РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материал исследования
2.1.1. Характеристика экспериментального материала
Для изучения особенностей морфогенеза костно-хрящевого регенерата были проведены экспериментальные исследования на 50 половозрелых кроликах породы Шиншилла обоего пола, возрастом 4-6 месяцев, массой тела 3500,0-4000,0 г к началу эксперимента. Животные содержались в стандартных условиях вивария. За сутки до введения животных в эксперимент их взвешивали, мыли, высушивали и выбривали шерсть над поверхностью ГСС; с этого момента животные содержались изолированно по одному в клетке. В день проведения эксперимента проводили тщательный клинический осмотр животных, оценивали их поведение, двигательную активность, состояние кожных покровов и слизистых. Животных, у которых наблюдались отклонения от обычных норм поведения, в экспериментальное исследование не включали.
Исследуемые животные были разделены на три группы. В I - контрольной группе животных (14 наблюдений) изучали интактную костную и суставную ткань в области дистального эпиметафиза большеберцовой кости. Животным II (18 наблюдений) и III групп (18 наблюдений) моделировали ОПГСС, производили ПХО раны, остеосинтез перелома. Животным III группы дополнительно проводили облучение раны и области ГСС ежедневно на протяжении всего периода эксперимента.
Моделирование ОПГСС проводили без соблюдения правил асептики под гексеналовым наркозом (0,1 мл 10% раствора на 100 г массы). Кролика фиксировали к станку мягкими держалками в положении на животе, после подготовки операционного поля производили рассечение кожных покровов и подлежащих мягких тканей над областью сустава. При помощи крючков сухожилия длинного сгибателя пальцев (m. flexor digitalis pedis longus), собственного разгибателя большого пальца (m. extensor digiti pedis proprius) отводили кнутри; сухожилие длинного разгибателя пальцев (m. extensor digitalis pedis longus), поверхностного сгибателя пальцев (m. flexor digitalis pedis sublimes), передней большеберцовой мышцы (m. tibialis anterior), малоберцовых мышц (длинной, короткой, третьей, четвертой), скакательное (ахиллово) сухожилие кнаружи [4]. Производили артротомию.
Повреждение дистального эпиметафиза большеберцовой кости моделировали при помощи скальпеля максимально приближенное к типам повреждений 43В, 43С, 44А, 44В, 44С (по классификации АО/ASIF). Производили ПХО раны, репозицию и фиксацию фрагментов при помощи спиц Киршнера. Капсулу сустава, по-возможности, ушивали, производили послойное ушивание послеоперационной раны. Заднюю конечность фиксировали циркулярной гипсовой повязкой, в области послеоперационной раны вырезали "окно".
Животным III экспериментальной группы со следующего дня после оперативного вмешательства производили лазерное облучение области повреждения. Животных подвергали процедурам ежедневно в утренние часы суток, исключая воздействие других физиотерапевтических факторов. В качестве генераторов низкоинтенсивного лазерного облучения использовали аппараты АЛФ-01 и полупроводниковую фотонную матрицу "Барва-Флекс К/ИК", работавшие в непрерывном режиме. Плотность мощности и экспозиция составляла соответственно 20 и 5 мВт/см?, 5-10 и 15 мин. Длина волны в аппарате АЛФ-01 составляла 632,8 нм, в фотонной матрице "Барва-Флекс К/ИК" 650-660 нм для видимого красного диапазона и 940 нм для невидимого инфракрасного диапазона излучения. Область послеоперационной раны и места расположения крупных артериальных и венозных сосудов облучали расфокусированным лазерным пучком диаметром от 3 до 10 см в наиболее доступных топографоанатомических точках.
Наблюдение за экспериментальными животными проводили с первого дня после операции до конца эксперимента. Оценивали особенности поведения животных, клинический статус, нагрузку на оперированную конечность, наличие отека, вид заживления раны, характер раневого отделяемого. Животных выводили из эксперимента путем передозировки гексенала. Забор материала для микроскопических, морфометрических исследований проводили на 3, 7, 14, 30 сутки; для ультрамикроскопических исследований - на 14, 30 сутки эксперимента. Распределение животных по срокам выведения из эксперимента представлено в табл. 2.1.
Таблица 2.1
Распределение животных по срокам выведения из эксперимента
СуткиКоличество животных ГруппыIIIIII344474441444430455Всего141818
Уход за животными, экспериментальные исследования и забой животных проводили в соответствии с Международными требованиями о гуманном отношении к животным и стандартов по биоэтике (Хельсинская декларация (1964-2000 гг.), Европейская конвенция по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986 г.), I национальный конгресс по биоэтике (Киев, 2001 г.), соответственно действующего законодательства по биоэтике) [152].
Эксперимент проведен на базе вивария Харьковского государственного медицинского университета МОЗ Украины.
2.1.2. Клинический материал исследования
Материалом для клинической части настоящей работы послужили результаты лечения 60 больных с ОПГСС за период 2002-2005 гг., которые находились на лечении в травматологических отделениях Областной клинической больницы г. Харькова (19 больных) и Харьковской городской клинической больницы скорой и неотложной медицинской помощи им. проф. А.И. Мещанинова (41 больной), являющихся базовыми кафедры травматологии и ортопедии Харьковского государственного медицинского университета.
Объем представленной выборки, составляющий материал исследования, формировался из контингента больных, для которых данный этап являлся очередным звеном в оказании специализированной или высококвалифицированной медицинской помощи. Госпитализация пациентов осуществлялась по направлению центральных районных больниц - 2 (3,3%) больных, в порядке самообращения - 8 (13,4%) больных, доставлены машиной скорой помощи с места происшествия - 50 (83,3%) больных. Лица с сопутствующей онкологической патологией, с