рАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Организация эксперимента
Экспериментальное изучение влияния ПеМП СНЧ на инфрадианную ритмику
физиологических процессов у крыс с различными индивидуально-типологическими
особенностями выполнено на 120 белых беспородных крысах-самцах одинакового
возраста, массой 200-250 г, полученных из опытно-экспериментального питомника
Института гигиены и медицинской экологии (г. Киев, фирма «Феникс»). Выбор крыс
в качестве объекта исследования обусловлен тем, что эти животные являются
наиболее удобным объектом для проведения массовых хронических экспериментов.
Кроме того, установлена чувствительность этих животных к действию слабых ПеМП
различных диапазонов [64; 207; 243; 244].
Исследовали животных с различными индивидуально-типологическими особенностями
двигательной активности, которые определяли при помощи теста ОП. В соответствии
с задачами исследования было обследовано две группы животных с низкой и средней
двигательными активностями и низкой эмоциональностью. Согласно литературным
данным преобладающими в популяции являются крысы со средним уровнем
двигательной активности и низкой эмоциональностью [38; 133; 103; 170; 239].
Поэтому можно считать, что типичная реакция на воздействие ПеМП СНЧ развивается
у животных этой группы.
В таблице 2.1 представлены характеристики поведения крыс, полученные в данном
исследовании.
Животных каждой выделенной группы делили на три подгруппы по 20 особей в
каждой, одна из которых подвергалась действию ПеМП СНЧ, другая – мнимому
воздействию ПеМП (плацебо), а третья служила контролем (рис. 2.1).
Таблица 2.1.
Характеристика поведения крыс с различной двигательной активностью и низкой
эмоциональностью в тесте «открытого поля»
Характеристики выделенных групп
Характеристика поведения
ГДА
(усл.ед.)
ВерДА
(усл. ед.)
Реакция
дефекации
(усл. ед.)
Низкая двигательная активность, низкая эмоциональность (1)
22,00±0,57
р1,2<0,001
3,75±0,25
р1,2<0,001
2,00±0,001
Средняя двигательная активность, низкая эмоциональность (2)
32,80±0,70
8,30±0,15
2,00±0,31
Р1-Р2-достоверность различий по критерию Стьюдента при сравнении с данными
групп, обозначенных в таблице 1-2 соответственно.
Исследование функциональной активности лимфоцитов и нейтрофилов проводили
ежедневно в течение 32-х суток, после очередного трехчасового воздействия ПеМП
частотой 8 Гц, индукцией 5 мкТл. Кровь для исследований брали из хвостовой вены
с 9 до 12 часов. Условия взятия материала для исследований во всех
экспериментах были стандартизированы. Для исследования ритмики поведенческих
реакций, крыс тестировали в ОП ежедневно с 9 до 12 часов в течение 32 суток.
2.2. Определение индивидуальных особенностей крыс
В нашем исследовании ОП представляло собой площадку размером 80х90 см,
расчерченную на квадраты и ограниченную барьером высотой 40 см. В центре
каждого квадрата находилась фишка диаметром 1 см. Такая установка помещалась в
затемненное звукоизолированное помещение.
Тестирование проводилось в одно и то же время суток до кормления. Во время
опыта «поле» равномерно освещалось лампой мощностью 150 Вт, расположенной на
высоте 1 м от уровня пола в центре площадки. Крысу помещали на середину
площадки и в течение двух минут регистрировали следующие показатели:
горизонтальную двигательную активность (число пресеченных квадратов),
вертикальную двигательную активность (число подъемов на задние лапы) и частоту
дефекаций. Реакция дефекации рассматривалась в качестве показателя
эмоциональности.
Рис. 2.1. Схема организации эксперимента.
Примечание: НДА – низкая двигательная активность, СДА – средняя двигательная
активность, ЦНС – центральная нервная система, ЦПС – цитохимический показатель
содержания.
2.3. Исследование функциональной активности лейкоцитов
Неспецифическая резистентность обеспечивается многочисленными факторами
неспецифической защиты, среди которых ведущее место принадлежит клеточным
реакциям, реализуемым в периферической крови и соединительной ткани [60].
Считается, что основная роль в гуморально-клеточных реакциях взаимодействия
крови и соединительной ткани принадлежит лейкоцитам, которые обеспечивают
защитно-приспособительные реакции, развивающиеся при любом внешнем воздействии
на организм. Они являются универсальной «мишенью» и, соответственно,
индикатором различных нарушений гомеостаза. Вместе с тем, при определенных
условиях эти клетки сами могут быть мощными эффекторами и пусковыми факторами,
обеспечивающими каскад защитно-приспособительных реакций на клеточном,
тканевом, органном, системном, организменном уровнях [128].
Согласно современным представлениям, наиболее адекватными в оценке
функционального состояния лейкоцитов являются цитохимические методы [137; 185;
258]. Чувствительность этих методик к действию слабых ПеМП сверхнизкой частоты
показана ранее [122; 205; 207].
В настоящей работе цитохимическими методами исследовали энергетические системы
лимфоцитов – сукцинатдегидрогеназу, a-глицерофосфатдегидрогеназу и
бактерицидные системы нейтрофилов – пероксидазу, неферментные катионные белки.
Каскад защитно-приспособительных реакций организма реализуется благодаря
активности целого ряда ферментов клеток крови, обусловливающих их
функциональную активность. К числу таких ферментов в первую очередь относятся
дегидрогеназы [252].
2.3.1. Исследование энергетических систем лимфоцитов. В настоящее время
получены многочисленные свидетельства того, что ферментный статус лимфоцитов
адекватно отражает функциональное состояние различных органов и систем [137;
252
- Київ+380960830922