст:
мужчины
женщины
33-79лет
31-85лет
40-70лет
50-70лет
38-74лет
37-64лет
Средний возраст:
мужчины
женщины
51,8
46,5
57,1
59,9
55,0
58,0
В диффузном раке значительно чаще встречаются случаи с инвазией сосудов и
метастазами (34,7%), чем в кишечном типе рака (20,3%); в смешанном типе рака
инвазия сосудов и метастазирование встретились в 43,3% (высокий процент
инвазии, возможно, из-за малого количество случаев). При кишечном раке процент
случаев с инвазией и метастазированием незначительно отличался у мужчин и
женщин (26,2% и 23,8% соответственно). При диффузном типе рака различия были
более значительные – у мужчин 50% и у женщин 62,4%, в смешанном типе рака
соответственно 31,5% и 60%. Следовательно, можно предполагать, что диффузный и
смешанный рак у женщин обладает более высокими инвазивными свойствами по
сравнению с опухолью у мужчин, и более инвазивны по сравнению с раком кишечного
типа.
Кишечный тип рака желудка чаще локализовался в антральном отделе желудка
(84,1%), чем диффузный и смешанный тип (61,1% и 50% соответственно), реже в
фундальном отделе (7,2%) по сравнению с диффузным (25,3%) и смешанным типом
(36,7%). Диффузный тип рака нередко занимал и антральный, и фундальный отделы,
был тотальным в 9,5%, тогда как среди кишечного рака не было ни одного случая
тотального, а смешанный тип рака в 3,3% был тотальным. Редко рак занимал
кардиальный отдел желудка: в 8,7% случаев кишечного типа, 10% смешанного типа и
4,2% диффузного типа.
Желудки, удаленные по поводу рака, описывались макроскопически с указанием
формы, локализации опухоли, состояния слизистой оболочки. В дальнейшем желудок
изучали гистотопографически. Для этого из всей опухоли вырезались полоски,
которые были разделены на кусочки и зафиксированы в 10% и 4%-ном растворах
формалина, жидкости Карнуа, нефиксированные кусочки быстро замораживались для
изготовления криостатных срезов.
Из фиксированного материала изготавливались парафиновые блоки. Срезы
окрашивались гематоксилином и эозином. Для выявления коллагеновых, эластических
волокон использовалась окраска пикрофуксином по ван Гизону. Для определения
количества митозов использовалась реакция галлоцианина и хромовых квасцов с
нуклеиновыми кислотами, количество митозов подсчитывалось как среднее число
митотических фигур в поле зрения под большим увеличением (х400) из 10
последовательно взятых полей зрения.
Определение активности щелочной фосфатазы необходимо для идентификации
эндотелия функционально активного сосудистого русла, составляющего меньшую
часть общего сосудистого русла. Для определения клеточного инфильтрата стромы
определялась активность кислой фосфатазы на изготовленных в криостате срезах
методом азосечения. Активность кислой фосфатазы обнаруживается в главных
клетках желудка, макрофагах стромы. Неспецифическая эстераза характерна для
клеток диффузной эндокринной системы (апудоцитов), а также кишечного эпителия,
макрофагов стромы, определялась методом азосечения. Активность пероксидазы в
лейкоцитах выявлялась диаминобензидином. Проводили морфометрическую оценку
длины функцианально активного русла по методу Г.Г. Автандилова с использованием
окулярной сетки Г.Г. Автандилова [1, 2].
Для оценки характера слизи пользовались гистохимическими методами –
PAS-реакция, которая позволяет выявлять нейтральные полисахариды, входящие в
состав секрета покровно-ямочного эпителия желудка, мукоидных шеечных
(добавочных) клеток, клеток пилорических и кардиальных желез. Для выявления
несульфатированных гликозаминогликанов (ГАГ) применялась окраска альциановым
синим при рН 2,5, для выявления сульфатированных ГАГ применялась окраска
альциановым синим при рН 1,0.
Из фиксированных кусочков 4% раствором нейтрального формалина после парафиновой
проводки без применения хлороформа изготавливались блоки, а затем на микротоне
производились срезы толщиной 4 микрона для выявления глюкоконъюгатов с
использованием панели из 8 лектинов, меченных пероксидазой. Применялись
следующие лектины: лектин завязей пшеницы (WGA), специфичный к глюкозамину и
сиаловым кислотам, лектин арахиса (PNA), специфичный к D-галактозе,
галактозамину; лектин виноградной улитки (HPA), специфичный к галактозамину и
глюкозамину; лектин сои (SBA), специфичный к D-галактозе и галактозамину;
лектин бузины черной (SNA), специфичный к сиаловым кислотам и галактозамину;
лектин бобовника анагиролистного (LAL), специфичный к L-фукозе; лектин омелы
(VAL), специфичный к галактозе; лектин чечевицы (LCA), специфичный к маннозе,
глюкозе и глюкозамину. Связывание лектинов с рецепторами в клетках зависит не
только от соответствующих моносахаридов, но и от взаимного их распо
- Киев+380960830922