ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ И КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Общая характеристика экспериментальных и клинических исследований
Экспериментальные исследования проводились в виварии института ГБ и ТТ им. В.П. Филатова АМНУ на 72 глазах (36 кроликов) породы шиншилла массой 2,5-3,0 кг, возрастом 7-8 месяцев, содержащихся в отдельных клетках в стандартных условиях. Все исследования проводились натощак. Кроликов выводили из опытов методом воздушной эмболии с соблюдением правил эвтаназии лабораторных животных [129].
Объектом экспериментальных исследований явилась контузия глаза экспериментальных животных, материалом исследований: ткани глазного яблока (роговица, радужка, цилиарное тело, сетчатка, хрусталик) и плазма крови кроликов.
Задачи экспериментальных исследований были решены с помощью биохимических методов, а так же общепринятых клинических методов наблюдения за особенностями течения и оценкой исходов контузионного процесса в глазах, включая тонометрию.
Для выпонения поставленных задач эксперимента нами было разработано специальное устройствои и методика нанесения дозированной контузионной травмы, которая отличается от применявшейся ранее большей величиной, точностью и стабильностью энергии удара и позволяет стандартизировать эксперимент. На 30 глазах кроликов наносилась контузия средней степени (от 2 до 3 Нм) и на 30 глазах - тяжелой степени (от 5 до 6 Нм). Контрольная группа: 12 глаз - контузия не наносилась. Кролики находились под наблюдением до времени забора материала, что составляло от 1 до 30 дней.
2.2. Устройство и методика моделирования дозированной стандартизированной контузии глазного яблока в эксперименте
Опытным путем было установлено, что для получения у кроликов контузии глазного яблока легкой степени энергия удара должна соответствовать 1 Нм, средней степени от 1 до 5 Нм, тяжелой степени - от 5 до 8 Нм [170].
Наиболее близким к предложенному нами является устройство для нанесения дозированной контузии глаза, которое обеспечивает удары с энергией создающей только легкую степень контузии глаза. Кроме того, недостатком устройства является низкая точность, нестабильность энергии удара и неудобства в работе, так как приходится устройство держать в руках и направлять на объект и выполнять другие манипуляции. Вследствие вариабельности нахождения глазных яблок, в этом случае, удар не всегда будет равномерным.
С помощью предложенного устройства обеспечивается возможность моделировать контузию глаза от легкой до тяжелой степени (удары энергией до 8 Нм), повышение точности, обеспечение стабильности энергии удара и обеспечение удобства в работе с устройством при исследовании.
Конструкция предложенного устройства поясняется схемами на рис.2.2.1 и рис.2.2.2.
Устройство для нанесения ударов дозированной величины содержит: ударный механизм с пружиной 1, стержнем 2 и закреплёнными на нём втулкой 3 и ударником 4, корпусом 5, а также в нем установлены втулка настроечная 7, фиксатор (винт) 8, установленный перпендикулярно оси корпуса, линза опорная 6 с отверстием равным площади ударника, имеется плита 9 со стойкой 10, каретка 11 с винтом фиксирующим 12 и рычагом 13, на котором установлен корпус 5 ударного механизма (рис. 3.1.1).
Стержень 2 перемещается по оси корпуса 5. Одна сторона стержня 2 по его оси направляется втулкой настроечной 7, а вторая направляется втулкой 3 относительно цилиндрической поверхности корпуса 5.
Винт опорный 8 ввёрнут в корпус 5, и может быть установлен в положение для удерживания пружины 1 в сжатом положении или в положении, при котором пружина 1 находится в свободном состоянии.
Оттягиваем стержень 2 вертикально вверх, сжимая при этом пружину и вращением винта опорного 8, подводим его цилиндрический конец под втулку 3 (рис. 3.1.2). Освобождаем каретку 11 от зажима фиксирующим винтом 12, подводим ударный механизм устройства (линзу опорную 6) к исследуемому объекту и закрепляем каретку 11 винтом фиксирующим 12. Для нанесения удара вращением винта опорного 8 отводим цилиндрическую опору винта 8. Сжатая пружина, разжимаясь, перемещает стержень 2 с втулкой 3 и ударником 4 осуществляет удар энергией, на которую настроено устройство.
Потенциальная энергия упругой деформации пружины определяется по известной формуле: E = (1)
где H = Ho - Hi (2)
E - потенциальная энергия упругой деформации пружины,
?H - деформация пружины,
Н0- высота пружины в свободном состоянии,
Нi - высота пружины под нагрузкой,
Pi - сила упругости.
В устройстве деформация пружины определяется и контролируется через величину Х (рис. 3.1.2), которая может быть измерена известным способом (например, штангенциркулем ШЦ - 125).
По схеме на рисунке 2 определяем:
С = Х + a + b + Hi (3)
где a, b, c - размеры деталей,
Х - глубина, на которую завёрнута втулка настроечная 7.
Из уравнений 2 и 3 находим:
X = ?H - a - b + c - Н0 (4)
Это значит, что обеспечения необходимой деформации ?H пружины 1 (которой соответствует сила упругости Pi и потенциальная энергия пружины E = ) необходимо втулку настроечную 7 завернуть на глубину Х.
Для повышения точности, обеспечения стабильности энергии удара и обеспечения удобства в работе с устройством при исследовании, в устройство для нанесения дозированной контузии глаза введены втулка настроечная 7, фиксатор (винт) 8, установленный перпендикулярно оси корпуса, которые позволяют фиксировать и настраивать пружину 1, линза опорная с отверстием равным площади ударника, а так же плита 9 со стойкой 10, каретка 11 с винтом фиксирующим 12 и рычагом 13, на котором установлен корпус 5 ударного механизма, что позволяет стандартизировать эксперимент и локализовать удар.
Методика нанесения дозированной контузии.
Разработанное устройство работает