СОДЕРЖАНИЕ
Стр.
1. ВВЕДЕНИЕ.................................................. 4
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.......................................... 15
2.1 Синтетические индукторы интерферона - двунитевые РНК .. 17
2.2 Природные индукторы интерферона на основе дсРНК 20
2.3 Методы модификации индукторов интерферонов дсРНК... 26
* 2.4 Лекарственные формы индукторов интерферонов.......... 31
2.5 Заключение по обзору литературы.............. 35
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ....................................... 36-90
3.1 Материалы и методы исследования........................ 36
3.2. Выбор перспективных штаммов киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae для промышленного культивирования... 48
3.3. Разработка состава питательных сред для промышленного культивирования биомассы дрожжей Saccharomyces
cerevisiae киллерных штаммов........................... 50
i 3.4. Результаты изучения возможности использования
газодинамического метода дезинтеграции для разрушения
дрожжей Saccharomyces cerevisiae....................... 57
3.5. Создание новых лекарственных форм индукторов
интерферонов на основе дсРНК киллерных дрожжей
Saccharomyces cerevisiae............................... 61
3.5.1. Выбор оптимального содержания дсРНК и природного
полисахарида в композиционном препарате дсРНК- ПГ 62
3.5.2. Выбор оптимального соотношения дсРНК и синтетического полимера поливинилпирролидона в зависимости от
i молекулярного веса и процентного содержания в комплексе ... 64
3.5.3. Результаты изучение влияния носителей на физико-химические и структурные особенности дсРНК, ответственные за проявление биологических свойств индуктора
интерферона.......................................... 65
2
3.6. Результаты изучения биологических свойств композиционных препаратов
3.6.1. Оценка интерферониндуцирующей активности.......... 80
3.6.2. Оценка среднесмертельных доз...................... 82
3.6.3. Оценка профилактической эффективности на поросятах 83
3.6.4. Результаты изучения эффективности препаратов дсРНК-ПВП и дсРНК-ПГ для профилактики факторных инфекционных болезней поросят в производственных
условиях............................................ 84
3.6.5. Результаты изучения эффективности одновременного использования дсРНК-ПВП и дсРНК-ПГ и антибиотиков у поросят при факторных инфекционных болезнях............ 87
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.................... 91
5. ВЫВОДЫ.................................................. 117
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ................................. 118
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ....................................... 119
7. ПРИЛОЖЕНИЯ.............................................. 135
Патент на изобретение №2215781 «Питательная среда для культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae»
Патент № 2172631 «Индукторы интерферона пролонгированного действия.
Положительное решение о выдаче патента на изобретение «Способ лечения и профилактики желудочно-кишечных инфекционных болезней поросят в условиях промышленного свиноводства» по заявке № 2004111 060/14(011839) от 30 03 2004.
ЛР- 00479971-35-02 Лабораторный регламент на получение индукторов интерферона пролонгированного действия (титул, лист)
ПР- 103 0063-8-03 Промышленный регламент на производство натриевой соли двуспиральной рибонуклеиновой кислоты («ООО Диафарм», титул, лист)
Методические рекомендации «Иммуномодуляторы нуклеиновой природы в профилактике болезней поросят» утверждены Ученым советом ГНУ ИЭВС и ДВ СО РАСХН (протокол № 1от 17января 2006г) подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадеми (протокол № 1 от «17» января 2006г).
Акты производственных испытаний эффективности препарата.
3
Автор благодарит
д.б.н. Масычеву В.И. , д.вет.н. Прудникова С. И. за методическое руководство работой, рук. отдела Даниленко Е.Д. , с.н.с. Фалину В.А., зав. лаб. Терещенко Т.А, Сысоеву Г.М., к.вет.н. Духовского A.A. за огромную помощь в практической работе изучения биологических свойств исследуемых объектов; д.б.н. Масычеву В.И, д.вет.н. Шкиль H.A., д.вет.н. Прудникова С. И., д.б.н. Аликина Ю.С., за ценные советы, дружескую поддержку и помощь в работе при написании диссертации.
К
14
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Борьба с заболеваниями человека и животных является одной из важнейших проблем современной фармакологии. Известно, что от состояния неспецифической системы резистентности организма зависит эффективность профилактики и лечения инфекционных процессов. Поэтому создание новых препаратов должно быть сконцентрировано на таких, которые обладают ^ широким спектром биологической активности и лечебно- профилактическим
действием; у препаратов должна отсутствовать выраженная видовая специфичность; препараты должны иметь высокую степень безопасности.
В решении этой проблемы индукторы интерферона занимают особое место, т.к. наряду с ярко выраженной противовирусной активностью обладают иммуномодулирующей активностью, влияют на неспецифическую резистентность и иммунологические реакции организма. Индукторы интерферона являются видонеспецифичными препаратами, что было показано в исследованиях последних 10 лет [17,18]. Актуальность разработки видо-^ неспецифичных противовирусных препаратов диктуется еще и тем, что
многие пандемические вирусы могут передаваться от животных человеку. Эпидемические вирусы регулярно проникают в популяции домашних и диких животных, прежде всего к домашним птицам и свиньям. Как правило, эти инфекции птиц, свиней, коров часто протекают в виде обширных эпизоотий с 90% летальностью. В случае вируса гриппа Н5Ы1 в Гонконге в 1997 году заразилось 18 человек, 1/3 из которых скончались. Смертность птиц составила 80-90%. Уничтожение поголовья животных при этом наносит огромный экономический ущерб в миллионы долларов.
Мониторинг циркуляции вирусов в 1997 году от кур, а в 1998г от р свиней позволил изолировать вирус Н9Ы2 у птиц, который в марте 1999г.
был выделен от 2 детей с грипиоиодобным заболеванием. Антитела к вирусу были обнаружены у 5% населения Гонконга и у 49% работников птичьих ферм (Д.К. Львов, 2000). Возникает опасность формирования новых пандемических вирусов, которые могут передаваться от животных человеку,
15
- Київ+380960830922