ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ПОСТАНОВКА ОПЫТОВ
Согласно цели и задачам исследования для выявления антистрессовых свойств
производных ксантина было изучено в эксперименте их влияние на различные звенья
процесса саморегуляции: центральную нервную,
гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую, вегето-медиаторную, метаболическую и
сердечно-сосудистую системы, включая и внутриклеточное звено, в условиях
острого эмоционального стресса (ЭС).
Для моделирования ЭС была использована реалистическая модель нейрогенного
стресса "Конфликт афферентных раздражений", предложенная проф. Ф.П. Ведяевым
[40]. Согласно этой методике, каждая опытная группа крыс помещалась в
специально смонтированную камеру, где животные подвергались последовательному
нерегулярному раздражению светом (электрическая лампочка 300 Вт, 5-20 с),
звуком (электрический звонок 60 Дб, 5-15 с) и электрическим током
(прямоугольные импульсы, 60В, 50 Гц, 5-15 мс). Раздражители включались
автоматически по заданной программе в случайной последовательности в течение 4х
и 2х часов 2 дня подряд.
Из числа ксантинов исследовали: триметилксантин кофеин, диметилксантин на
основе теофиллина эуфиллин и диметилксантин на основе теобромина
пентоксифиллин, обладающие разным характером фармакологического действия (табл.
2.1).
Препаратом сравнения служил известный стресспротектор пирацетам, являющийся
циклическим производным ГАМК из группы ноотропов и оказывающий благоприятное
стимулирующее действие на познавательные процессы, обучение, память, внимание,
а также умственную работоспособность без развития седативного и
психостимулирующего эффекта [166]. Пирацетам влияет на ЦНС, изменяя скорость
распространения возбуждения в мозге, улучшая нейрональную пластичность и
нейрометаболизм путем воздействия на глутаматные рецепторы и кровоснабжение
мозга. Важным свойством пирацетама
Таблица 2.1
Фармакологическая характеристика исследованных лекарственных средств
Характеристика
Производные ксантина
Препарат сравнения пирацетам
Кофеин
Эуфиллин
Пентоксифиллин
Особенности химического строения
Триметилксантин
Диметилксантин (80% теофиллина с этилендиамином)
Диметилксантин
(5-оксогексил) -теобромин
Пиролидинацетамид
Классификаци-онная группа, характер фармакологи-ческого действия
Стимулятор ЦНС
Спазмолитик широкого действия
Спазмолитик, улучшающий мозговой кровоток
Ноотроп
Известные эффекты действия
Психостимулирующий, аналептический, сосудосуживающий, стимулирующий дыхание,
кардиотонический, диуретический
Бронхолитический, антиангинальный, диуретический, антигипертензивный
Сосудорасширяющий, антиагрегантный, антигипертензивный, антигипоксический
Церебропротекторный, антигипоксический, антиоксидантный
Продолжение таблицы 2.1
Механизм действия
Центральный синаптический, медиаторно-метаболический, стимулятор пуриновых
рецепторов
Миотропный, ингибиторы фосфодиэстеразы
Центральный медиаторный (ГАМК-ергический, моноаминергический,
нейроаминокислотный), метаболический, биоэнергетический
Вводимые дозы
100 мг/кг
100 мг/кг
100 мг/кг
150 мг/кг
Исходная лекарственная форма
20% ампульный раствор
2,4% ампульный раствор
2% ампульный раствор
20% ампульный раствор
Рабочая лекарственная форма
2% раствор
2,4% раствор
2% раствор
2% раствор
Путь введения
Внутрижелудочно
Внутрижелудочно
Внутрижелудочно
Внутрижелудочно
Производитель препарата
Украина, ОЗ ГНЦЛС,
г. Харьков
Украина, фарм. фирма "Дарница", г. Киев
Украина, ООО "Фарм. компания "Здоровье", г. Харьков
Украина, АО "Галичфарм", г. Львов
является его антигипоксический эффект, повышающий устойчивость тканей мозга к
недостатку кислорода. При травматических повреждениях повреждениях головного
мозга и интоксикациях, а также после проведения электрошоковой терапии,
пирацетам оказывает защитное действие и восстанавливает неврологические
дефициты. При недостатке кровоснабжения или острой церебральной ишемии у
больных с деменцией препарат увеличивает регионарное потребление кислорода и
глюкозы [243, 244]. Основные биохимические и внутриклеточные эффекты пирацетама
в мозге, ингибирование ПОЛ, стабилизация мембран и усиление антиоксидантной
защиты клеток [45, 115, 155, 234, 235, 239, 264], проявляющейся не только в
головном мозге, но и в других органах, способствуя сохранению их структуры и
функции [106], а также участие в реализации его эффектов кортикостероидов [45,
249] послужили основанием к выбору пирацетама в качестве препарата сравнения
как стресспротектора метаболического типа действия.
Все препараты были отечественного производства, вводились в дозах,
апробированных в других экспериментальных работах [20, 107] (табл. 2.2): кофеин
(100 мг/кг), эуфиллин (100 мг/кг), пентоксифиллин (100 мг/кг) и пирацетам (150
мг/кг). Препараты вводились внутрижелудочно через зонд двукратно в первый и
второй день моделирования ЭС за 2 часа до окончания каждого этапа
стрессирования.
Основная часть опытов проведена на белых половозрелых крысах-самцах линии
Вистар с массой тела 150,0-250,0 г. Всего в работе использовано 420 животных.
Содержание и использование в экспериментах животных соответствовало требованиям
"Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в
экспериментальных и научных целях" (Strasbourg, 18.03.1986г.) [72, 231]. Опыты
проводились в первой половине дня, что, по данным литературы, согласуется с
зависимостью основных фармакокинетических параметров и фармакологической
активности принятых к исследованию препаратов от циркадных ритмов [129, 130].
Таблица 2.2
Эффективные терапевтические дозы производных ксантина,
принятые для исследования сравнител
- Київ+380960830922