ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.....................................................5
Глава I. Обзор литературы....................................11
1.1. Биологическая роль магния в организме.............11
1.2. Методы определения магния и их использование в фармацевтическом и биофармацевтическом анализе 16
1.3. Использование высокоэффективной жидкостной хроматографии
при определении ионов магния.................................22
Заключение...................................................28
Экспериментальная часть......................................29
Глава II. Разработка способа определения магния в лекарственных формах и биологических жидкостях с использованием фотоэлектроколориметрии ............................................................ 29
2.1. Влияние значений pH раствора на образование устойчивых окрашенных комплексов с ионами магния...............................31
2.2. Исследование оптимальных условий лабораторного определения ионов магния...................................................33
2.2.1. Изучение влияния pH на образование и время стабильности комплекса ксилидилового синего с магнием 33
2.2.2. Определение активности ионов магния в растворе при образовании внутрикомилексных соединений.................................38
2.2.3. Изучение оптимального времени комплексообразования и количественное определение ионов магния с ксилидиловым синим..........................................................40
2.3. Количественное определение магния в лекарственных формах фотометрическим методом .........................................45
2.4. Количественное определение ионов магния в модельных смесях биологических жидкостей.........................................49
Выводы.......................................................51
Глава III. Определение ионов магния методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенными фазами...........................52
3.1. Разработка методик определения ионов магния в условиях обращенно - фазовой ВЭЖХ...............................................56
3.1.1. Изучение закономерностей хроматографического поведения магнийсодержащих комплексов.....................................56
3.1.2. Влияние содержания органического модификатора подвижной фазы на хроматографическое поведение магниевых хелатов.........67
3.1.3. Построение математической модели удерживания магнийсодержащих комплексов методом многофакторного анализа.............79
3.1.4. Особенности хроматографического поведения магниевых комплексов в условиях импрегнирования подвижной фазы..................82
3.2. Разработка методик качественного и количественного определения магния методом ВЭЖХ............................................86
3.2.1. Качественное определение магния методом ВЭЖХ в различных объектах.......................................................86
3.2.2. Количественное определение магния методом ВЭЖХ...88
3.3. Количественное определение магния в лекарственных формах методом ВЭЖХ.......................................................90
3.4. Определение магния в биологических жидкостях........91
3.4.1. Пробоподготовка и количественное определение ионизированного магния в биологических жидкостях методом ВЭЖХ.......................................................... 92
3.4.2. Количественное определение ионов магния в модельных смесях биожидкостей методом ВЭЖХ......................................95
В противоположность ионам кальция ионы магния ингибируют миозин-АТФазу и активируют гидролиз ацетилхолина через холинэстеразу. Возбудимость нервных окончаний при этом тормозится, мышцы расслабляются [88, 92].
Повышение концентрации магния в плазме крови вызывает седативный, а в некоторых случаях наркотический эффект, а также угнетение дыхательного центра. Седативное и противосудорожное действие ионов магния используется при лечении судорожных заболеваний (эклампсия, конвульсии, невриты) [2, 139].
Всасывание магния в кровь усиливается под действием белков, витаминов (Д, Вь В2), кальция, антибиотиков, гормона роста, молока и казеина. Всасывание ацетата магния из кишечника выше, чем других соединений. Всасывание магния усиливается в присутствии соляной кислоты в желудке [6, 97].
Общее содержание магния в организме человека составляет примерно 24г, что соответствует около 1000 ммоль [60, 74]. Несмотря на это, в клетках содержится около 39% общего содержания магния. 65% находится в скелете, из них примерно 20-30% могут быть мобилизованы, т. е. организм может получить их в свое распоряжение. В межклеточном экстрацеллюлярном пространстве находится лишь около 1% магниевого депо, а в сыворотке крови лишь часть этого процента [94, 129]. Около 60% сывороточного магния ионизированы, причем ионы магния - эффективная, необходимая для восприятия клетками форма [68, 146]. Основная часть распределяется на фракции, связанные с протеинами (примерно 30%), либо преимущественно с фосфатами или цитратами.
Его клиническое воздействие можно разделить по 4 большим областям:
1. Сердечно-сосудистая: стенокардия, тахикардия, экстрасистолия, все виды аритмий, повышенная склонность к тромбозу, головная боль, часто мигренеподобный скачок давления;
2. Церебральная: давящая боль в голове, головокружение, страх, депрессии, недостаточная способность концентрации памяти, спутанность сознания, галлюцинации вплоть до паранойи;
14
3. Висцеральные: диффузные абдоминальные боли, желудочно-кишечные спазмы, тошнота, рвота, диарея, запоры, спазм сфинктера почечноподжелудочной ампулы, гортани, пилороспазм, спазм матки, бронхов, эклампсия;
4. Мышечно-тетанические: мышечные судороги в области сердца, затылка, спины, лица, глухота, парестезия конечностей, судороги икроножных мышц, подошв, стопы, тетания ("рука акушера") [73, 126].
Магний участвует в очень многих ферментных реакциях (около 300), при этом он активирует реакции через прямое связывание на субстрате (например, АТФ, цитрат). При этом снижается отрицательный заряд субстрата (например, АТФ+), что позволяет начаться реакции [70, 136]. Все эти ферментативные превращения зависят от концентрации магния. От магния зависит также образование активной формы нуклеиновых кислот. Связывание магния с различными мембранами (например, клеточными мембранами, митохондриями) способствует их стабилизации и регулированию проницаемости для ионов [7].
В мышечных клетках магний работает подобно синтетическим антагонистам кальция. Он сдерживает введение кальция. Благодаря конкуренции на кальциевых канальцах мембран, вытесняет внутриклеточный кальций с мест связывания на тропопине С. Это важно, так как в экспериментальных исследованиях особенно большое содержание кальция находят в клетках сердечной мышцы, что при дополнительной стрессовой нагрузке приводит к неэкономному расходу энергии и к гибели клеток (некроз) [17, 131].
Сегодня кардиозащитное действие магния доказано многочисленными экспериментальными и клиническими работами. Во-первых, это действие основано на том, что магний представляет собой эффективный релаксант для большинства типов кровеносных сосудов, в том числе коронарных артерий. Во-вторых, решающую роль играет также его прямое воздействие на сердечные тахиаритмии [50,95].
- Київ+380960830922