Вы здесь

Індукція та прояв радіоадаптивної відповіді у поколіннях рослин з різним генотипом.

Автор: 
Долгова Тетяна Анатоліївна
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2004
Артикул:
0404U002541
99 грн
(320 руб)
Добавить в корзину

Содержимое

<p>РАЗДЕЛ 2<br /> МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ<br /> <br /> 2.1. Растительный материал<br /> <br /> В качестве растительного материала использовали тест-систему Allium L. двух видов: A. cepa L. (сорт Харьковский 82) и A. fistulosum L. (сорт Пьеро), селекции Института овощеводства и бахчеводства УААН, а также ячмень Hordeum distichon L. трех сортов: Одесский 100, Спомын и Джерело, предоставленные Институтом растениеводства им. В. Я. Юрьева УААН.<br /> <br /> 2.1.1. Характеристика сортов<br /> <br /> Лук репчатый (Allium cepa L.), сорт Харьковский 82 селекции Института овощеводства и бахчеводства УААН. Выращивается в одно- и двугодичной культуре. Вегетационный период 94-105 дней. Устойчивый к заболеваниям. Районирован и рекомендуется для выращивания во всех зонах Украины.<br /> Лук батун (Allium fistulosum L.), сорт Пьеро селекции Института овощеводства и бахчеводства УААН. Вегетационный период 30 дней (скороспелый). Относительно устойчивый к заболеваниям и вредителям. Зарегистрирован в Реестре сортов растений Украины.<br /> Ячмень двурядный (Hordeum distichon L.), сорт Одесский 100 получен в Селекционно-генетическом институте УААН. Рекомендуется для выращивания во всех зонах Украины.<br /> Ячмень двурядный (Hordeum distichon L.), сорт Спомын создан в Селекционно-генетическом институте УААН путем индивидуального отбора в F3 из популяции скрещивания сорта Одесский 100 на сорт Дружба. Среднеспелый. Колос средней длины (8-9 см), среднеплотный (на 4 см колоскового стержня приходится 13 члеников). Зерно удлиненно-эллиптической формы. Рекомендуется для выращивания во всех трех зонах Украины.<br /> Ячмень двурядный (Hordeum distichon L.), сорт Джерело селекции Института растениеводства им. В.Я. Юрьева УААН. Получен методом мутагенной обработки сорта Харьковский 101 способом соединения действия на семена модификатора кармин 0,6 % с химическим мутагеном нитрозоэтилмочевиной 0,04 %. Среднеранней спелости, устойчивый к болезням (8-9 балов). Внесен в Реестр сортов Украины в зонах Лесостепи и Полесья.<br /> <br /> 2.1.2. Объект исследования<br /> <br /> Объектом исследования служили клетки апикальной меристемы корешков прорастающих семян и проростки Allium L., а также взрослые растения Hordeum L. <br /> Корневая меристема лука является тест-системой для исследования влияния радиации на живые объекты по изучению различных мутаций, в том числе и хромосомных аберраций [148].<br /> Использование корней при изучении роста проростков и деления клеток обусловлено относительной простотой и четкостью их анатомического строения, наличием большого количества митозов в меристеме нормально растущего корня, стабильностью роста корня [57].<br /> Allium cepa и Allium fistulosum имеют небольшое количество (2n=16) довольно крупных хромосом, структурные перестройки которых достаточно четко выявляются на стадии анафазы, но различаются степенью конденсации хроматина [78, 129]. Из литературы известно, что у A. fistulosum в норме уровень хромосомных аберраций в клетках кончиков корешков прорастающих семян значительно выше, чем у A. cepa [81].<br /> Выбор ячменя (Hordeum distichon L.) для наблюдения за проявлением РАО в поколениях растений был связан с тем, что он является одним из наиболее исследованных в генетическом отношении представителей культурных растений [28]. Кариотип ячменя представлен семью парами крупных, хорошо изученных хромосом, для которых хорошо идентифицируются структурные мутации. Он обладает низкой частотой спонтанного мутирования и одновременно достаточно высокой чувствительностью к внешним повреждающим воздействиям [28]. Поэтому ячмень представляет собой удобный объект для анализа нарушений ростовых процессов, цитофизиологических и цитогенетических изменений при повреждении растений ионизирующей радиацией.<br /> <br /> 2.2. Облучение семян<br /> <br /> Облучение семян лука и ячменя проводили на одной стадии развития - стадии зрелых, покоящихся воздушно-сухих семян. Облучали ?-радиацией, источником которой был 60Со, на установке "Исследователь" (мощность излучения - 3,21 Гр/мин) в Харьковском национальном университете им. В.Н. Каразина, а также радиоволнами миллиметрового диапазона (? = 61,5 ГГц, ППЭ - 100 мкВт/см2, время облучения - 20 мин), источником которых служил генератор Г4-142 в Институте радиофизики и электроники НАНУ. В качестве адаптирующих и повреждающих доз использовали установленные ранее [119] и известные из литературы [25, 107, 111] дозы облучения семян.<br /> Варианты эксперимента по облучению семян лука:<br />I - контроль (необлученные семена);<br />II - адаптирующее облучение ?-радиацией в дозе 40 Гр;<br />III - повреждающее облучение ?-радиацией в дозе 200 Гр;<br />IV - предоблучение адаптирующей дозой 40 Гр перед действием повреждающей дозы 200 Гр (40 Гр+200 Гр);<br /> Варианты эксперимента по облучению семян ячменя:<br />I - контроль (необлученные семена);<br />II - адаптирующее облучение ?-радиацией в дозе 50 Гр;<br />III - адаптирующее облучение радиоволнами (Р);<br />IV - повреждающее облучение ?-радиацией в дозе 200 или 300 Гр;<br />V - предоблучение адаптирующей дозой 50 Гр перед действием повреждающей дозы (50 Гр+200 Гр или 50 Гр+300 Гр);<br />VI - предоблучение адаптирующим воздействием радиоволнами перед действием повреждающей дозы 200 Гр (Р+200 Гр);<br />VII - совместное предоблучение обоими адаптирующими режимами излучений перед действием повреждающей дозы (Р+50 Гр+200 Гр или Р+50 Гр+300 Гр).<br /> Стимулирующее и угнетающее действия адаптирующих и повреждающих доз облучения определяли по сравнению с необлученным контролем. Проявление РАО в вариантах с предоблучением оценивали на фоне показателей варианта с повреждающей дозой без предоблучения. Время между облучениями составляло 3-4 часа. Для каждой опытной группы брали по 100 штук семян каждого вида Allium L. и 150 штук каждого сорта Hordeum L.<br /> <br /> 2.3. Схема проведения эксперимента<br /> <br /> Для выполнения лабораторного и полевого экспериментов облученные и контрольные семена ячменя были разделены на две части. Одну часть использовали для цитологических исследований (М0), а другую - для посева на опытно</p>