РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Опыты по изучению бактерицидных свойств потенциальных дезинфектантов, разработке методики определения их бактерицидной активности в отношении возбудителей туберкулёза и атипичных микобактерий были проведены в период с 1991 по 2003 годы в условиях лаборатории изучения туберкулёза Института экспериментальной и клинической ветеринарной медицины Украинской академии аграрных наук.
Исследование ультраструктуры микобактерий в норме и после воздействия дезинфицирующих препаратов методом электронной микроскопии были проведены в лаборатории патоморфологии Института общей и неотложной хирургии Академии медицинских наук Украины.
Тест-культуры, питательные среды, лабораторные животные. В опытах использовали референтные штаммы возбудителей туберкулёза бычьего вида, птичьего вида и атипичных микобактерий:
Mycobacterium bovis (штамм Vallee), получен из Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. А.А. Тарасевича в 1990 году, музейный, патогенен для крупного рогатого скота, кроликов, морских свинок.
Mycobacterium avium (штамм ИЭКВМ УААН), выделен путём селекции лабораторией изучения туберкулёза ИЭКВМ УААН в 1999 году, производственный, патогенен для кур, свиней, кроликов.
Mycobacterium fortuitum (штамм 122), получен из Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. А.А. Тарасевича в 1995 году, музейный, непатогененный для сельскохозяйственных и лабораторных животных.
Mycobacterium intracellulare (штамм 78-98), получен путём селекции лабораторией изучения туберкулёза ИЭКВМ УААН в 1998 году, производственный, непатогененный для сельскохозяйственных и лабораторных животных.
Mycobacterium scrofulaceum (штамм 31-82), выделен путём селекции лабораторией изучения туберкулёза ИЭКВМ УААН в 1982 году, производственный, непатогененный для сельскохозяйственных и лабораторных животных.
Тест-культуры возбудителя туберкулёза бычьего вида Mycobacterium bovis (штамм Vallee) выращивали на глицериновом картофеле Павловского, в течение 30 - 45-ти суток при температуре 37?С.
Тест-культуры возбудителя туберкулёза птичьего вида Mycobacterium avium (штамм ИЭКВМ УААН) выращивали на глицериновом картофеле Павловского, в течение 14 - 21 суток при температуре 37?С.
Тест-культуры атипичных микобактерий Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium intracellulare и Mycobacterium scrofulaceum использовали после 14 - 21 суток инкубации на глицериновом картофеле Павловского при температуре 37?С.
Световую микроскопию мазков, приготовленных из тест-культур микобактерий и окрашенных по методу Циля-Нильсена, проводили с помощью микроскопа фирмы "ЛОМО" (Россия), типа "Микмед-1", при увеличении 40?100.
В опытах по определению бактерицидной активности дезинфектантов использовали питательную среду для культивирования микобактерий (Декларационный патент Украины на изобретение UA 29901А, от 13.10.1997) [213].
В качестве лабораторных животных для проведения исследований биологическим методом использовали здоровых морских свинок весом 300-350 г.
Дезинфицирующие средства. При проведении опытов по определению бактерицидной активности в отношении возбудителей туберкулёза и атипичных микобактерий было испытано 25 препаратов и композиций из различных групп химических соединений.
В препаратах "Бациллол плюс", "Корзолекс базик", "Корзолин іД", "Кристалл-900", "Биоклин", "Делеголь" основным действующим веществом является глутаровый альдегид. В препаратах "Дезокс", "НУК-1", "Кристалл-700" и "Дивозан форте" - перекись водорода, уксусная и надуксусная кислоты.
Основой препаратов "Ветазоль", "Водозоль" и БМСС-Т служит биокислородный металло-силикогелевый состав. Бактерицидный эффект препарата "Виркон- С" обусловлен присутствием в его составе калия персульфата (50% состава).
Кроме того, изучали бактерицидные свойства следующих препаратов: 1-хлор-2-нафтол (в основе - продукты нефтеперерабатывающего производства); "Йоддимекс" (в основе - йодистый калий и йод); "Тетрамикс"; "Септодор"; "Дисмозон пур"; "Баррисидал"; композиции препарата "Баррисидал" с формалином и трихлоруксусной кислотой; "Хлорантоин"; "Биодор" и "Гембар".
Основные характеристики данных дезинфицирующих средств приведены ниже.
"Бациллол плюс" - дезинфицирующее средство производства фирмы "BODE Chemie GmbH & Co" (Германия), представляющее собой бесцветную жидкость с запахом спиртов. "Бациллол плюс" предназначен для дезинфекции поверхностей помещений (пол, стены) и оборудования из устойчивых к препарату материалов. Доля глутарового альдегида составляет 10% от числа активно действующих веществ, дополнение - спирты (1-пропанол; 2-пропанол). Бактерицидные свойства данного препарата изучали в отношении тест-культуры атипичных микобактерий вида Mycobacterium fortuitum (штамм 122).
"Корзолекс базик" - дезинфицирующее средство производства фирмы "BODE Chemie GmbH & Co" (Германия), представляющее собой прозрачную жидкость зелённого цвета. Препарат предназначен для дезинфекции с одновременной очисткой (мытьём) термолабильных и термостабильных оборудования и инструментов. Основное активно действующее вещество - глутаровый альдегид (до 12-15% состава). Тест-культура при проведении опытов - атипичные микобактерии вида Mycobacterium fortuitum (штамм 122).
"Корзолин iД" - дезинфицирующее средство производства фирмы "BODE Chemie GmbH & Co" (Германия). "Корзолин iД" представляет собой прозрачную жидкость жёлтого цвета, без запаха, хорошо растворимую в воде. Состав активно действующих веществ: глутаральдегид - 7%; 1,6-дигидрокси-2,5-диоксогексан - 8,2%; полиметилмочевина - 7,6%. Дополнительно в состав входят тензиды, ингибитор коррозии и вода до 100%. Тест-культурой при проведении опытов были атипичные микобактерии вида Mycobacterium fortuitum (штамм 122).
"Делеголь" - дезинфицирующее средство