РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
В основу настоящего исследования положено сравнительное клинико-морфологическое
и экспериментально-морфологическое исследование изменений в месте диссекции
желудка, а также течение и исход репаративных процессов в области операционной
раны желудка при использовании УЗС и МЭН.
Для осуществления поставленной цели была проведена серия экспериментов на 70
кроликах породы Шиншилла, включающая острые и хронические опыты. В клинической
части исследования было прооперировано 111 больных с хирургическими
заболеваниями желудка.
Выполнение операций на желудке в экспериментальных и клинических исследованиях
проводилось с помощью ультразвукового генератора “Harmonic Scalpel.
Ultracision” (рис 2.1.) и монополярного электроножа (МЭН) “Karl Storz
endoscope”.
Рис. 2.1. Ультразвуковой генератор “Harmonic Scalpel. Ultracision”.
Исходя из того, что увеличение уровня мощности генератора УЗС приводит к
повышению скорости пересечения тканей и уменьшению выраженности коагуляции, и
наоборот, то в нашей работе УЗС использовался в режиме первого уровня мощности,
поскольку именно эффект коагуляции обеспечивает хороший гемостаз и
биологическую сварку [27, 131, 232]. В данном режиме работы амплитуда движения
лезвия составила около 45 мкм. В качестве рабочей насадки использовались
ножницы, так как именно такая конфигурация инструмента повышает эффективность
резания и коагуляции, а так же позволяет дозировать указанные режимы
воздействия на биологические ткани.
Электрохирургический блок работал в монополярном режиме. Частота тока составила
650 кГц, выходная мощность - 90 Вт. В качестве рабочей насадки использовался
пластинчатый электрод и электрод в форме шарика.
С целью объективизации полученных результатов, в экспериментальной и
клинической работе нами использовались одинаковые параметры работы аппаратуры и
типы рабочих насадок.
2.1. Экспериментальное исследование
Для изучения морфологических изменений и динамики репаративных процессов,
происходящих в желудочной стенке после воздействия УЗС, была выполнена серия
экспериментов на животных. В эксперименте было 70 кроликов самцов породы
Шиншилла, массой 2,3 - 3,5 кг. Эксперименты проведены в соответствии с ”Общими
принципами экспериментов на животных”, одобренными I Национальным конгрессом по
биоэтике (20.09.04, Киев, Украина) и согласованными с положениями ”Европейской
конвенции о защите позвоночных животных, которые используются для экспериментов
и других научных целей” (Страсбург, 1985) [62].
Животные были распределены на две группы. В первой группе (n=35) гастротомию
выполняли с помощью МЭН (”Karl Storz-endoscope”), поскольку данная методика
наиболее часто используется в хирургии и является методом контроля [1,2]. Во
второй группе (n=35) рассечение желудка выполняли УЗС (”Harmonic Scalpel”).
Экспериментальная часть работы включала острые и хронические опыты на животных
(табл. 2.1).
Таблица 2.1
Количество животных в острых и хронических опытах (n=70)
Вид воздействия
Количество
животных в острых
опытах
Количество животных в хронических опытах
Ультразвуковое воздействие
7
28
Электровоздействие
7
28
Всего
14
56
В острых опытах изучалась эффективность рассечения желудка УЗС и МЭН.
При этом оценивались следующие показатели:
1) степень гемостаза;
2) качество и скорость разреза;
3) наличие феномена биологической сварки тканей;
4) степень выраженности некротических, некробиотических и
гемодинамических изменений в желудочной стенке.
В хронических опытах изучали размер зоны повреждений и динамику течения
репаративных процессов в области послеоперационной раны желудка, нанесенной УЗС
и МЭН.
В хронических опытах макроскопическую оценку производили по следующим
критериям:
1) наличие или отсутствие жидкости в брюшной полости;
2) наличие и обширность спаечного процесса;
3) степень воспалительных изменений, наличие гематом в зоне
операции;
4) степень герметичности швов.
Контроль течения репаративных процессов оценивали в динамике с помощью
микроскопии биоптатов на 3, 7, 14 и 30 сутки со дня операции (табл.2.2). Для
этого экспериментальных животных в указанные сроки выводили из эксперимента
путем дачи наркоза, после чего забирались фрагменты желудка из области
послеоперационных швов с последующим морфологическим и иммуноморфологическим
исследованием.
Таблица 2.2
Количество животных в хронических опытах в зависимости от сроков наблюдения
(n=56)
Вид воздействия
Сроки исследования (сутки)
3 сутки
7 сутки
14 сутки
30 сутки
Ультразвуковое воздействие Электровоздействие
7
Электровоздействие
7
Всего
14
14
14
14
Учитывая небольшой диаметр желудка, затрудняющий наложение швов была выбрана
стандартная экспериментальная модель операции – гастротомия с наложением
однорядного шва на рану. Подготовка желудочно-кишечного тракта заключалась в
прекращении кормления за 24 часа до операции. Воду прекращали давать за 5
часов. Такая подготовка обеспечивала полную эвакуацию пищевых масс из желудка.
В асептических условиях проводилась внутримышечная инъекция кетамина, в
расчетной дозе 8 мг/кг. Операционное поле выстригалось, кожа обрабатывалась
0,5% спиртовым раствором хлоргексидина. После выполнения срединной лапаротомии
длиной 5 см в рану выводилась передняя стенка желудка, которая прошивалась
нитями на расстоянии 3 см друг от друга. С помощью нитей проводилась тракция
органа во время рассечения. В первой группе животных желудок рассекался МЭН. Во
второй группе рассечение желудка выполнялось УЗС с наса