2
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 6
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
1.1. Общая характеристика заболевания и возбудителей оспы овец и оспы коз 10
1.1.1. Таксономическая принадлежность вирусов оспы овец и оспы коз 10
1.1.2. Антигенное родство вирусов оспы овец и оспы коз 12
1.1.3. Устойчивость вирусов оспы овец и оспы коз, их свойства и способы передачи 14
1.1.4. Клинические признаки заболевания и патоморфогенез при оспе овец и оспе коз 15
1.2. Эпизоотическая ситуация по оспе овец и коз в мире, странах СНГ и Российской Федерации 20
1.3. Культивирование вирусов оспы овец и оспы коз 22
1.4. Борьба с оспой мелкого рогатого скота, иммунитет и средства специфической профилактики заболевания 28
1.4.1. Историческая справка о борьбе с оспой овец и оспой коз 28
1.4.2. Иммунитет при оспе овец и оспе коз и методы его
изучения 31
1.4.3. Вакцины против оспы овец 33
1.4.4. Вакцины против оспы коз 39
1.4.5. Ассоциированные вакцины против оспы и других инфекций мелкого рогатого скота 42
1.5. Заключение по обзору литературы 45
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 47
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 47
2.1.1. Материалы для исследований 47
2.1.1.1. Вирусы 47
2.1.1.2. Культуры клеток 47
3
2.1.1.3. Питательные среды, сыворотки, растворы 48
2.1.1.4. Реактивы 48
2.1.1.5. Оборудование 49
2.1.1.6. Животные 49
2.1.2. Методы исследований 49
2.1.2.1. Приготовление тканевой суспензии 49
2.1.2.2. Определение инфекционной активности вируса оспы коз 50
2.1.2.3. Изучение эвтектических свойств защитных сред 50
2.1.2.4. Составление и лиофилизация экспериментальных образцов вирусвакцин 51
2.1.2.5. Определение стерильности, безвредности, биологической, антигенной и иммуногенной активности вирусвакцин 52
2.1.2.6. Статистическая обработка результатов исследований 54
З.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 55
3.1. Изучение эпизоотической ситуации по оспе овец и коз в Российской Федерации в 1993-2006гг. 55
3.1.1. Эпизоотическая ситуация по оспе мелкого рогатого скота
и вакцинация овец и коз против оспы в России в 1993-2006 гг. 55
3.1.2. Анализ вспышки оспы овец и коз в Еврейской автономной области и Приморском крае в 2002 году 57
3.2. Исследование биологических свойств вирулентного штамма «Приморский 2003» вируса оспы коз 62
3.2.1. Выделение вируса и определение титра инфекционной активности 62
3.2.2. Изучение клинических признаков заболевания и оценка патогенных свойств вируса на восприимчивых животных 64
3.2.3. Адаптация вируса к первичным и перевиваемым культурам клеток и изучение культуральных свойств 67
3.3. Изучение культуральных свойств аттенуированного
12
1.1,2. Антигенное родство вирусов оспы овец и оспы коз
Все известные штаммы возбудителей оспы овец и коз имеют высокую степень антигенного и иммунологического родства [19,24,49,57,139,190,191]. В определенной мере эти свойства могут объяснять как проявление патогенности для гетеровидовых животных, когда оспа коз способна передаваться овцам и от овец козам, так и перекрестную защиту за счет одинакового сайта нейтрализации [197]. По данным Л.Б. Кутумбетова и соавт., вирулентный штамм «Афганский» ВОО обладал патогенностью по отношению к овцам и не вызывал заболевания у коз. В свою очередь вирулентный штамм «Ре11ог-4» ВОК был патогенен для обоих видов животных, хотя у овец он вызывал заболевание в легкой форме [75,85]. При исследовании штамма «Дангаринский» ВОК, изолированного в Таджикистане в 2002 году, была установлена его патогененность для овец и коз. Инфицированные козы погибали от оспы с развитием полного симптомокомплекса болезни, тогда как овцы переболевали в легкой форме без проявления характерных клинических признаков, что свидетельствовало о возможной циркуляции ВОК на неиммунных овцах, способных быть источником возбудителя болезни в межэпизоотический период [20,46,71].
Близкое антигенное родство каприпоксвирусов и перекрестная защита были доказаны в ряде исследований [61,85,131,184,186,197,227]. По данным R.P. Kitching и соавт. было установлено антигенное родство между Индийским и Суданским, а также Пакистанским и Индийским штаммами ВОО. Тяжесть заболевания зависела от вирулентности возбудителя. Было также установлено, что овцы, привитые иммунной сывороткой, полученной против Оманского ВОО или против Йеменского ВОК, были устойчивы к заражению Йеменским ВОК или Нигерийским ВОО соответственно. При этом Нигерийский штамм вируса был особенно вирулентным для овец породы Soay, вызывая их 100% гибель, а Йеменский изолят был одинаково летальным для овец и коз. У овец,
13
выздоровевших после заражения Суданским штаммом ВОО, развивалась слабая реакция на введение Нигерийского штамма [184].
Египетский эпизоотический штамм отличался меньшей патогенностью для овец, генерализацию процесса и гибель животных наблюдали редко. При экспериментальном заражении овец эпизоотическими штаммами «Афганский», «Монгольский», «Индийский» и «Казахстанский» было установлено, что они характеризуются примерно одинаковой патогенностью для овец. Ставропольский штамм ВОО является наименее патогенным из всех изученных эпизоотических штаммов. [10,19,32,58].
Изучение степени антигенного родства на примере вакцинных штаммов ВОО и ВОК, установленное посредством перекрестной PH Л.Б. Кутумбетовым с соавт., оценивается в 51,5%, при этом отмечено, что значение не превышающее 48,5% статистически не достоверно [85]. Степень антигенного родства, рассчитанная по формуле Архетти для штамма «НИСХИ» ВОО и штамма «Монгольский» ВОК составила 89,4% [61]. Иммунологическое и антигенное родство штамма «Дангаринский» ВОК было установлено с ВОО (шт. «Монгольский», «Афганский», «НИСХИ») в PH и по результатам перекрестного заражения вакцинированных и переболевших животных [20,46,71].
Антигенное и иммунологическое родство отмечается между ВОО и контагиозного пустулезного дерматита (контагиозной эктимы) овец. В условиях сокультивирования ВОО штамма «НИСХИ» и штамма «Английский» вируса контагиозной эктимы овец не отмечено явлений интерференции между этими вирусами. Иммунологическое родство между ВОК и вирусом контагиозной эктимы коз имеет односторонний характер, т.е. ВОК иммунизирует коз против контагиозной эктимы. Антисыворотки против ВОК нейтрализуют и сам вирус пустулезного дерматита [50,240].
- Київ+380960830922