РАЗДЕЛ 2
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы, методика и методы проведения исследований
Для решения поставленных задач, нами была предпринята следующая программа
исследований:
1. Изучение степени загрязнения ртутью почв, воды и кормов в условиях хозяйств
АР Крым.
2. Определение общей нагрузки ртути поступающей из разных сред (с питьевой
водой, кормами, вдыхаемым воздухом, через кожу и т.д.), на организм ягнят
различного возраста, путем установления содержания данного вещества в биосредах
(крови, шерсти, моче и фекалиях).
3. Установление перехода ртути в животноводческую продукцию путем расчета
коэффициента биотрансформации вышеуказанного металла из кормов и воды в
организм овец за период выращивания.
4. Определение характера влияния на организм овец пектинсодержащего препарата
на основании:
а) концентрации ртути в крови и шерсти, а также ее выведения с мочой и калом;
б) картин периферической крови (количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов
и лейкоформулы);
в) содержания общего белка и динамики отдельных белковых фракций;
г) показателей уровня кальция и фосфора в сыворотке крови (изучения действия на
фосфорно-кальциевый обмен);
д) содержания ртути во внутренних органах и тканях животных.
Материалом для проведения исследований служили средние образцы почв, воды,
кормов, кровь, шерсть, внутренние органы и ткани, моча и кал овец цигайской
породы.
Отбор средних проб почвы проводили с глубины пахотного слоя методом конверта в
количестве 0,5-1 кг, высушивали, измельчали в фарфоровой ступке и просеивали
через почвенные сита с размером ячеек 200 меш. Хранили герметично закрытыми без
добавления консерванта при температуре 16-18 °С.
Отбор средних проб воды производили согласно ГОСТу 24481-80.
Корма (сено, солома, силос, зерно) отбирали в соответствии с гигиеническими
рекомендациями по СТСЭВ- 3013-18 и готовили к анализу по СТЭСЭВ –3014-18.
Хранили в полиэтиленовых пакетах без добавления консерванта в холодильнике при
температуре 2-4 °С.
Кровь брали из яремной вены, стабилизировали гепарином из расчета 1 мл/500 ЕД/
на 10 мл крови. Хранили в холодильнике.
Шерсть для анализа выстригали у животного в области боковой стенки грудной
клетки с участка 15х15 см. Хранили герметично закрытыми.
Пробы мочи получали путем создания временного апноэ, помещали в обработанную
посуду, консервировали азотной кислотой (18мл на 100мл). Пробирки с мочой
хранили герметично закрытыми в холодильнике при температуре - 2-4°С.
Кал отбирали непосредственно из прямой кишки. Хранили в полиэтиленовых пакетах
в холодильнике при температуре 2-4 °С.
Внутренние органы (почки, печень, сердце, легкие, селезенка, головной мозг и
др.) и ткани (мышцы, жир и др.) массой 3-5г измельчали скальпелем на стекле, и
хранили без добавления консерванта в морозильной камере холодильника.
Отобранные пробы анализировали непосредственно после минерализации в
герметичных условиях. Масса пробы, взятой для анализа, при минерализации
составляла 0,5 г для почвы, кормов и фекалий; 2 мл – для воды, крови и мочи.
Конечный объем минерализата – 5 мл.
Определение соединений общей ртути в минерализатах выполняли методом
беспламенной атомной абсорбции по методике, разработанной М.Т. Дмитриевым, Э.И.
Грановским и А.Я. Слащевым [218] на приборе «Юлия-2» в лаборатории кафедры
зоогигиены и технологии производства продуктов животноводства Одесского
государственного аграрного университета. Исследование каждого образца проводили
трижды, рассчитывали результаты анализа и усредняли их.
Всего исследовано 1795 проб. В том числе на наличие ртути в паренхиматозных
органах и различных тканях – 570 проб, в крови, шерсти, моче и фекалиях по 290
проб каждой.
Следует указать, что из двух методов – колориметрический и беспламенной атомной
абсорбции, которые применяются в настоящее время для определения содержания
ртути в объектах окружающей среды, кормах и продуктах питания, первый -
морально устарел, так как основан на субъективной визуальной оценке цвета
осадка тетрайодомеркуроата меди. Освоенный нами метод атомно – абсорбционной
спектрофотометрии в настоящее время относят к одним из современных,
высокочувствительных и надежных методов анализа [219-221].
Принцип определения заключается в том, что аналитическую навеску пробы,
предварительно минерализованную в герметических условиях, подвергают
химическому восстановлению ионов ртути в растворе с помощью двухлористого
олова. Выделившиеся пары ртути попадают в измерительную кювету атомно –
абсорбционного ртутного фотометра, которую просвечивают резонансным излучением
с длиной волны 253,7 нм. Измеряют интенсивность света, прошедшего через кювету
до и после введения паров ртути, определяют величину оптического поглощения и
по калибровочному графику находят количество ртути в испытуемом образце.
2.1.1. Устройство и приборы для минерализации проб спектрохимического измерения
ртути в минерализаторах.
Реактор для минерализации состоит из фторопластового сосуда с крышкой, который
помешается в металлический цилиндр, изготовленный из высококачественной стали.
Объем сосуда, в который помещается анализируемая проба и реактивы для ее
окисления, составляет 25 мл.
Герметизация реактора достигается путем навинчивания на стакан накидной гайки,
стягивания и прижимания фторопластовой крышки к сосуду из фторопласта.
Подготовленные сосуды помещали в нагретый до температуры 180°С сушильный шкаф и
оставляли на 2 часа.
После окончания минерализации, когда остынут реакторы, открывают и извлекают
вкладыш.
Для повышения точности результатов анализа проводили 3 параллельных озоления
одной пробы.
Во время проведения анализа исследовали применяемые реактивы на присутствие
- Київ+380960830922