Ви є тут

Ангіоархитектоніка плаценти людини і структура плацентарного бар’єра в нормі

Автор: 
Блищавенко Юлія Валеріївна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2008
Артикул:
0408U004223
129 грн
Додати в кошик

Вміст

ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Тотальные препараты плаценты вместе с пупочным канатиком (в количестве 40), а
также их отдельные избирательные части (размером 1*1,5) в пределах котиледонов
промежуточного положения получены на базе Полтавского городского клинического
родильного дома и родильного отделения Полтавской центральной районной больницы
с разрешением главных врачей в рамках договора о сотрудничестве между ВГУЗУ
«УМСА» и названными лечебными заведениями с учетом этических и законодательных
норм и требований при выполнении научных морфологических исследований (Табл.1)
[19,29].
Названные препараты были получены при физиологических родах, в возрасте от 19
до 34 года рожавших женщин. Роды происходили в срок 38-40 недель.
В начале все тотальные препараты плаценты подвергали общему анатомическому
исследованию, при котором определяли: форму, размеры (толщину и диаметр),
степень эксцентричности корня пупочного канатика, а также количество, форму и
размеры долей (котиледонов) со стороны материнской поверхности плаценты. Затем
наиболее типичные формы плаценты документировали путем фотографирования
цифровой фотокамерой [82].
После этого было отобрано 10 наиболее цельных по сохранности плацент с
пупочным канатиком, которые служили в целях наливки кровеносных сосудов
самотвердеющей пластмассой и тушью с желатином.
Избирательные части плаценты, иссеченные в пределах отдельных котиледонов
промежуточного положения (между центром плаценты и ее краем) использованы для
проведения микроскопически исследований. (Табл. 1).
Табл. 2.1.
Количественная характеристика исследованного материала
(плацента человека) и методов его препарирования
Возраст роженицы
Методы макроскопии, морфометрии и полихромной инъекции
Микроскопические методы
19 лет
20 лет
21 год
22 года
23 года
24 года
25 лет
26 лет
27 лет
29 лет
30 лет
32 года
34 года
всего
40
27
2.1. Методы полихромной инъекции.
Для этих целей нами использованы, применяющиеся в стоматологической практике,
самотвердеющие пластмассы на акриловой основе, одна из которых «Протакрил»
является не прозрачной, а другая – бесцветной, обладающая прозрачными
свойствами. В качестве цветовой дифференцировки артерий и вен применена паста
ампул шариковых ручек, соответствующего цвета, которая добавлялась в нужном
количестве перед употреблением во время смешивания порошка с мономерной
жидкостью. По консистенции готовая масса должна быть текучей, напоминающей
жидкую сметану.
Данные пластические массы не обладают достаточной дисперсностью, чтобы
заполнить просветы кровеносных микрососудов капиллярного типа. Этот недостаток
оказывается удобным, если целью является изучение тех кровеносных сосудов,
которые доступны для невооруженного глаза.
При изучении синтопических взаимоотношений между кровеносными сосудами
(включающими микрососудистые сегменты) и другими тканевыми структурами плаценты
(соединительнотканные элементы и эпителий) требуются инъекционные массы,
обладающие с одной стороны пластичными свойствами, сравнимыми с мягкими
тканями, что обеспечивало бы в дальнейшем возможность изготовления
гистотопографических срезов, а с другой стороны – степень дисперсности этой
массы должна быть соотносимой с калибром кровеносных микрососудов. Этим
требованиям соответствует цветная тушь на желатиновой основе. Для этого мы
использовали быстрорастворимый пищевой желатин, который доводили до растворения
на водяной бане с последующим добавлением к нему обычной художественной туши
необходимого цвета.
В техническом отношении методы наливки кровеносных сосудов плаценты
осуществляли в такой последовательности:
1. Проведение канюлирования двух артерий и вены пупочного канатика посредством
предварительно подобранных пластиковых трубок необходимого калибра.
2. Осуществление наливки артерий и вены через соответствующие канюли с помощью
предварительно подобранных одноразовых шприцов необходимой емкости. Сразу после
наполнения соответствующего звена (артерии и вены) проводили затягивание,
предварительно наложенных на артерии и вену, лигатур во избежание обратного
вытекания из них пластической массы.
3. Инъецированные таким образом препараты плаценты подвергали кислотной
коррозии. После тщательной промывки и высушивания они служили для изучения
макроскопического строения артериального и венозного звеньев плаценты с помощью
технических приемов, описанных ниже.
Остальные препараты плаценты, инъецированные тушью с желатином, после фиксации
в 10% нейтральном формалине, служили для получения гистотопографических
препаратов с помощью особых методов, описание которых следует.
2.2. Методы изучения инъекционно-коррозионных препаратов.
После коррозии пластмассовые слепки кровеносных сосудов пуповины и всего
детского места плаценты легко доступны для прямого визуального и метрического
исследования. Исключением является хориальная часть плаценты, в которой
отдельные долевые ассоциации, представленные густыми ветвящимися сетями
кровеносных сосудов, перекрывая поля друг друга, в значительной мере затрудняют
их дифференциальный анализ. В связи с этим пришлось прибегнуть к их расчленению
путем отлома отдельных долевых совокупностей в области их стволовых ветвей. Но
перед этой операцией тотальные препараты фотографировали в различных ракурсах с
помощью цифровой фотокамеры на темном фоне в отраженном свете и в проходящем
свете с помощью негатоскопа.
Метрические данные среднего диаметра пластмассовых слепков кровеносных сосудов
плаценты до уровня стволовых ветвей долевых совокупностей получены с помощью
штангенциркуля. Статис