Ви є тут

Ефективність модифікованого "реваскуляризуючого" втручання у комплексному лікуванні хворих на сенільну макулярну дегенерацію

Автор: 
Пахомова Аліна Валеріївна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2007
Артикул:
0407U004874
129 грн
Додати в кошик

Вміст

ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Содержание и объем экспериментальных исследований
Целью эксперимента явилось гистоморфологическое изучение и оценка процессов,
происходящих в тканях глазного яблока после проведения модифицированного
«реваскуляризирующего» вмешательства с применением комбинированного
биотрансплантата, содержащего биоматериал Tutoplast® «Fascia temporalis» по
предложенной нами методике, в различные сроки. Экспериментальные исследования
проведены на 32 половозрелых кроликах породы Шиншилла (64 глаза) в возрасте
6-18 месяцев, массой 3 - 5,5 кг, находящихся на стандартном кормовом рационе в
одинаковых условиях содержания вивария.
Экспериментальные животные распределены на три группы: основную, сопоставления
и контрольную (рис. 2.1).
Рис. 2.1. Распределение экспериментальных животных по группам
Контрольную группу составили 7 здоровых кроликов (14 глаз). Группа интактных
животных была выделена для сравнения с основной группой в послеоперационном
периоде (поведение животных, определение срока купирования послеоперационных
изменений, изменение локального статуса в динамике). Два кролика (4 глаза)
взяты для исследования ультраструктуры тканей глазного яблока, пять кроликов
(10 глаз) – для гистологических исследований: по одному кролику (2 глаза) на
каждый послеоперационный срок основной группы.
Для изучения особенностей послеоперационного периода, возможной реакции на
введенный биоматериал, а также для дальнейшего изучения состояния глазного
яблока в пределах одного организма, на разных глазах прооперированы
12 кроликов. На двенадцати правых глазах проведено модифицированное
«реваскуляризирующее» вмешательство с комбини­рованным биотрансплантатом по
предложенной методике, а на двенадцати левых (отнесены к группе сопоставления)
- «реваскуляризирующее» вмеша­тельство без биотрансплантата - прямая
«реваскуляризация хориоидеи» теноновым лоскутом по методике, предложенной
Смеловским А.С. [122].
25 кроликам основной группы (38 глаз), из них: 13 кроликам на обоих глазах
(26 глаз) и 12 кроликам на правом глазу, произведено модифицированное
«реваскуляризирующее» вмешательство с применением комбинированного
биотрансплантата, состоящим из лоскута теноновой оболочки и биоматериала
Tutoplast® «Fascia temporalis». В ходе предложенного вмешательства использован
биотрансплантат Tutoplast® “Membrana” «Fascia temporalis» (зарегистрирован в
Украине 19.12.2001 - свидетельство о государственной регистрации №603/2001,
выданное Государственным Департаментом по контролю за качеством, безопасностью
и производством лекарственных средств и изделий медицинского назначения)
компании «Tutogen Medical GmbH», Germany и Государстве­ного
научно-производственного предприятия «Биоимплант» МЗ Украины (код 3001 90 10
00). Tutoplast® “Membrana” «Fascia temporalis» - это медицинский препарат,
который получен из височной фасции человека и представляет собой диск белого
цвета, диаметром 10 мм. Промышленный образец биоматериала Tutoplast® «Fascia
temporalis» представлен на рис. 2.2.
Рис. 2.2. Фотография промышленного образца биоматериала Tutoplast® «Fascia
temporalis».
При проведении оперативных вмешательств в эксперименте, в качестве
обезболивающего средства использовали раствор тиопентала натрия путем введения
в краевую вену уха кролика (из расчета 0,05 г сухого вещества на 1 кг веса
животного) и средства для местной анестезии - 0,5% раствор алкаина (Alcon).
Хирургические манипуляции осуществлялись стандартным малым набором
микрохирургических инструментов. Операцию проводили под операционным
микроскопом МИКО ОФ. Срок наблюдения составлял от 1 до 365 суток. Для осмотра
животных в послеоперационном периоде использовали методы фокального освещения,
прямой и обратной офтальмоскопии.
2.2. Характеристика методов гистоморфологического исследования
После проведения модифицированного «реваскуляризирующего» вмешательства
комбинированным теноново - коллагеновым биотранспланта­том, содержащим
Tutoplast® «Fascia temporalis», для детализации характера возникших изменений в
тканях глазного яблока в разные сроки, проводили гистоморфологические
исследования. Эвтаназию животных проводили в соответствии с «Требованиями
биоэтики Хельсинкской декларации об эти­ческом регулировании медицинских
исследований» [235]. Сроки энуклеации и проведения гистоморфологических
исследований приведены в таблице 2.1.
Таблица 2.1
Распределение исследуемых глаз кроликов по группам и срокам экспериментальных
исследований
Срок
Группа (количество глаз)
исследования
Основная
Сопостав­ления
Контроль-ная
ВСЕГО
14 суток
10
20
1 месяц
12
3 месяца
12
6 месяцев
10
12 месяцев
10
ВСЕГО
38
12
14
64
Забор глаз кроликов осуществляли в сроки: 14 суток, 1, 3, 6, 12 месяцев после
проведенного оперативного вмешательства и фиксировали в 10% растворе
нейтрального формалина. Кусочки тканей заднего полюса глаза (место операции)
подвергали стандартной проводке для световой и электронной микроскопии.
Готовились парафиновые блоки и срезы. Заливка в парафин производилась по
общепринятой методике. Срезы окрашивали гематоксилин - эозином и пикрофуксином
по Ван - Гизону. Исследование окрашенных срезов проводилось на микроскопе
МБИ-15. Объектом исследования в основной группе был комплекс заднего отрезка
глазного яблока: глубокие слои склеры - комбинированный теноново - коллагеновый
биотрансплантат.
Исследование ультраструктуры биотрансплантата - Tutoplast® «Fascia temporalis»,
комплекса глубок