РОЗДІЛ 2
ПРОГРАМА, МЕТОДИ ТА ОБСЯГ ДОСЛІДЖЕНЬ
2.1. Програма досліджень
Виходячи з аналізу літератури, сформульованих попередньо мети і завдань роботи, до програми досліджень увійшли:
1. Вивчення впливу фуразолідону, 5-НФДА, БАО та їх бінарних і потрійної сумішей на органолептичні властивості води - кольоровість паралельно за міжнародними стандартами ІSО/ТК-7887 та ГОСТ 2874-82 і СанПіН № 383.
2. Розробка методів вимірювання концентрацій досліджуваних речовин з оцінкою ступеню стабільності речовин при проведенні їх гідролізу в водогінній і дистильованій воді при 200 С і 1000 С та взаємодії речовин з активним хлором.
3. Вивчення впливу як окремих речовин, так і їх різноманітних сумішей на загальний санітарний режим водойм загальноприйнятими методами, а також з додатковим використанням культури В. Aerobacter Aerogenes № 4041 (реакція гальмування дегідрогеназної активності) як індикаторної речовини з ряду адаптованої мікрофлори паралельно оцінці БПК.
4. Вивчення та аналіз комбінованої дії ксенобіотиків в складі потрійної суміші фіксованого (1:1:1) і змінного (технологічного - 1:8,46:50) складу фуразолідону, 5-НФДА, БАО за ПКорг, ПКсан, ПКтокс.
5. Проведення токсикологічної оцінки досліджуваних речовин при одноразовому роздільному оральному надходженні в організм теплокровних тварин, а також при оральному введенні їх бінарних та потрійної сумішей.
6. Вивчення кумулятивних властивостей фуразолідону, 5-НФДА, БАО при їх роздільному і сумісному введенні per os і встановлення МНД за показниками ПДп екс, виражених у вигляді ДЕ500 - максимально неефективних доз, та класу небезпечності окремих речовин і сумішей в умовах одномісячного підгострого токсикологічного досліду.
7. Обґрунтування ГДК фуразолідону, 5-НФДА, БАО і ОДР потрійної суміші технологічного складу з визначенням індикаторної речовини у воді водоймищ.
8. Розробка заходів щодо очищення стічних вод від суміші фуразолідону + 5-НФДА + БАО і профілактики забруднення води відкритих водойм.
2.2. Методи та обсяг досліджень
2.2.1. Загальна схема обґрунтування ГДК окремих препаратів і їх сумішей в воді водойм. Вивчення токсичних властивостей фуразолідону, 5-нітрофурфуролдіацетату (5-НФДА), N-бензіліден-3-аміно-2-оксозолідону (БАО) та їх суміші фіксованого і технологічного складу при пероральному введенні, їх вплив на органолептичні властивості води і санітарний режим водойм проводили згідно з "Методическими указаниями по разработке и научному обоснованию ПДК вредных веществ в воде водоемов" № 1296-75 ?103? та доповненням до них у вигляді "Методических указаний к экспериментальному изучению процессов трансформации химических веществ при их гигиеническом регламентировании в воде" № 2966-84 ?104?; "Методических рекомендаций по гигиенической оценке стабильности и трансформации химических веществ в водной среде (общие требования)" № 2173-80 ?106? та з "Методическими указаниями по научному обоснованию гигиенических нормативов (ПДК, ОДУ) лекарственных средств в воде" (М., 1992) ?112?.
Крім того враховували основні положення щодо нормування препаратів змішаного складу у воді, які викладено в "Методических указаниях МУ2.1.5.720-98. Обоснование гигиенических нормативов химических веществ в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования" (М., 1998) ?109? та "Методических указаний по разработке нормативов предельно допустимих вредных воздействий на поверхностные водные объекты" (М., 1999) ?108?, а також Гигиенических нормативов. ГН 1.1.701-98 "Гигиенические критерии для обоснования необходимости разработки ПДК и ОБУВ (ОДУ) вредных вешеств в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населеннях мест, воде водных объектов" (М., 1998) ?31?.
Відповідно до вищенаведених рекомендацій та вказівок і був визначений обсяг досліджень, які виявляють значення тих хімічних факторів, що можуть зустрічатись хоча б епізодично у природі та при використанні води населенням для господарсько-побутових потреб і розробки заходів профілактики ?163?.
2.2.2. Методи визначення фуразолідону, 5-нітрофурфуролдіаце тату, ?-бензіліден-3-аміно-2-оксозолідону у воді. Фотоелектроколо риметричний метод визначення у воді фуразолідону був розроблений на кафедрі токсикологічної і аналітичної хімії Львівського національного медичного університету проф. Крамаренко В. Ф. та доц. Галькевич І. І. з нашою участю. Метод ґрунтується на реакції з водним розчином гідроксиду натрію, під впливом якого відбувається розрив фуразолідонового кільця і утворюється альдегід, що має фіолетове забарвлення. Оптична густина забарвленого розчину визначається за допомогою ФЕК-56 М (світлофільтр № 5, зелений) при довжині хвилі 490 ± 10 нм у кюветі з товщиною шару рідини 20 мм. Розчином порівняння є суміш, що складається з 0,4 мл водного розчину гідроксиду натрію; 3,0 мл ацетону і 16,6 мл диметилформаліду. Межа вимірювання у досліджуваному об'ємі проби - 5 мкг (0,005 мг); у воді - 7 мкг (0,007 мг) при відбиранні 0,5 дм3 води. Діапазон концентрацій, що вимірюються, від 14 мкг (0,014 мг) до 100 мкг (0,1мг) в 1 дм3 води. Середня величина визначення стандартної кількості фуразолідону для води складає 85,6 %. Надійна ймовірність при р = 0,95 та n = 5 є 85,6 ± 8,9 %. Визначенню не перешкоджають 5-НФДА та БАО.
Фотоелектроколориметричний метод визначення 5-НФДА у воді був розроблений к.фарм.н. Кузьмицькою А. Е. з нашою участю. Визначення 5-нітрофурфуролдіацетату у воді ґрунтується на вимірюванні світлопоглинання забарвлених розчинів, які утворюються при взаємодії 5-НФДА з солянокислим аніліном у присутності оцтової кислоти. При нагріванні суміші проходить гідроліз 5-НФДА з утворенням 5-нітрофурфурола, який взаємодіє з аніліном і утворює основу Шиффа жовтого кольору. Оптичну густину забарвлених у жовтий колір розчинів вимірюють за допомогою фотоелектроколориметра КФО, використовуючи синій світлофільтр № 1 (? ефф. 400 ± 5 нм) і кювету з товщиною шару рідини 10 мм. Розчином порівняння є суміш 5-НФДА та етилового
- Київ+380960830922