РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ ТА МЕТОДИ
2.1. Матеріал
Матеріали було отримано під час різноманітних ультраструктурних досліджень
протягом 30 років. Хоча протягом цього періоду вивчалися різноманітні групи
організмів - бактерії, найпростіші, вищі рослини, віруси, - проте основним
об'єктом були водорості. Загалом досліджено більше 200 видів прокаріотичних та
еукаріотичних водоростей, серед яких переважаючими є представники критичних у
систематичному відношенні таксонів із Xanthophyta та Chlorophyta. Ці дані
склали матеріал розділів, присвячених розробкам таксономічних концепцій в
альгології.
При розробці ендосимбіотичної гіпотези на основі аналізу структури поринів
об'єктом дослідження було обрано загальновизнаний модельний об'єкт Echerichia
coli, штам BЕ (Dorset et al., 1983).
Дослідження мікрофібрилярних колоїдів водоростевого походження проведені як на
природному матеріалі, відібраному в ряді озер на території Канади, так і на
основі колекційних штамів мікроводоростей, переважно з колекції культур
університету штату Індіана в Блумінгтоні (IUCC).
2.1.1. Об'єкти таксономічних досліджень. Перелік модельних об'єктів, на
прикладі яких розглядаються питання, пов'язані із таксономічними завданнями
роботи, подані у табл. 2.1.
При виборі модельних об'єктів ми керувалися двома принципами: по-перше,
об'єкти, крім загальних спільних рис, мають демонструвати також різні аспекти
різноманітності цитологічних ознак та бути спрямованими на вирішення
проблематичних питань, по-друге, основні фактичні матеріали - електронограми -
мають бути опублікованими і доступними для критичного аналізу іншим фахівцям.
Виключенням є лише кілька об'єктів, робота з якими була завершена у 2001 р. і
матеріал ще знаходиться у друці.
Таблиця 2.1.
Водорості, що обрані як модельні об'єкти
Таксон
Відомості про походження об'єкту
Cyanophyta
Oscillatoria antarctica Massalski, Mrozinska et Olech
Антарктида, острів Короля Георга
Leptolyngbya scottii (Fritsch) Anagnostidis et Komarek
Антарктида, острів Короля Георга
Nostoc punctiforme (Kьtz.) Hariot
Антарктида, острів Короля Георга
Anabaena sp., штам 7120
Колекція культур інституту Пастера
Anabaena cylindrica Lemm.
IUCC no. 1447
Anabaena flos-aquae (Lyngb.) Breb.
IUCC no. 1444
Xanthophyta
Xanthonema sp.
Антарктида, острів Короля Георга
Tribonema sp., штам X-94
Антарктида, персональна колекція А.Лукешової
Bumilleria sicula Borzi
Колекція культур Кембріджу, штам CCAP-808/1
Tribonema vulgare Pasch.
Персональна колекція
Bacillariophyta
Achnanthes sp.
Озеро Ері, Канада
Melosira sp.
Озеро Ері, Канада
Chlorophyta
Polytomella parva Pringsheim
UTEX L 193 (aka–nym Polytomella agilis Aragao з колекції IUCC)
Chlamydomonas reinhardtii Dangeard
з колекція IUCC
Chlamydomonas ucrainica Demczenko et al., ad int.
Київ, озеро на території республіканського центру виставок та ярмарок,
персональна колекція Е.М.Демченка
Продовження табл. 2.1
Таксон
Відомості про походження об'єкту
Chlamydomonas sp.
Персональна колекція Е.М.Демченка
Tetracystis pampae Brown et Bold
Антарктида, острів Короля Георга
Tetracystis aeria Brown et Bold
Антарктида, острів Короля Георга
Neospongicoccum cf. perforatum Deason et Cox
Антарктида, острів Короля Георга
Chlorosarcinopsis cf. gelatinosa Chantanachat et Bold
Антарктида, острів Короля Георга
Ankistrodesmus braunii (Nдg.) Coll.
р. Оттава, Канада
Scenedesmus quadricauda (Turp.) Breb. sensu Chod., штам 614
персональна колекція Ф.Р. Трайнора
Scenedesmus sp.
персональна колекція Ф.Р. Трайнора
Desmodesmus abundans (Kirchn.) Hegewald
UTEX 1358, UTEX 2532, SAG 53.80, SAG 54.80
Desmodesmus sp.
Персональна колекція Ф.Р.Трайнора
Lobosphaera reniformis (Watanabe) Komarek et Fott
Антарктида, острів Короля Георга
Lobococcus irregularis (Boye Petersen) Reisigl
Антарктида, острів Короля Георга
Muriella decolor Vischer
Антарктида, острів Короля Георга
Chlorella cf. mirabilis Andreeva
Антарктида, острів Короля Георга
Stichococcus bacillaris Nдg.
Антарктида, острів Короля Георга
Pseudosiderocellopsis antarctica Massalski, Mrozinska et Olech
Антарктида, острів Короля Георга
Coccomyxa sp.
Канада, озеро Ері
Coenochloris sp.
Канада, озеро Ері
Cosmarium sp.
Канада, озеро Ері
Крім того, при розробці таксономічних питань, зокрема мітохондріального
підходу, у роботі використано дані щодо ультраструктури Magnoliophyta
(Fagelind, Massalski, 1974) та Microsporidia (Philogene, Massalski, 1976).
Причому серед вищих рослин для порівняльного аналізу було обрано не наземний, а
прісноводний вид - Lemna minor L. (Fagelind, Massalski, 1974). Мікроспоридії
були залучені для аналізу та демонстрації відсутності мітохондрій у організмів,
що за молекулярними даними (див.: Микрюков, 1999) належать до Platycristates.
2.1.2. Дослідження мікрофібрилярних колоїдів водоростевого походження у водному
середовищі.
Екологічні дослідження були спрямовані на виявлення прямих
структурно-фунціональних аспектів взаємодії водоростей з іншими компонентами
гідробіоценозу на основі дослідження природи колоїдних фібрилярних структур,
виявлених у ряді озер на території Канади.
Об'єктом дослідження були водні зразки, відібрані з товщі води, та донні осади.
Зразки з товщі води відбирали за допомогою батометру, донні осади - за
допомогою уловлювача донних осадів - седиментної пастки (Leppard & al., 1977;
Massalski, Leppard, 1979), що експонувалася на дні протягом 2-35 діб (табл.
2.2). Відібрані проби надалі готувалися для електронно-мікроскопічних
досліджень. Методика обробки матеріалу описана у підрозділі 2.2.
Досліди по вивченню природи колоїдних фібрил проводилися з колекційними
аксенічними штамами водоростей з відділів Cyanophyta, Chlorophyta та
Bacillariophyta з колекц
- Київ+380960830922