ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Экспериментальные исследования выполнены на 751 животном, в том числе на 671
белой нелинейной крысе обеих полов массой 180-220 г, 70 белых нелинейных мышах
массой 18,0-20,0 г, 10 кроликах породы Шиншилла массой 2,5-3,0 кг, выращенных в
питомнике вивария ЦНИЛ НФаУ.
Предметом фармакологических исследований были ректальные суппозитории с
условным названием «Пантезин», разработанные на кафедре заводской технологии
НФаУ под руководством профессора В.И.Чуешова.
Состав суппозитории:
Декспантенол – 0,1 г
Анестезин – 0,1 г
Пироксикам – 0,02 г
Эмульгатор № 1 – 0,06 г
Полиэтилен оксид 400 – 0,17 г
Полиэтилен оксид 1500 – 1,55 г
Распределение животных по сериям экспериментов, согласно задачам исследования,
приведено в таблице 2.1.
Таблица 2.1
Распределение животных по сериям экспериментов
п/п
Серии экспериментов
Количество и вид животных
1.
Определение острой токсичности и эффективной дозы суппозиториев «Пантезин»
76 белых нелинейных крыс
30 белых нелинейных мышей
Продолжение таблицы 2.1
2.
Определение механизмов антиэкссудативного действия суппозиториев «Пантезин»
150 белых нелинейных крыс
3.
Влияние суппозиториев «Пантезин» на процессы ПОЛ
30 белых нелинейных крыс
4.
Изучение репаративной активности суппозиториев «Пантезин» на моделях
асептических и инфицированных линейных резаных ран и плоскостной раны кожи
90 белых нелинейных крыс
5.
Изучение влияния суппозиториев «Пантезин» на синтез нуклеиновых кислот и
морфометрические показатели на модели полнослойной раны.
60 белых нелинейных крыс
6.
Изучение морфологических изменений слизистой оболочки прямой кишки при лечении
формалинового проктита суппозиториями «Пантезин»
55 белых нелинейных крыс
7.
Влияние суппозиториев «Пантезин» на течение экспериментальных проктитов,
вызванных введением фенола, формалина.
120 белых нелинейных крыс
8.
Изучение анальгетического действия суппозиториев «Пантезин»
40 белых нелинейных мышей
Продолжение таблицы 2.1
9.
Определение местноанестезирующего действия суппозиториев «Пантезин»
10 Кроликов породы Шиншилла
10.
Влияние суппозиториев на органы и системы в хроническом эксперименте
40 белых нелинейных крыс
11.
Изучение возможного гонадотропного и эмбриотоксического действия суппозиториев
«Пантезин»
50 белых нелинейных крыс
Всего использовано животных – 751
Острую токсичность суппозиториев «Пантезин» изучали на двух видах животных
(белых нелинейных мышах массой 18,0-20,0 г и белых нелинейных крысах обоего
пола массой 180,0-200,0 г) при двух путях введения (ректальном и
внутрибрюшинном). Для внутрибрюшинного введения использовали 50 % водную
суспензию суппозиториев «Пантезин», которую вводили в объеме 1мл однократно.
Ректально суппозитории вводили с интервалом в 45 минут в равномерно
возрастающих дозировках действующих веществ 500, 1500, 2500, 3500 и 5000 мг/кг
в течение светового дня. С целью предупреждения вытекания суппозиториев,
которые расплавлялись в прямой кишке, анус закрывали специально изготовленными
стеклянными пробочками. Наблюдение за животными в обоих экспериментах проводили
на протяжении 14 дней [41, 102].
Эффективная доза суппозиториев «Пантезин» и ее доверительные границы были
рассчитаны по методу «двух точек» (В.Ю.Урбаха) [63]. Метод предусматривает
испытание двух доз вещества, избранных с таким расчетом, чтобы частота
регистрации альтернативного эффекта в одном случае была менее 50 %, а в другом
– более. Расчет производили, используя уравнение прямой, проходящей через две
точки
, (2.1)
где
X1 и X2 – значения двух крайних испытанных доз, вызывающих эффект у менее и
более 50% животных;
Y1 и Y2 – соответствующие дозам X1 и X2 проценты эффекта.
При решении уравнения относительно Х, подставляли в формулу значения У, равные
50 %, 84 % и 16 % эффекта, соответствующих ЕД50, ЕД84 и ЕД16.
(2.2)
Для определения доверительных границ рассчитывали у , m
2 у = ЕД84-ЕД16 (2.3)
m – средняя ошибка среднеэффективной дозы по Миллеру-Тейнеру и равна:
(2.4) где: N – общее число животных в группе.
Доверительные границы ЕД50 находили при р = 0,05 для степеней свободы f = N –
1.
Определение антиэкссудативной активности проведено на моделях субплантарного и
интракутантного введения флогогенов.
Изучение антиэкссудативного эффекта при субплантарном введении выполняли на
моделях острого каррагенинового, декстранового, гистаминового, каолинового и
формалинового воспаления [137, 158]. Опыты были проведены на 90 белых
нелинейных крысах массой 180-200 г обоего пола, которые были распределены на 3
группы (по 30 крыс в каждой). В каждой группе было сформировано 5 подгрупп (по
6 крыс в группе), распределенных по виду флогогенных агентов, вызывавших
воспалительный отек. За час до введения флогогенов на стопы животных подопытных
группы наносили размягченный состав суппозиториев «Пантезин»; животным групп
сравнения – суппозитории с пироксикамом; животные группы контроля получали
суппозиторные основы без действующих веществ.
Величину отека измеряли при помощи онкометра. Антиэкссудативную активность
рассчитывали по формуле, в %:
(2.5)
где АА – антиэкссудативная активность;
Роп – прирост объема стопы в опытной группе;
Рк – прирост объема стопы в контрольной группе.
Определение проницаемости сосудистой стенки при интракутантном введении
флогогенов проводили на передней стенке живота экспериментальных животных. Было
сформировано 10 серий экспериментов (по 6 животных в группе). За 2 часа до
эксперимента животным опытных групп ректально вводили суппозитории «Пантезин» в
дозе 40
- Київ+380960830922