<p style="font-family: 'Times New Roman', 'Times', serif; font-size: 18px; background-color: #ffffff;"><span style="background-color: #ffffff;">РОЗДІЛ 2<br />МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ<br />2.1. Бактеріальні штами<br /> Штами актиноміцетів, використані у даній роботі, наведені у таблиці 2.1. Як тест ? культуру для визначення антибіотичної активності Streptomyces peucetius використовували Bacillus mycoides НВ2. Плазміди, використані в роботі, наведені в табл. 3.2.<br /> Таблиця 2.1.<br /> Штами, використані в даній роботі<br />ШтамМутаціїХарактеристика штамівДжерело походженняS. peucetius ATCC 29050Продуцент даунорубіцинуРНЦА <br />м. Москва, Росія 29050-1Морфологічний варіант штаму 29050; характеризується білим забарвленням спорОтриманий автором29050-2Морфологічний варіант штаму 29050; характеризується сірим забарвленням спор та володіє вищою антибіотичною активністю у порівнянні з штамом 29050-1Те жdnr301dnr301Мутант штаму 29050, стійкий до DNR (30 мкг/мл). Характеризується підвищеним рівнем (в 1,5 раза) антибіотичної активностіТе жdnr502<br />dnr502N - метил - N? - нітро - N - нітрозогуанідин (НГ) - iндукований мутант штаму 29050, стійкий до DNR (50 мкг/мл). Характеризується підвищеним рівнем (в 4 рази) антибіотичної активності. Синтезує жовті антрацикліниТе жdnr405<br />dnr405Ультрафіолет (УФ) - індукований мутант штаму 29050, стійкий до DNR (40 мкг/мл). Антибіотична активність в 3,5 рази вища, ніж така у вихідного штаму. Синтезує жовті антрацикліни Те жdnr34dnr34УФ - індукований мутант штаму 29050, стійкий до DNR (30 мкг/мл). Антибіотична активність у 4 рази вища, ніж така у вихідному штамі. Синтизує жовті антрацикліниТе жrif205rif205Рифампіцин - резистентний мутант штаму 29050-2 стійкий до 20 мкг/мл рифампіцину Те жrif304<br />rif304Рифампіцин - резистентний мутант штаму 29050-2 стійкий до 30 мкг/мл рифампіцинуТе жS. peucetius subsp. caesius ATCC 27952Отриманий, як продуцент DXR з колекції культур РНЦА, Росія<br />РНЦА <br />м. Москва, Росія 27952-1Мрфологічний варіант штаму 27952, характеризується білим забарвленням спорОтриманий <br />автором<br />Продовження табл. 2.1ШтамМутаціїХарактеристика штамівДжерело походження27952-2<br />Мрфологічний варіант штаму 27952, характеризується сірим забарвленням спорОтриманий автором27952-3<br />Мрфологічний варіант штаму 27952, характеризується світло - сірим забарвленням спорТе жglr1<br />glr1НГ - індукований мутант штаму 27952-2 здатний рости на повноцінних середовищах з глюкозою у концентраціях, вищих ніж 2 мкг/мл. Характеризується здатністю рости на середовищі з 2-DOG (50 мМ). Синтезує антрацикліни як у безглюкозному, так і у збагаченому глюкозою (1-5 %) культуральному середовищі. Рівень синтезу антрациклінових сполук у 1,9 раза вищий, ніж такий рівень у вихідному штаміТе жglr2glr2НГ - індукований мутант штаму 27952-2,росте та синтезує антрацикліни як у безглюкозному, так і у збагаченому глюкозою (1 - 5 %) культуральному середовищі. Рівень синтезу антрациклінових сполук у 3,1 раза вищий, ніж такий рівень у вихідному штаміТе жglr3<br />glr3НГ-індукований мутант штаму 27952-2, здатний рости на повноцінних середовищах з глюкозою (2 - 5 %). Рівень синтезу антрациклінових сполук в 1,6 раза вищий, ніж такий рівень у вихідному штаміТе жglr4<br />glr4НГ - індукований мутант штаму 27952-2, росте та синтезує антрацикліни як у безглюкозному, так і у збагаченому глюкозою (1 - 5 %) культуральному середовищі. Синтезує у 0,7 раза більше антрациклінових сполук, ніж вихідний штамТе жglr5<br />glr5НГ - індукований мутант штаму 27952-2. Росте та синтезує антрацикліни як у безглюкозному так і у збагаченому глюкозою (1 - 5 %) культуральному середовищі. Синтезує в 2,1 раза більше антрациклінових сполук, ніж вихідний штамТе жglr6glr6НГ-індукований мутант штаму 27952-2. Здатний рости та синтезувати антрацикліни як у без глюкозному, так і у збагаченому глюкозою (1 - 5 %) культуральному середовищі. Синтезує в 0,6 рази більше антрациклінових сполук, ніж вихідний штамТе ж<br />Продовження табл. 2.1ШтамМутаціїХарактеристика штамівДжерело походженняdnr2043dnr2043DNR - резистентний мутант штаму 27952-2 характеризуються підвищеним рівнем синтезу DXR. Синтезує в 1,3 та 4,3 рази вищі кількості DNR та DXR, відповідно, у порівнянні з вихідним штамом. Перетворює 83 % екзогенно доданого DNR (30 мкг/мл) у DXR. Характеризується підвищеним вмістом цитохрому Р-450 (в 15,7 разів) у порівнянні з штамом 27952-2Отриманий авторомdnr2042dnr2042DNR - резистентний мутант штаму 27952-2, стійкий до 20 мкг/мл даунорубіцину. Характеризується підвищеним вмістом цитохрому Р-450 (в 4,7 разів) у порівнянні з вихідним штамом. Здатний до перетворення 57 % доданого DNR (30 мкг/мл) до DXRТе жdnr2021dnr2021DNR - резистентний мутант штаму 27952-2, отриманий після обробки НГ з наступним висівом на МС з 20 мкг/мл даунорубіцину. Відібраний за підвищеною антибіотичною активністю, синтезує вищі кількості антрациклінових сполук у порівнянні з вихідним штамом Те жdnr100dnr100DNR - резистентний мутант штаму 27952-2, отриманий після обробки НГ з наступним висівом на МС з 30 мкг/мл даунорубіцину. Перетворює 93,4 % даунорубіцину (30 мкг/мл) до доксорубіцину за 48 годин культивування. Концентрація цитохрому Р-450 зросла в 31,4 рази у порівнянні з вихідним штамомТе жdxr2025dxr2025DNR - резистентний мутант штаму 27952-2, отриманий після обробки НГ з наступним ви-сівом на МС з 20 мкг/мл даунорубіцину. Відібран-ний за підвищеною антибіотичною активністюТе жdxr308dxr308DXR-резистентний мутант (стійкий до 30 мкг/мл DXR) штаму, характеризується підвищеним рівнем синтезу DNR (в 2,52рази) та DXR (в 2,8 рази) у порівнянні з вихідним штамомТе жdxr106dхr106DХR - резистентний мутант штаму 27952-2, отриманий після обробки НГ з наступним висівом на МС з 10 мкг/мл доксорубіцином. Відібраний за підвищеною антибіотичною активністюТе жdxr109dxr109DХR - резистентний мутант штаму 27952-2 з підвищеним біосинтезом даунорубіцину та доксорубіцину (в 4,24 та 3,5 рази, відповідно)Те жПродовження табл.2.1ШтамМутаціїХарактеристика штамівДжерело походженняdxr1010dxr1010DXR - резистентний мутант (стійкий до 30 мкг/мл DXR) шт</span></p>
- Київ+380960830922