РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика проведенных исследований
Работа основана на изучении клинико-иммунологических проявлений и
характеристике эпидемического процесса ляблиоза в Харьковской области.
Для выполнения поставленных задач было обследовано 152 больных лямблиозом до
лечения и 50 из них после проведенного комплексного лечения. Из числа
обследованных 74 больных составили дети (34 мальчика и 40 девочек) в возрасте
от 1-го до 15 лет, находившихся на стационарном обследовании и лечении в 8-й и
16-й детских больницах г. Харькова. 78 взрослых больных (34 мужчины и 44
женщины) в возрасте от 16 до 60 лет находились на амбулаторном обследовании и
лечении на кафедре медицинской паразитологии и тропических болезней Харьковской
медицинской академии последипломного образования. Контрольную группу составили
30 детей и35 взрослых соответствующего возраста и пола.
Диагноз лямблиоз у всех обследованных больных и его отсутствие в контрольной
группе подтверждены на основании совокупности эпидемиологического и
клинического анамнезов, клинико-лабораторных показателей и результатов
копрологического и иммуноферментного анализов.
У всех больных и лиц контрольной группы были исключены другие паразитарные
инвазии и вирусные гепатиты.
У 76 больных лямблиозом и 46 практически здоровых лиц проведена сравнительная
оценка копроскопического и серологического методов диагностики лямблиоза.
Исходя из того, что в формировании реакции организма в ответ на лямблиозную
инвазию большая роль отводится иммунологической реактивности, обеспечивающей
защитно-приспособительные реакции, проведено исследование состояния иммунитета
у 39 детей и 50 взрослых больных.
Выборочное сероепидемиологическое обследование 265 детей в возрасте от 1 года
до 15 лет, проживающих в г. Харькове и районах Харьковской области, было
проведено методом ИФА на базе отдела паразитологии Областной
санитарно-эпидемиологической станции Харьковской области и вирусологической
лаборатории Областной детской инфекционной клинической больницы г. Харькова в
2004-2006 гг. Исследуемую сыворотку оценивали как позитивную при ее
реагировании в разведении 1:200.
Санитарно-паразитологичне исследование проб испражнений, проб питьевой воды;
воды из открытых водоемов; смывов с предметов домашнего обихода; проб грунта,
взятых в г. Харькове и на территории всех 26 районов области, было проведено на
базе отдела паразитологии Областной санитарно-эпидемиологической станции
Харьковской области и санитарно-эпидемиологической станции Харьковского района
в период 2004-2006 гг.
Всего исследовано 316 656 проб испражнений, взятых у жителей области, 1262 проб
питьевой воды, 261 проб воды из открытых водоемов, 5459 смывов с предметов
домашнего обихода, 163 проб грунта, взятых на территории всех 26 районов
области.
2.2. Методы исследований
В работе были применены следующие методы исследования: эпидемиологические (в
том числе анкетный), клинико-лабораторные, биохимические, иммунологические
(показатели клеточного и гуморального иммунитета), серологические исследования,
санитарно-протозоологическое исследование объектов окружающей среды,
инструментальные методы исследования и методы статистической обработки
полученных результатов [172].
Клиническое обследование больных проводили по общепринятой методике, которая
включала тщательным образом собранный эпидемиологический анамнез, субъективные
и объективные данные, лабораторное (клинический анализ крови, мочи,
биохимический анализ крови, анализ кала на яйца гельминтов и простейшие,
определение антител к антигенам лямблий в сыворотке крови методом
иммуноферментного анализа – ИФА) и инструментальное исследования
(ультразвукового исследования – УЗД, эзофагогастродуоденоскопии – ЕГДС,
электрокардиограммы – ЭКГ).
Копрологический метод заключался в исследовании методом формалин-эфирного
осаждения жидких фракций фекалий из последней порции, собранной из 6-7 мест.
Учитывая важную роль неспецифической резистентности организма и его адаптивных
способностей в развитии хозяино-паразитарных отношений, помимо общепринятого
клинико-лабораторного и инструментального обследования проводилось исследование
иммунологической реактивности путем изучения комплекса показателей,
характеризующих клеточный и гуморальный иммунитет. Исследования проводились на
базе лаборатории радиационной иммунологии института медицинской радиологии им.
С.П. Григорьева АМН Украины.
Иммунологическое обследование больных проводили в соответствии с разработанной
панелью стандартных тестов, рекомендованных ВОЗ (1987 г.). Основные популяции и
субпопуляции лимфоцитов периферической крови определяли с использованием панели
моноклональных антител (МКА или CD-маркеры) "Клоноспектр" (Россия, г. Москва)
методом непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции [73, 82].
Исходя из того, что в формировании реакции организма в ответ на инвазию важная
роль отводится лимфоцитам [100] как интегральному показателю функционирования
иммунной системы, кроме определения количества лимфоцитов проводили
качественную оценку соотношения форменных элементов крови путем вычисления
лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ), позволяющего определить характер и
направленность иммунной реакции в ответ на инвазию по показателям
периферической крови [7].
Концентрацию иммуноглобулинов основных классов (G, А и М) в сыворотке крови
определяли методом простой радиальной иммунодиффузии [86, 101], основанной на
иммунологическом феномене преципитации.
Кровь из вены забиралась в одни и те же утренние часы натощак у больных
находившихся
- Київ+380960830922