РАЗДЕЛ 2
ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исходя из поставленных задач, были определены основные объекты, методы исследования и материалы исследования.
Объекты исследования: дети с хроническим катаральным гингивитом и кариесом зубов, экспериментальные животные.
Материалы исследования: добезилат кальция, ткани пародонта, ротовая жидкость, эмаль зубов, клетки буккального эпителия детей; ротовая жидкость, кровь, биоптаты десны, блоки челюстей, пульпа резцов крыс.
Методы исследования: экспериментальные, клинические, лабораторные: биохимические, биофизические, оптические.
Объемы исследования: в клинико-лабораторных исследованиях принимало участие 123 школьника 121 гимназии г.Одессы. В ходе экспериментальных исследований было использовано 166 крыс.
2.1. Методика применения добезилата кальция в комплексном лечении хронического катарального гингивита у детей
Гигиенические мероприятия во всех исследуемых группах начинались с обучения и контролируемой чистки зубов, затем проводилась обязательная санация полости рта. После антисептической обработки 3% раствором перекиси водорода проводилось удаление зубных отложений. С помощью специальных щеток, фиксированных в угловой наконечник, удалялся зубной налет. Для окончательного очищения и полировки использовалась паста "CleanPolish". Ирригацию межзубных промежутков и зубодесневых бороздок осуществляли 0,05% раствором хлоргексидина биглюконата, обладающего антисептическим действием. Затем в группах наблюдения проводились аппликации 1% водным раствором добезилата кальция в течение 10-12 минут по десневому краю. Общее количество процедур - 10 - 15 на курс. По достижении положительного результата лечения гингивита для профилактики кариеса зубов назначали полоскания полости рта в домашних условиях после приема пищи и чистки зубов, задерживая раствор во рту по 40 - 60 секунд. Продолжительность курса - 1 месяц. Профилактический курс применения добезилата кальция в виде аппликаций и полосканий проводились с периодичностью раз в год.
В группах сравнения лечебно-профилактические мероприятия состояли из аналогичной базовой терапии хронического катарального гингивита, обучения правильной гигиене полости рта, применения профилактических зубных паст с экстрактами лечебных трав.
2.2. Характеристика объектов экспериментального и клинического исследований
В связи с тем, что одним из основных патологических процессов в развити заболеваний пародонта является воспаление, характеризуемое изменением активности ряда ферментов ротовой жидкости, основным направлением наших экспериментальных исследований являлось детальное изучение ротовой жидкости животных при пародонтите и под воздействием добезилата кальция.
Для выяснения эффективности применения добезилата кальция как кариеспрофилактического и пародонтопротекторного препарата было проведено два экперимента, в которых использовалось моделирование кариесогенной ситуации в первом случае, и пародонтита - во втором опыте.
Для экспериментальных исследований использовались белые крысы с учетом однотипных условий содержания для всех групп животных, однако, в зависимости от цели опыта с различным рационом питания, который предусматривал развитие кариеса в первом эксперименте и пародонтита - во втором.
При проведении экспериментальных исследований использовано 166 животных 1 - 3-месячного возраста. Характеристика экспериментальных животных приведена в табл. 2.1.
Таблица 2.1
Характеристика групп животных, использованных при проведении экспериментальных исследований
Серии эксперимен-тальных исследованийКол-во животныхРаспреде-ление по полуВозраст введения в экспери-ментРационСр. мас-са тела в начале экспер-ментаДлите-льность
экспери-мента
Изучение кариес- профилактического эффекта добезилата кальция
80
40 самцов
40 самкок
1 мес.?
3 дняКариесогенный
(диета
Стефана
65,5 ? 7,2г
40 дней
Изучение пародонто-протекторного действия
Добезилата кальция8643 самца
43 самки2 мес. ?
2 дняДиета, модели паро- донтита Евдоки-мова172,8 ? 3,2г2 месяца
Перед введением в эксперимент животных взвешивали, проводили тщательный внешний осмотр и оценивали поведенческие реакции каждого животного. Формирование групп проводилось с учетом одинакового представительства в каждой группе разнополых особей и отклонения от средней массы животных не более 10% .
По окончании эксперимента под тиопенталовым наркозом животных умерщвляли путем тотального кровопускания.
Кариеспрофилактическую эффективность раствора добезилата кальция изучали путем оценки его воздействия на экспериментальный кариес у животных, содержащихся на кариесогенном рационе Стефана [247]. В эксперименте изучалась активность ферментов ротовой жидкости, десен и пульпы зубов животных, распространенность и интенсивность кариеса у животных.
Пародонтопротекторное действие добезилата кальция было изучено на модели пародонтита по Евдокимову [151]. По окончании эксперимента были проанализированы результаты биохимических исследований ротовой жидкости, крови, десен животных, степень атрофии альвеолярного отростка.
В клинических исследованиях приняли участие 123 школьника 10-12, 13-15 лет, страдающих хроническим катаральным гингивитом и кариесом зубов. Все дети до начала исследований были санированы и обучены гигиене полости рта.
Оценка клинико-лабораторных показателей проводилась до исследований и в динамике исследований. Интенсивность кариозного процесса у детей оценивали по приросту кариеса за 1 и 2 года.
Были изучены показатели активности ферментов ротовой жидкости - щелочной и кислой фосфатаз, эластазы, общей протеолитической активности; спектроколориметрические показатели эмали зубов и тканей десны; изменение электрофоретической подвижности клеток буккального эпителия.
2.3. Методы исследования
2.3.1. Экспериментальные методы исследования.
В эксперимен