ЗМІСТ
ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ, СКОРОЧЕНЬ І ТЕРМІНІВ
ВСТУП
РОЗДІЛ 1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ
1.1. Сучасні погляди на етіологію ДКМП
1.1.1. Генетична теорія виникнення ДКМП
1.1.2. Вірусно-імунологічна теорія виникнення ДКМП
1.2. Характеристика молекулярного шаперону Hsp
1.2.1. Структура Hsp та функція фолдингу
1.2.2. Регуляція експресії гена Hsp
1.2.3. Локалізація Hsp в клітинах ссавців
1.3. Hsp як автоантиген при серцево-судинних захворюваннях
1.4. Hsp як регулятор апоптозу кардіоміоцитів
1.4.1. Загальна характеристика апоптозу
1.4.2. Особливості апоптозу кардіоміоцитів
1.4.3. Участь білків HSPs в регуляції апоптозу
1.4.4. Hsp та апоптоз кардіоміоцитів
РОЗДІЛ 2. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Матеріали та обладнання
2.1.1. Реактиви та матеріали
2.1.2. Біоматеріали та лабораторні тварини
2.1.3. Обладнання
2.2. Продукція рекомбінантного повнорозмірного білка GroEL та його очищення
2.2.1. Отримання компетентних клітин Е. coli
2.2.2. Трансформацiя бактерiальних клiтин плазмідною ДНК
2.2.3. Нарощування культури клітин E. coli для препаративного виділення
рекомбінантного білка GroEL
2.2.4. Очищення рекомбінантного білка GroEL
2.3. Отримання поліклональних антитіл
2.3.1. Імунізація тварин
2.3.2. Перевірка титру антисироватки методом імуноферментного аналізу
(ELISA)
2.3.3. Синтез афінної колонки
2.3.4. Очищення поліклональних антитіл методами іонообмінної та афінної
хроматографії
2.4. Індукція автоімунного пошкодження міокарда мишей,
подібного до ДКМП людини
2.5. Отримання сумарного лізату із тканини серця
2.6. Отримання цитоплазматичної та мітохондріальної субфракцій
2.7. Визначення концентрації білка за методом Бредфорд
2.8. Електрофоретичне
розділення білків у ПААГ
2.9. Вестерн-блот аналіз (імуноблотинг)
2 Імунопреципітація
2 Імуногістохімічні дослідження
2 Методи роботи з РНК
21. Виділення сумарної РНК
22. Метод зворотної транскрипції
23. ПЛР аналіз
24. Електрофоретичне
розділення продуктів ПЛР в агарозному
гелі
2 Статистичний аналіз
РОЗДІЛ 3. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА
3.1. Отримання та очищення рекомбінантного білка GroEL
3.2. Отримання та характеристика поліклональних анти-GroEL антитіл
3.3. Вивчення експресії гена HSP на рівні білка методом Вестерн-блот аналізу
в тканині серця людини при дилятаційній кардіоміопатії
3.4. Вивчення експресії гена Hsp на рівні білка методом Вестерн-блот аналізу
в тканині сердець мишей із індукованим захворюванням, подібним до ДКМП людини
3.5. Детекція Hsp в тканині сердець методом імуногістохімічного
аналізу
3.6. Виявлення взаємодії між білками Hsp та Bax у кардіоміоцитах людини
методом ко-імунопреципітації
3.7. Вивчення експресії гена HSP на рівні мРНК в тканині серця людини при
дилятаційній кардіоміопатії
3.8. Вивчення експресії гена hsp на рівні мРНК в тканині сердець мишей із
індукованим захворюванням, подібним до ДКМП людини
РОЗДІЛ 4. АНАЛІЗ І УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ
ДОСЛІДЖЕНЬ
ВИСНОВКИ
СПИСОК
- Київ+380960830922