РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Проводили морфологические исследования пупочной, воротной вен, печеночной
артерии, каудальной полой вены и их интраорганных ветвей, а также левой,
средней (квадратной и хвостатой) и правой долей печени телят красной степной
породы: мертворожденные (n = 5 голов), 1- (n = 7), 10- (n = 8) и 20- (n = 8)
суточные; поросят полтавского мясной породы (ПМ-1) : мертворожденные (n = 4),
1- (n = 26), 10- (n = 7) и 20- (n = 9) суточные, выращиваемых согласно
технологии, принятой в условиях учебно-научно-производственного
животноводческого комплекса Южного филиала “Крымский агротехнологический
университет” Национального аграрного университета Симферопольского района
Автономной Республики Крым. Аналогичные исследования проводили у щенков
беспородных собак: мертворожденные (n = 3), 1- (n = 3), 10- (n = 12) и 20-
(n = 10) суточные, которых содержали в домашних условиях частные владельцы
г. Симферополя Автономной Республики Крым. Всего исследовано 129 животных
(табл. 2.1).
Использовали комплекс морфологических методик. Живую массу телят устанавливали
на площадочных весах, поросят и щенков – на весах “НПБ-5В”. Умерщвление
животных производили путем острого обескровливания. Материал от мертворожденных
без видимой патологии отбирали не позднее 3 часов после родов. Печень извлекали
с помощью анатомического препарирования, сохраняя при органе фрагменты
приносящих и отводящих кровь КС длиной 1,2-1,5 см у телят, 0,5-0,7 см у поросят
и щенков. Нефиксированные печени взвешивали на весах “НПБ-5В” (телята) и
ВЛТК-500-М (поросята и щенки).
Фиксацию КС, фрагментов долей печени и целых печеней телят, поросят и щенков
проводили перфузией при комнатной температуре 3-5% водного раствора формалина и
по истечении 3-5 суток – фиксировали в 10% водном растворе формалина, в котором
и сохраняли их для проведения препарирования и гистологических исследований.
Таблица 2.1
Материал морфологических исследований
Вид животных
Возраст, сутки
Печень, доли
Кровеносные сосуды
Всего
левая
средняя
правая
пупочная вена
воротная вена
печеночная артерия
каудальная полая вена
Телята
М-р*.
35
14
14
14
14
83
10
29
20
29
Всего
20
20
20
29
29
29
29
176
Поросята
М-р.
28
23
23
23
23
110
10
14
14
14
14
74
20
36
Всего
20
20
20
47
47
47
47
248
Щенки
М-р.
21
30
30
30
30
138
10
51
20
40
Всего
18
18
18
49
49
49
49
250
Всего
58
58
58
125
125
125
125
674
Макропрепарирование КС внутри печени осуществляли с помощью анатомического
скальпеля, пинцета и налобной лупы, проводя морфометрию линейкой с ценой
деления 1 мм и штангенциркулем (табл. 2.2). Макро- микропрепарирование
выполняли под МБС-10, помещая печени в прозрачные (стеклянные либо пластиковые)
ёмкости с водой в отраженном свете, используя глазные скальпель и пинцет,
препаровальные иглы и фрагменты режущей кромки безопасных лезвий,
зафиксированные в гемостатическом пинцете [117]. В процессе препарирования
печени периодически промывали в проточной воде, заменяя воду в ёмкости для
препарирования.
––––––––––––––––––––––
Примечание. * М-р. – мертворожденные.
Таблица 2.2
Распределение материала по методикам морфологических исследований
Материал
исследования
Инъекия контрастных масс, макромикропрепарирование и просветление
Коррозия
Рентгенография
Гистологические методики
Всего
гематок-силин и эозин
фукселин и кармин Орта
пикроиндигокармин и кармин Орта
серебрение
по В.В.Куприянову
инъекция раствора нитрата
серебра
реакция на гликоген по Бесту
Печень,
доли
левая
66
66
66
51
58
307
средняя
66
66
66
51
58
307
правая
66
66
66
51
58
307
Кровеносные
сосуды
пупочная
вена
41
53
27
66
66
66
51
370
воротная
вена
41
53
27
66
66
66
51
51
421
печеночная
артерия
41
53
27
66
66
66
51
51
421
каудальная
полая вена
41
53
27
66
66
66
51
370
Всего
164
212
108
462
462
462
357
102
174
2503
Морфометрию отпрепарированных структур осуществляли с помощью окулярной вставки
к МБС-10 с точностью до 0,014-0,05 мм в зависимости от увеличения на объективе
прибора. С помощью макро- микропрепарирования устанавливали архитектонику КС до
III-V порядков ветвления, взаимоотношения между сосудами, а также сосудами и
паренхимой в различных участках долей органа.
Проводили инъекцию КС печени суспензией черной туши на 5% желатиновом геле,
подогретом на водяной бане до +37о…+40оС, не изолируя орган из труппа
животного. Инъекция КС, в том числе печени, суспензией черной туши в
морфологических исследованиях используется широко [29, 69, 114, 129 и др.]. Мы
применяли методику подготовки инъекционной массы, рекомендуемую Криштофоровой
Б.В. [117]. Техника наливки разработана нами с учетом размера трупа животного.
Наливку печеночной артерии телят осуществляли путем введения контрастной массы
в ее околопортальный участок с помощью иглы для внутримышечных введений и
инъекционных шприцев объемом 10 и 20 мл. Ориентиром для окончания инъекции
служило наполнение параумбиликальных и субкапсулярных сосудов в различных
участках долей печени.
Инъекция контрастной массы в печеночную артерию у поросят и, особенно, у щенков
непосредственно в интраорганную магистраль сложно осуществима, так как в
процессе фиксации различных инъекционных игл, включая иглы для внутрикожных
введений, к
- Киев+380960830922