ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений.......................................................4
Введение................................................................5
Глава 1. Обзор литературы.............................................10
1. Метотрексат: строение, фармакокинетика и фармакодинамика...........10
2. Значение высокодозной терапии метотрексатом........................16
3. Терапевтический лекарственный мониторинг метотрексата и методы, используемые для его проведения в плазме крови.........................18
4. Химико-фармацевтический анализ метотрексата; обзор фармакопейных статей.................................................................26
5. Токсичность метотрексата и способы ее оценки........................32
Глава 2. Материалы и методы исследования...............................42
1. Препараты...........................................................42
2. Отбор проб..........................................................42
3. Определение концентрации метотрексата...............................43
4. Определение показателей СПОЛ методом спектрофотометрии..............48
5. Методика определения Ы-АНК в сыворотке крови по Свеннерхольму 50
6. Методика определения молекул средних масс в сыворотке крови.........53
7. Методика определения содержания а-токоферола и ретинола в плазме крови..................................................................53
8. Методика определения ВМК в суточной моче............................54
9. Методика определения активности каталазы в эритроцитах..............57
10. Метод электроэнцефалографии........................................58
11. Статистический анализ..............................................59
Глава 3. Результаты собственных исследований...........................60
1. Разработка метода количественного определения метотрексата и его основного метаболита 7-ОЫ-МГх в сыворотке крови больных................60
2. Разработка нового экспресс-метода количественного определения метотрексата в инъекционных лекарственных формах.......................66
2
3. Качественный и количественный сравнительный анализ 1Мх в инъекционных ЛФ, применяемых в онкологии, различных фирм производителей.........................................................68
4. Сравнительная оценка методов количественного определения метотрексата в сыворотке крови для проведения ТЛМ...................................72
5. Изучение взаимосвязи метаболизма метотрексата с токсическими проявлениями у детей, страдающих гемобластозами........................74
6. Изучение динамики изменения биохимических показателей у детей, страдающих гемобластозами и получающих химиотерапию....................76
7. Изучение взаимосвязи биохимических показателей с ЭЭГ исследованиями
и данными мониторинга метотрексата.....................................84
Заключение.............................................................92
Выводы.................................................................94
Практические рекомендации..............................................95
Список литературы......................................................96
3
Глава 1. Обзор литературы.
1. Метотрексат: строение, фармакодинамика и фармакокинетика.
Лекарственное средство Міх известно с 1948 года. На сегодняшний день он широко используется, как противоопухолевое и проти воревматоидное средство.
1.1. Химическое строение и свойства.
Химическое строение.
В состав Міх входит птеридиновое ядро, парааминобензойная и глутаминовая кислоты. Птеридиновое ядро представляет собой бициклическую птере-диновую систему пиримидинового и пиразинового колец. Введение в состав ядра гидроксильных или аминогрупп резко понижает растворимость из-за наличия внутри и межмолекулярных водородных связей, возникающих между атомами водорода, функциональных групп и гетероатомами азота [4, 31]. Молекулярная формула СгоЬЬг^Оз.
Опиюсительная молекулярная масса 454,45 Структурная формула
О чс-ОН
( + ) -N-[n-[[(2, 4-диамино-6-птеридипил) мстил] метиламино] бензоил]-Ь-глютамовая кислота;
N-[4-[(2, 4-диамино-6-лтеридииил) метил] метиламино] бензоил] - L -глютамовая кислота; per. № CAS 59-05-2.
Кислотно-основные свойства
Mtx является амфолитом, в его структуре 7 основных и 3 кислотных центра. Основные свойства обусловлены входящим в состав 2,4 аминоптеридином, кислотные - остатками глутаминовой и парааминобензойной кислот.
10
Кислотные свойства преобладают в большей степени, поэтому М1х способен образовывать моно-, ди - и тризамещенные растворимые соли с щелочами, карбонатами, гидрокарбонатами и аммиаком, а также нерастворимые комплексные соединения с солями тяжелых металлов [4, 31].
Физические свойства.
Описание: желтый или оранжевый кристаллический порошок (окраска обусловлена входящим в состав птсридиновым ядром), без запаха.
Растворимость: практически нерастворим в воде, растворим в этаноле (~750 г/л), дихлорэтане и эфире, очень легко растворим в разведенных растворах щелочных гидроксидов и карбонатов [4].
1. 2. Фармакодинамика.
МХх является антиметаболитом фолиевой кислоты. Механизм его действия заключается в конкурентном ингибировании дигидрофолатредуктазы - фермента, регенерирующего тетрагидрофолат из дигидрофолата. Ингибирование образования тетрагидрофолата ограничивает образование однокарбоновых остатков, необходимых для синтеза пуринов и превращения дезоксиуридилата в тимидилат при синтезе ДНК, что в конечном итоге вызывает подавление процессов репарации и репродукции клеток (рис. 1).
Рис. № 1. Механизм действия метотрексата.
На рис. № 1 показаны точки действия метотрексата (МТХ) и полиглутамата метотрексата (MTX[glu]n). МТХ проникает в клетки с помощью пассивного транспорта (1) или с помощью бслков-переносчиков (2); после проникновения в клетку МТХ иод действием фермента фолилполиглутаматсинтетазы превращается в метотрексат полиглутамат (MTX[glu]n) (3); MTX[glu]n является очень сильным ингибитором дигидрофолатредуктазы (DHFR)(4) в результате чего нарушается регенерация тетрагидрофолата (FH4) из дигидрофолата (FH2); MTXfglu]n гидролизуется в метотрексат в лизосомах ферментом у-глутамилгидролазой (GGH) в метотрексат (5). CH2FH4-N-5, N-10-метилснтстрагидрофолат, dUMP - дезоксиуридилат, dTMP = дезокситимидинмонофосфат.
11
- Київ+380960830922