]
2
ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ПРОБЛЕМА МУТАГЕНЕЗА И ПРЕДПОСЫЛКИ ДЛЯ 8
ПОЛУЧЕНИЯ АНТИМУТАГЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ФЛОРЫ СИБИРИ (Обзор литературы) ,
1.1. Проблема загрязнения окружающей среды мутагенами и 8
коррекция мутагенного воздействия.......................
1.2. Современные антимутагены синтетического происхождения 23
1.3. Перспективные антимутагены природного происхождения 26
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 32
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 32
2.1. Характеристика объектов исследования....................... 32
2.2. Методики химического исследования.......................... 33
2.3. Методики исследования фармакологической активности....... 53
2.4. Методики морфологических и микроскопических исследований.. 58
ГЛАВА 3. ПОИСК ПЕРСПЕКТИВНЫХ АНТИМУТАГЕНИЬІХ ВЕЩЕСТВ 60
СРЕДИ НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ФЛОРЫ СИБИРИ
і
1
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СБОРА 69
АНТИМУТАГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ
4.1. Обоснование компонентного состава сбора.................... 69
4.1.1. Разработка вариантов прописи сбора..................... 73
4.2. Исследование химического состава сбора..................... 78
4.2.1. Качественное обнаружение основных групп биологически 78
активных веществ........................................
4.2.2. Количественное определение БАВ........................... 82
4.2.3. Исследование элементного состава....................... 88
4.3. Разработка методик стандартизации сбора.................... 89
4.3.1. Методики качественного обнаружения БАВ................... 90
4.3.2. Методики количественного определения БАВ................. 92
4.3.3. Разработка товароведческих показателей сбора............. 97
4.3.4. Изучение микроскопических и морфологических признаков 100
сбора...................................................
ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПОЛИЭКСТРАКТА, 120
ОЦЕНКА ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ
5.1. Выбор рационального метода получения жидкого экстракта и его 120 стандартизация...............................................
3
5.1.1. Получение экстракта с помощью метода турбоэкстракции........ 126
5.2. Исследование фармакологических свойств жидкого 128
экстракта...................................................
5.2.1. Оценка безвредности (острой токсичности).................... 128
5.2.2. Антимутагенная активность................................... 128
5.2.3. Влияние экстракта на цитогенетические нарушения хромосом, 130 вызванные ионизирующей радиацией..................................
5.2.4. Влияние экстракта на активность эксцизионной ДНК-репарации.. 132
5.2.5. Антиоксидантная активность.................................. 133
ВЫВОДЫ............................................................. 134
ЛИТЕРАТУРА......................................................... 136
ПРИЛОЖЕНИЕ......................................................... 156
служить снижение уровней хромосомных аберраций, индуцированных прямым мутагеном фотрином у мышей, которое было показано на фоне индукции микросомальных ферментов фенобарбиталом. Эффект непрямого мутагена циклофосфамида, усиливался в результате химической индукции ферментных систем у мышей, дрозофилы, в тестах на микроорганизмах с метаболической активацией. Аналогичный эффект наблюдается в отношение 2-аминоантрацена и бензапирена, тогда как селен, ингибирующий метаболизм последнего ксенобиотика, одновременно снижал его мутагенное действие [45]. Особое значение имеет комплекс глутатион-8-трансфераз, специализированных на детоксикации электрофилов [75].
Антиоксиданты. Среди известных на сегодняшний день антимутагенов значительно число соединений, обладающих свойствами ингибировать свободнорадикальные процессы. Подтверждением этого служит значительный экспериментальный материал, полученный при исследовании влияния антиоксидантов на индуцированный мутагенез, который позволяет утверждать о наличии взаимосвязи между антиоксидантными и антимутагенными свойствами природных и синтетических соединений. Антимутагенные свойства широко исследованы и установлены в эксперименте in vitro и in vivo для глутатиона, аскорбиновой кислоты, токоферола, каротиноидов и in vitro для антиоксидантных ферментов — супероксиддисмутазы и каталазы [3,12,43,45,75,76,168,175]. В.Н. Георгиевым с соавт. на модели химического мутагенеза показана высокая антимутагенная эффективность убихинонов -природных внутриклеточных ан тиоксидантов терпеноидной структуры [29,30].
Вместе с тем, во многих работах изучение антимутагенности антиоксидантов проводилось вне связи с представлениями о свободнорадикальных реакциях, как источнике эндогенных мутагенов, и роли свободных радикалов в повреждающем действии мутагенов.
К базовым факторам антиоксидантной защиты организма относят некоторые ферменты и витамины (табл 2) [12,22,43,152].
16
Таблица 2 - Базовые факторы антиоксидантной защиты организма
Мишень Агент Функция
о2 Супероксиддисмутаза Превращает 02 в Ы202
н2о2 Глутатион-пероксидаза Превращает Н202 в Н20 и 02
Кагал аза Превращает Н202 в Н20 и 02
Свободные радикалы Р-каротин (провитамин А) Связывают жирорастворимые свободные радикалы
Витамин Е (а-токоферол)
Витамин С (аскорбиновая кислота) Мочевая кислота Связывают водорастворимые свободные радикалы
Мелатонин Связывает жиро- и водорастворимые свободные радикалы
Переходные металлы Хслатные агенты Предотвращают катализ свободнорадикальных реакций переходными металлами, железом и медыо
Как видно из таблицы, повреждающему действию суиероксидного анион-радикала на биологические структуры организма препятствует фермент супероксиддисмутаза, под действием которого происходит утрата мутагенных свойств (дисмутация) этого продукта с образованием перекиси водорода.
Главным лимитирующим фактором образования гидроксильного радикала является активность ферментов - каталазы и глутатионпероксидазы, катализирующих разложение гидроперикиси водорода до воды.
Кроме этих ферментов, в антирадикальную систему защиты клетки входит большое количество низкомолекулярных компонентов, активных в водной и липидной фазах; среди них серосодержащие соединения, каротиноиды, витамины С и Е, фенольные соединения, а также природные внутриклеточные антиоксиданты терпеноидной структуры - убихиноны [10,29,30].
Как уже упоминалось ранее, к настоящему времени изучено значительное число антимутагенов, как среди различных химических соединений, так и среди природных биологически активных веществ [3,15,52,156,171,173]. В связи с тем, что химические соединения кроме антимутагенного действия часто
- Київ+380960830922