РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Выполненные исследования являются составной частью тематического плана научно-исследовательских работ Никитского ботанического сада УААН - Национального научного центра.
Весь объем лабораторных исследований по культуре органов и тканей клематиса, розы, фикуса лировидного, калладиума, орхидей, юкки, зизифуса, хурмы, фейхоа, актинидии, алычи, абрикоса, сливы, котовника и иссопа выполнен на базе отдела биотехнологии и биохимии растений Никитского ботанического сада УААН - Национального научного центра. Опыты по ПЦР анализу проведены в Южном биотехнологическом центре в растениеводстве УААН и МОН (г. Одесса). Гистохимические исследования выполнены на базе лаборатории физиологии растительной клетки Института биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН (г. Саратов, Россия).
2.1. Исходный растительный материал
В исследованиях в качестве модельных растений использовали виды и сорта семейств: Ranunculaceae, Rosaceae, Ebenaceae, Myrtaceae, Moraceae, Agavaceae, Actinidiaceae, Araceae, Orchidacea, Lamiaceae из коллекционного генофонда НБС-ННЦ.
1. Род Clematis L. - ломонос принадлежит к семейству лютиковых (Ranunculaceae Juss.). Это нежная и ломкая самоцепляющаяся лиана. Крупноцветковые сорта клематиса размножают вегетативным путем, так как в семенном потомстве не сохраняются свойства материнского растения. Для исследований были отобраны ряд сортов различных групп:
а) группа Ланугиноза (сорта Серенада Крыма, Юность, Невеста, Crimson Star) характеризуется массовым цветением весной на перезимовавшем приросте прошлого года. Летом или осенью более слабое цветение может повторится на приросте текущего года. Их побеги достигают длины до 2,5 м. Цветки широко раскрытые, как правило, одиночные, крупные диаметром до 16-20 см, из 6-8 чашелистиков преимущественно светлой окраски;
б) группа Жакмана (сорта Космическая мелодия, Вечный зов). Представители группы отличаются пышным цветением, которое происходит летом на приросте текущего года. На зиму побеги, достигающие длины 3-4 м обрезают до уровня почвы. Сорта этой группы развивают мощную корневую систему и имеют крупные цветки диаметром от 8 до 15 см, чаще всего сине-фиолетово-пурпурных тонов, без запаха, с простым околоцветником из 4-6 окрашенных чашелистиков.
в) группа Витицелла (Ай-Нор, Лесная Опера). Растения обильно цветут на приросте текущего года, поэтому на зиму обрезают до уровня почвы. Это древесные лианы длиной до 3-3,5 м, обычно с желтеющими и обгорающими у основания побегов листьями. Цветки крупные, диаметром до 12 см и более, раскрытые или несколько поникающие, чаще всего из 5-6 чашелистиков, с преобладанием в окраске розово-красно-пурпурных бархатистых тонов.
Растительный материал (побеги с почками) любезно предоставлен сотрудниками отдела дендрологии и цветоводства НБС-ННЦ Е.Г. Донюшкиной и Н.В. Зубковой. Его отбор осуществляли в 1996-2004 гг. в коллекционных насаждениях клематиса в периоды покоя (декабрь-январь) и начала вегетации (февраль-март).
2. Вид Rosa chinensis minima (Sims) Voss. к роду Rosa L. и относится к семейству розоцветных (Rosaceae L.). Миниатюрные розы - это крошечные садовые розы с маленькими полумахровыми или махровыми цветками различных расцветок. Важная биологическая особенность миниатюрных роз - раннее, продолжительное и массовое цветение (с мая до начала заморозков).
В исследования были включены следующие сорта - Цвергкёниг, Бэби Бантинг, 'Рулети, Зе Фэйри, Мистер Блюбёд, Синдерелла, находящиеся в коллекции НБС-ННЦ.
а) роза с белой окраской лепестков - сорт Синдерелла имеет нежно-
розовые, почти белые, мелкие, махровые цветки. Листья зеленые, очень мелкие, изящные. Цветение обильное и длительное;
б) розы с розовой окраской лепестков:
1) сорт Рулети имеет темно-красно-розовый с фуксиновым оттенком бутон. Цветки розовые с легким фуксиновым оттенком, мелкие (3,5-4 см), полумахровые (18 лепестков) с приятным сильным ароматом. В соцветии может быть до 26 цветков на прочных цветоножках и стеблях. Листья зеленые, мелкие, узкие. Сорт рано и обильно цветущий;
2) сорт Зе Фейри характеризуется наличием розовых, ароматных, мелких, махровых цветков, собранных в соцветие (5-6 штук). В процессе цветения окраска цветка изменяется - сначала она розовая, затем светло-фиолетовая, переходящая в белую. Кусты компактные, листья овальной формы, глянцевые. Цветение обильное, часто повторяющееся.
в) розы с темно-красной окраской лепестков:
1) сорт Бэби Бантинг имеет шаровидный заостренный бутон. Цветки ярко-карминово-красные с розовым глазком, мелкие (3-4,5 см), полумахровые (14-18 лепестков), с сильным ароматом. В соцветии до 77 цветков. Побеги прочные, листья темно-зеленые, овальные, кожистые, глянцевые. Цветение обильное;
2) сорт Цвергкёниг - растение с мелкими (до 3 см в диаметре) густомахровыми, душистыми, медленно раскрывающимися цветками темно-красного цвета с бархатистым оттенком. Цветки собраны в большие соцветия;
г) роза с сиреневой окраской лепестков - сорт Мистер Блюбёд представлен растениями с лавандово-лиловыми, в центре беловатыми цветками размером 3-4 см в диаметре, полумахровыми (13-15 лепестков), слабо душистыми, в соцветии по 5-20 штук. Кусты прямые, густые, могут достигать размера до 0,4 м. Листья темно-зеленые, крупные.
Для введения в условия in vitro отбирали побеги миниатюрных роз длиной 3-4 см с апикальными и пазушными почками на протяжении периода вегетации.
Наряду с этим, в исследования по сохранению были включены сорта
роз культивируемые в отделе биотехнологии и биохимии растений НБС-ННЦ в условиях in vitro: миниатюрные (Искорка, Огонек), чайно-гибридные (Аю-Даг, Конрад Хенкель, Благовест, Октябрина, Пестрая Фантазия, Золотая Осень, Золотой Юбилей, Эмми, Клементина), грандифлора (Коралловый Сюрприз, Джим, Дина), полуплетистые (Белянка), плетистые (Девичьи Грезы, Красный Маяк, Крымские Огоньки, Лезгинка), шраб (Херсонес), флорибунда (Красный Мак, Пусста).