РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ І МЕТОДИКИ ДОСЛІДЖЕНЬ
Дослідження були проведені в 2003-2007 р.р. з використанням в якості об'єктів дослідження інкубаційних яєць та курчат курей різних порід і кросів за схемами, наведеними на рисунках 2.1 і 2.2, у птахогосподарствах Сумської області: ВАТ Птахорадгосп "Мирний" Сумського району, ФГ "Князівське" Білопільського району, "ТОВ "Колос" АгроТрейд Конотопського району", а також в Проблемній лабораторії кафедри терапії, фармакології і клінічної діагностики СНАУ, і у бактеріологічному відділі Обласної ветеринарної лабораторії м. Суми. Біохімічні дослідження проводили на кафедрі біохімії та біотехнології СНАУ та у лабораторії ЦМЛ м. Суми.
Етапи і характеристика експериментальних досліджень наведені в табл. 2.1. Всі досліди проводили у п'яти - восьми повторностях.
Для дослідження використовували інкубаційні яйця курей Домінант бурий Д-102; Хайсекс браун; Шейвер 579; Ломанн браун; Бєларусь-9; Леггорн білий; Російські білі; Російські білі помісні безпорідні (15-20 тижні яйцекладки). Для проведення досліджень відбирали тільки свіжознесені яйця (не пізніше 1 доби після знесення). Структурні характеристики шкаралупи досліджували скануючою електронною мікроскопією (растровий електронний мікроскоп мікроаналізатор "РЕММА-102", ВАТ "SELMI", Суми, Україна) [148]. Цифрові зображення біокристалічних шарів обробляли за допомогою пакетів програм Digimizer та Visilog 6.11 (Noesis). Електронно-мікроскопічні зображення переводили в цифрову форму на матрикс 320 на 320 пікселів (за збільшення х 250) з рівнем насиченості сірого кольору (gray level) 0-255. Цифрові зображення піддавали обробці в графічних редакторах з метою кількісної оцінки мікродефектів і мікрошпарин у біокерамічному шарі шкаралупи ( Додаток В) [250, 277].
Рис.2.1 Концептуальна схема досліджень
Рис.2.2 Загальна схема досліджень
Таблиця 2.1
Етапи та характеристика експериментальних досліджень
ГрупаСпособи і умови утворення "штучної кутикули" на поверхні яєцьХімічні складові "штучної кутикули"Кількість яєць1234Етап 1. Вивчення характеристик біокерамічного захисного шару яєць курей породи Леггорн білий; кросів Ломанн браун, Шейвер 579, Домінант бурий
Д-102, Хайсекс браун, Бєларусь-9Ломан браун (контроль)--144Шейвер 579--144Домінант бурий Д-102--144Хайсекс браун--144Бєларусь-9--144Леггорн білий--144Домінант бурий Д-102
(колібактеріоз)--72Етап 2. Вивчення впливу БАР і перекисних сполук на захисний шар шкаралупи яєць
2.1. Порівняння за ефективністю різних фізико-хімічних методів транспортування біологічно-активних речовин (БАР) всередину інкубаційних яєць Контроль Дифузія БАР за умов рівних температур зовні і всередині яйцяСумарний розчин БАР (АМР (0,1%) +Глу (0,1%)+Цис (0,1%) + Креатинфосфат динатрієва сіль (0,1%)144I досліднаДифузія БАР за умов підвищеної температури всередині яйцяСумарний розчин БАР -//-//-144II досліднаПолегшена дифузія (циклодекстрини (ЦД))Сумарний розчин БАР -//-//-144
Продовж. табл. 2.1
1234III досліднаПолегшена дифузія;
L-ментол, ментон, карвон, D-лимоненСумарний розчин БАР -//-//-144IV досліднаПолегшена дифузія;
Диметилсульфоксид (ДМСО)Сумарний розчин БАР -//-//-144V досліднаСистема керованого постачання; сполуки четвертинного амонію (ЧАС) Сумарний розчин БАР -//-//-144VI досліднаПолегшене транспортування;
гідравлічний ударСумарний розчин БАР -//-//-144VII досліднаСистема керованого постачання; електророзпиленняСумарний розчин БАР -//-//-144VIII досліднаПолегшене трансшкаралупне перенесення за участю фізичних чинників;
електрофорезСумарний розчин БАР -//-//- 144IX досліднаПолегшене трансшкаралупне перенесення за участю фізичних чинників;
фонофорез (сонофорез; ультразвукова обробка)Сумарний розчин БАР -//-//-1442.2. Вплив обробітку інкубаційних яєць надоцтовою кислотою (НОК) на кількість мікродефектів і газопроникність шкаралупи та виводимість яєць КонтрольОбприскування розчином 0 %144I досліднаОбприскування розчином 1 %144II досліднаОбприскування розчином 2 %144IIІ досліднаОбприскування розчином4 %144Етап 3. Розробка методів формування на поверхні біокерамічного захисного шару яєць покриття "штучна кутикула" та оптимізація її хімічного складу
3.1. Обробка яєць обприскуваннямКонтрольна--144I досліднаОбприскування робочим розчином Р1Хітозан144Продовж. табл. 2.11234II досліднаОбприскування робочим розчином Р2CID-20144III досліднаОбприскування робочим розчином Р3Хітозан + НОК144IV досліднаОбприскування робочим розчином Р4Хітозан + НОК + TiO2144V досліднаОбприскування робочим розчином Р5Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ144VI досліднаОбприскування робочим розчином Р6Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4144VII досліднаОбприскування робочим розчином Р7Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4 + Глу + Цис144VIII досліднаОбприскування робочим розчином Р8Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4 + Глу + Цис + ДМСО144IX досліднаОбприскування робочим розчином Р9Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4 + Глу + Цис + ЦД1443.2. Фонофоретична обробка яєць Контрольна--144I досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р1 (22 кГц; 3 с)Хітозан144II досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р2 (22 кГц; 3 с)CID-20144III досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р3 (22 кГц; 3 с)Хітозан + НОК144IV досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р4
(22 кГц; 3 с)Хітозан + НОК + TiO2144V досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р5 (22 кГц; 3 с)Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ144Продовж. табл. 2.11234VI досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р6 (22 кГц; 3 с)Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4144VII досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р7 (22 кГц; 3 с)Хітозан + НОК + TiO2 + ІМДРЕ + CuSO4 + Глу + Цис144VIII досліднаФонофоретична обробка робочим розчином Р8 (22 кГц;