1
2
Оглавление
ВВЕДЕНИЕ............................................................5
ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...........................................10
1.1. История создания и общая характеристика фторхинолоиов.......10
1.2 Физико-химические свойства фторхинолоиов.....................12
1.3 Использование химических и физических методов для идентификации и определения степени чистоты фторхинолоиов........................14
1.4 Использование физико-химических методов для колнчсственого определения фторхинолоиов в лекарственых формах....................16
1.4.1 Применение хроматографических методов при оценке степени чистоты фторхинолоиов.........................................20
1.5 Использование ВЭЖХ для количественного определения ФХ в биологических жидкостях............................................22
1.6 Лекарственные формы, антибактериальная активность и применение
фторхинолоиов в медицинской практике...............................27
ГЛАВА 2 РАЗРАБОТКА МЕТОДИК ИДЕНТИФИКАЦИИ, КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ И ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ЧИСТОТЫ ЦИПРОФЛОКСАЦИНА ГИДРОХЛОРИДА В СУБСТАНЦИИ И В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ................................33
2.1 Изучение возможности использования фотометрических и хроматографических методов для идентификации цнпрофлоксацнна гидрохлорида в лекарственных формах................................33
2.1.1 Спектрофотометрический анализ цнпрофлоксацнна
гилрохлорида.....................................................33
2.1.2 Изучение возможности использования ТСХ для
идентификации ципрофлоксацина гидрохлорида.......................37
2.1.3 Выбор условий ВЭЖХ для качественного анализа
ципрофлоксацина гидрохлорида.....................................39
2.1.4 Разработка методики определения посторонних примесей хроматографическими методами..................................50
3
2.2 Разработка методик количественного определения ципрофлоксацина гидрохлорида в лекарственных формах.................................52
2.2.1 Использование УФ - спектрофотометрии для количественного определения ципрофлоксацина в лекарственных формах............52
2.2.2 Вапидационная оценка методик количественного определения ципрофлоксацина гидрохлорида..................................54
2.2.3 Сравнительная оценка методик количественного определения
ципрофлоксацина гидрохлорида.....................................63
Выводы по главе II...............................................65
ГЛАВА III ОБОСНОВАНИЕ СОСТАВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ЦИПРОФЛОКСАЦИНА ГИДРОХЛОРИДА ДЛЯ ИНФУЗИЙ............................................66
3.1 Получение раствора ципрофлоксацина гидрохлорида для инфузий 66
3.1.1 Обоснование способа стерилизации инфузионного раствора..66
3.1.2 Выбор оптимального состава раствора ципрофлоксацина гидрохлорида для инфузий......................................69
3.1.3 Определение времени растворения компонентов инфузионного раствора......................................................72
3.1.4 Определение теоретической осмолярности раствора ципрофлоксацина гидрохлорида..................................73
3.2 Стандартизация инфузионного раствора ципрофлоксацина гидрохлорида........................................................78
3.2.1 Описание..............................................79
3.2.2 Подлинность...........................................79
3.2.3 Прозрачность раствора и цветность.....................80
3.2.4 Потенциометрическое определение раствора (pH).........86
3.2.5 Механические включения и тяжёлые металлы..............86
3.2.6 Номинальный объем.....................................90
3.2.7 Бактериальные эндотоксины и пирогенность..............90
3.2.8 Токсичность...........................................93
16
Идентификацию в таблетках норфлоксацина проводят по реакцииям с 2,3-дихлор-5,6-дициано-п-бензохинолом, п-хлораннлом, тетрацианохиноди-метаном, хлораниловой кислотой и последующим фотометрическим определением [32].
Идентификацию ципрофлоксацина проводят методом ВЭЖХ, с УФ -детектированием при 278 нм, по времени удерживания основного пика, соответствующего времени удерживания стандартного раствора ципрофлоксацина. В качестве подвижной фазы используют систему растворителей, содержащую 0,025 М раствор кислоты ортофосфорной и ацетонитрила в соотношении 87:13 [НД-42-1 1163-00]. Скорость потока элюента составляет 1,5 мл в минуту, скорость движения ленты самописца - 0,5 см/мин. Время удерживания препарата должно находиться в интеравле 6,4 - 10,8 минут.
Для определения подлинности норфлоксацина и ципрофлоксацина используют метод тонкослойной хроматографии в системе растворителей хлороформ - метанол - конц. раствор аммиака - ацетонитрил (4:4:2:1). Детектирование хроматограмм проводят в УФ свете при длине волны 254 нм и 366 нм. Пятно на хроматограмме исследуемого образца по окраске и величине IIГ должно соответствовать пятну образца свидетеля. [25].
Данные литературы свидетельствуют о том, что для идентификации фторхинолонов наиболее приемлема УФ - спектрофотометрия (ввиду наличия в стуктуре системы сопряжённых связей и ауксохромных групп). Для установления подлинности веществ нередко используют хроматографические методы анализа (ТСХ и ВЭЖХ), позволяющие с достаточной достоверностью идентифицировать препарат в лекарственных формах.
1.4 Использование физико-химических методов для количествсного определении фторхинолонов в лекарственых формах
Для количественного определения фторхинолонов используются различные физико - химические методы анализа: оптические (спектрофотометрия, флуориметрия) и хроматографические.
17
При определении количественного содержания ципрофлоксацина гидрохлорида в препарате "Ципробид инфузия 100 мл", (содержание действующего вещества 0,2%) фирмы Кадила (Индия) по НД 42 -2914 - 94 применяют метод непосредственной спектрофотометрии. Определение ведут при длине волны 277 нм. Расчёт проводят по стандартному образцу ципрофлоксацина.
Способность пефлоксацина к флуоресценции под действием ультрафиолетового света с длиной волны 282 нм позволило разработать методику флуориметрического анализа. Определение ведут при длине волны испускания 440 нм. Линейная зависимость наблюдается в интервале концентраций 2 - 10 мкг/мл. Аналогичный подход используется для количественного определения ципрофлоксацина в субстанции и таблетках, причём установлено, что чувствительность флуориметрического метода в 10 раз выше спектрофотометрического. Флуориметрический метод применяют также для определения константы ионизации ципрофлоксацина в растворе. [33, 34].
Для количественного определения офлоксацина в капсулах предложен флуоресцентный метод, поскольку препарат в ацетатном буферном растворе обладает сильной флуоресценцией. При этом длина волны возбуждения составляет 427 нм, а длина волны испускания - 500 нм. Линейная зависимость наблюдается в интервале концентраций 10 - 900 мкг/мл и отличается высокой чувствительностью [35].
В работах [27 - 29] приводится методики количественного определения ципрофлоксацина и норфлоксацина, основанные на образовании окрашенных комплексов с нитратом железа (III). Продукты реакции поглощают при 430 - 450 нм. Подчиняемость закону Бугера - Ламберта - Бера наблюдается в интервале концентраций 20 - 100 мкг/мл.
Поскольку вещества фторхинолонового ряда способны образовывать комплексы с солями тяжелых металлов и органическими веществами, то для их количественного определения разработаны методики экстракционной фотометрии [36, 37].
- Київ+380960830922