РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
З урахуванням сучасних даних про політропність механізмів розвитку уражень шкіри та ранового процесу для успішної фармакотерапії останніх необхідно надавати багатоспрямовану дію як на етіологічні, так і на патогенетичні сторони патологічного процесу [6, 7, 175, 178, 179, 186, 188]. З цією метою лікарські засоби повинні сприяти очищенню рани від некротичних мас, виявляти, поряд з достатньою антимікробною дією протизапальну активність, знижувати больову чутливість травмованих тканин, сприяти поліпшенню умов для регенерації і прискорення епітелізації в зоні ушкодження [6, 87, 180, 181, 183, 194, 197, 200]. Такий широкий вплив на зону ураження мають комбіновані препарати для місцевого застосування.
У зв'язку з наведеним, а також враховуючи потребу практичної медицини в розширенні номенклатури засобів для лікування ранового процесу та запальних уражень шкіри, об'єктом наших досліджень була обрана нова комбінована мазь "Мірамеф", технологія якої була розроблена на кафедрі заводської технології ліків Національного фармацевтичного університету під керівництвом професора В.І.Чуєшова.
Як діючі компоненти до складу мазі "Мірамеф" були введені:
- Препарат із групи НПЗЗ - мефенамова кислота, яка виявляє протизапальну та знеболюючу дію ?15, 52, 72, 82, 100?.
- Катіонна ПАР мірамістин. Проявляє антимікробну та фунгіцидну активність. Спектр дії включає як грам (+), так і грам (-) мікроорганізми. Здійснює фунгіцидну дію по відношенню до дріжджевих та дріжджеподібних грибів, а також дерматофітів. Мірамістин має виражені антибактеріальні та імуномодулюючі властивості ?21, 52, 70, 95, 114, 121, 124?.
- Стимулятор репаративних процесів. Спочатку як репарант до складу мазі був введений вітамін А, який здійснює кератопластичну дію, проявляє антиоксидантні та мембраностабілізувальні властивості, підсилює синтез ДНК. У ході скринінгових досліджень з урахуванням технологічних особливостей виготовлення мазі вітамін А було замінено на декспантенол, який є провітаміном В5, входить до складу ацетил-КоА і бере участь в процесах формування і регенерації шкіри та слизових оболонок ?52, 101, 110, 126?.
- З метою покращення пенетрації компонентів мазі в тканини до складу мазі введено диметилсульфоксид, який проявляє місцевознеболювальні, антимікробні, антиоксидантні, протизапальні властивості та традиційно використовується у фармацевтичному виробництві як провідник лікарських засобів через біологічні мембрани ?17, 28, 44?.
Для запобігання пересихання рани та ушкодження грануляційної тканини використана полімерна основа з помірною осмотичною активністю, компонентами якої є ПЕО-400, ПЕО-1500 та пропіленгліколь. Основа має гідрофільні властивості та м'яку осмотичну дію (170 %).
Технологія отримання мазі описана у патенті.
Кислоту мефенамову просіюють на вібраційному грохоті. Готують концентрат кислоти мефенамової в реакторі шляхом її суспендування з часткою пропіленгліколю. Мірамістин розчиняють в частині пропіленгліколю в реакторі.
Заздалегідь відважені на вагах пропіленгліколь, ПЕО-400, ПЕО-1500 сплавляють в реакторі при температурі 70?С і перемішують до отримання однорідної прозорої маси.
В одержану мазеву основу вводять розчин мірамістину в пропіленгліколі, перемішують, потім вводять концентрат кислоти мефенамової та декспантенол. Одержану суміш охолоджують до 50?С та вводять диметилсульфоксид. Гомогенізацію мазі проводять шляхом перемішування у реакторі мішалкою до повного охолодження.
Готова мазь є пластичною масою білого кольору зі слабким специфічним запахом.
Вміст основних діючих компонентів мазі:
мірамістину - 0,5 %;
мефенамової кислоти - 1,0 %;
декспантенолу - 2,5%;
диметилсульфоксиду - 3 %;
основи (суміш ПЕО-400, ПЕО-1500 та пропіленгліколю) до 100%.
Аналіз складу мазі і наведені в огляді літератури дані про фармакологічні властивості діючих речовин мазі "Мірамеф" дозволили припустити наявність у препарату різних видів фармакологічної дії.
Виходячи з мети і завдань дисертаційної роботи, видавалося доцільним спланувати експериментальні дослідження таким чином, щоб спочатку провести фармакологічний скринінг різних композицій мазі за протизапальною та репаративною дією, а потім, обравши оптимальний склад мазі, дослідити її ефективність на модельних патологіях запальних уражень шкіри та ранового процесу за такими напрямками фармакологічної дії, як проти алергічна, протизапальна, репаративна та антибактеріальна.
Для скринінгу були надані експериментальні зразки мазей, склад яких наведений у таблиці 2.1.
Таблиця 2.1
Склад виучуваних експериментальних композицій мазі "Мірамеф"
№ п/пДіючі
компонентиСклад
№ 1Склад
№ 2Склад
№ 3Склад
№ 41.Мефенамова кислота0,5%1%0,5%1%2.Мірамістин0,5%0,5%0,5%0,5%3.Вітамін А250000 ОД250000 ОД250000 ОД250000 ОД4.Диметилсульфоксид--3%3%5.Мазева основадо 100 %до 100 %до 100 %до 100 %
Невід'ємною складовою патогенезу уражень шкіри незалежно від етіологічних чинників є запалення [26]. Тому на першому етапі скринінгові дослідження різних комбінацій мазі проводили за протизапальною дією з використанням різних за етіологією експериментальних моделей запалення: термічного запалення лапи у мишей, карагенінового набряку лапи у щурів та скипидарного дерматиту у щурів.
Як препарати порівняння на цьому етапі роботи були обрані декілька зовнішніх м?яких лікарських форм (мазь, крем, гель), близьких до виучуваних композицій за складом, фармакологічною дією та показаннями до застосування:
* мазь "Мефенат", виробництва "Фармак", (склад: мефенамової кислоти - 0,5%; вініліну - 10%) - препарат проявляє протизапальні, антимікробні та репаративні властивості, найбільш близький за складом до досліджуваних композицій [52];
* мазь "Тридерм", виробництва "Schering-Plough", (склад: бетаметазону - 0,5%; гентаміцину сульфату - 0,1%; клотримазолу - 1%) - препарат проявляє протизапальну, анти