- 2 -ОГЛАВЛЕНИЕ
стр.
ВВЕДЕНИЕ ...................................................... 6
Часть 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..................................... 12
* *
Глава 1. Химические и биологические препараты,
применяемые при гельминтозах и акаридозах .. 12
1.1. Антгельминтики............................... 12
1.2. Акарициды ..................................... 21
1.3. Токсичность противопаразитарных препаратов
■ и методы ее определения ...................... 30
Глава 2. Управляемый микробиосинтез как наиболее перспективное направление получения экологически чистых биопрепаратов ......................... 39
2.1. Лабильность метаболизма и адаптивность микроорганизмов-продуцентов - основа
4Г
управляемого биосинтеза БАВ .................. 39
а) Современные концепции физиологической адаптации микроорганизмов ...................... 39
б) Механизмы адаптации микроорганизмов .... 45
2.2. Саморегуляция периодической культуры микроорганизмов и рассмотрение ее как целостной системы организм-среда ............. 57
Глава 3. Методы интегрального контроля культивируемых
микроорганизмов на популяционном уровне .... 65
3.1. Хемилюминесценция............................................................. 65
3.2. Электрометрия ................................ 69
- 3 -
Часть 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ........................... 76
Глава 1. Объекты и методы исследований ................... 76
Глава 2. Научное обоснование перспективности
интегрального биофизического контроля в биотехнологии ................................... 82
2.1. Методические особенности интегрального контроля культивируемых микроорганизмов-продуцентов БАБ...................................... 82
2.2. Установление особенностей развития микробных популяций как целостных адаптивных систем типа организм-среда .... 85
2.2.1. Динамика развития в природных биоценозах........................................ 85
2.2.2. Динамика микробных популяций в условиях, моделирующих природные экосистемы .... 99
2.2.3. Динамика развития на искусственной
среде .................................... 105
2.3. Изучение возможности интегрального экспресс-контроля культивируемых микроорганизмов методами хемилюминесценции
и электрометрии ............................... 123
2.3.1. Хемилюминесцентный анализ ................. 123
2.3.2. Электрометрия ............................. 128
Глава 3. Разработка технологических приемов применения
интегрального электрофизического контроля в процессах микробиосинтеза ..................... 145
- 31 -
боле 2000 наименований препаратов. Поэтому для обеспечения надлежащего контроля их качества созданы соответствующие государственные службы, определены основные методические под-' ходы и задачи, стоящие перед фармакологами, токсикологами, биотехнологами [255, 347].
Токсикологическая оценка лекарственных средств гарантирует отсутствие неожиданных последствий отрицательного действия их на животных и опосредовано на человека.
Анализ литературной информации показывает, что методические подходы, используемые при фармакологической и токсикологической оценке ветеринарных препаратов, совершенствовались с накоплением знаний в области физиологии и биохимии животных, расширением спектра используемых препаратов. При этом классический метод определения параметров острой ток--сичности, предложенный Кербером [465], до сих пор остается базовым и используется для определения среднесмертельной дозы испытуемых препаратов любого вида.
Идея метода проста и заключается в том, что исследуемое вещество вводится подопытным животным в различных дозах и определяется концентрация, вызывающая гибель. Ясно, что полученная выборка значений концентраций (доз) и смертельных исходов животных может быть использована для построения графика их корреляции с дальнейшим определением любого значения функции. Однако зависимость доза-эффект чаще всего имеет сигмоидную форму [29], а в интервале 30-70% летальности' функция почти прямолинейная. Поэтому рядом исследователей предложены значения, соответствующие 0 и 100% летальности, условно принимать за 2,5 и 97,5%, как это делается в извест-
- 32 -
ном пробит-анализе [280, 377, 490].
В этом случае для определения средней летальной дозы может быть использованы метод прямолинейной регрессии, впервые предложенный для этих целей А.Я.Боярским [30]. Уравнение, связывающее дозу препарата - х и эффект (% гибели) - у, имеет вид
у - А
у = А + Вх, отсюда х =----------------,
В
где х и у - доза и % летальности,
А - первоначальное значение у при х=0,
В - коэффициент пропорциональности, показывающий степень связи между дозой и эффектом.
Для определения значений А и В необходимо решить систему уравнений:
ПА + ВІХ = Іу АІх + Віх2 = Іху ,
где п - число опытных доз.
В некоторых работах предлагается упрощенный метод определения указанных величин [249, 377]:
1у - Віх Іхіу Іхіх
А =--------------■ В = (Іху-----------) : (їх2----------).
п п п
Пользуясь найденными значениями А и В можно вычислить не только ЛД50, но и любое значение х. Достоверность полученных данных определяют известными статистическими методами анализа [30].
Если в опыте получен 100% эффект от нескольких доз под-
- Киев+380960830922