ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследования проводили на 535 белых беспородных крысах-самцах трех возрастных
групп, полученных из вивария лабораторных животных ЛугГМУ. Для устранения
воздействия сезонных и суточных колебаний на изучаемые показатели, основные
опыты были проведены в осенне-зимний период года. Исследования осуществлялись в
соответствии с принципами Хельсинской декларации, принятой Генеральной
ассамблеей Всемирной медицинской ассоциации (2000), Конвенции Совета Европы о
правах человека и биомедицине (1997), соответствующих положений ВООЗ,
Международного совета медицинских научных обществ, Международного кодекса
медицинской этики (1983), «Общими этическими принципами экспериментов над
животными», утвержденными I Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2001),
согласованными с положениями «Европейской конвенции по защите позвоночных
животных, которые используются в экспериментальных и других научных целях»
(Страсбург, 18.03.1986). Перед началом эксперимента все животные были тщательно
осмотрены, учитывался их вес, возраст, двигательная активность и состояние
покрова шерсти. После внешнего осмотра и выбраковывания крыс, у которых
определялись отклонения от обычных норм в поведении, начинали эксперимент
одновременно с контрольной и подопытными группами животных. До и во время
эксперимента крысы находились в виварии при температуре 20-25°С, влажности не
более 50%, объеме воздухообмена (вытяжка-приток) 8/10, световом режиме
день/ночь в стандартных пластиковых клетках не более 6 особей в каждой, на
стандартном рационе. Доступ к воде был свободным. Проводилось ежедневное
наблюдение за поведением и общим состоянием животных. Все крысы, используемые в
эксперименте, были здоровы и активны, имели опрятный вид.
В эксперименте использовали достаточное для статистической обработки и
получения достоверных результатов общепринятое количество животных (по 6 в
группе), а также минимальное для достижения цели и решения задач исследования
количество экспериментальных групп, т.е. общее количество животных.
Избранные нами лабораторные животные характеризуются значительным рядом
преимуществ перед такими традиционными лабораторными животными, как собаки,
кролики, морские свинки и мыши. Известно, что белые лабораторные крысы обладают
более высокой приспособляемостью и устойчивостью к интеркуррентным инфекциям, а
небольшие размеры тела и простое содержание позволяют проводить массовые
исследования. Кроме того, тимус крысы и человека имеет большое структурное
сходство на всех уровнях организации - от органного до субклеточного. Все типы
эпителиальных клеток, описанные в тимусе у человека, были идентифицированы в
тимусе крысы [436].
Для создания экспериментальной модели экзогенной общей гипертермии организма,
группу лабораторных животных помещали в хорошо проветриваемую термическую
камеру, сконструированную сотрудниками кафедры анестезиологии и реаниматологии
Луганского государственного медицинского университета (авторское свидетельство
№1452526 А1 на изобретение «Тепловая токсикологическая камера» - Можаев
Геннадий Александрович, Гридин Виктор Сергеевич, Чолак Эдуард Олегович, Ивонин
Евгений Александрович, Красовский Олег Юрьевич, Гарькавец Сергей Иванович).
Камера была нами усовершенствована, получен патент на изобретение
«Климатическая камера с телеконтролем и телеуправлением». Она представляет
собой шкаф в виде куба с длиной ребра 200 мм (рис. 2.1). Стенки камеры
выполнены из двух слоев листового железа, пространство между которыми заполнено
термоизолирующим матеріалом (рис. 2.2). Камера обустроена герметичными дверями
(3), окном наблюдения (2) и вентиляционным устройством (4). Нагревающие
элементы (10) получают ток напряжением 220 В через коммутирующее электронное
устройство на базе семистора высокого напряжения. Для контроля климатических
показателей камера оборудована модулем дистанционного контроля, схема которого
базируется на современных электронных приборах: микропроцессоре PIC и
электронных датчиках влажности, температуры воздуха, атмосферного давления,
СО2, а также компьютера с подключенной к нему веб-камерой как коммутирующего
модуля.
Датчики в виде отдельного блока расположены внутри камеры (8), после усиления
сигнал поступает к микропроцессорному блоку (12) на базе микропроцессора PIC
16F625, расположенного снаружи. Сигналы с датчиков в реальном времени
переводятся в цифровую форму АЦП микропроцессора и через СОМ порт передаются на
персональный компьютер (13). Специально разработанное программное обеспечение
«CamerаPower», созданное в среде разработки «Delphi», анализирует полученную
информацию и через коммутирующее устройство (5) руководит нагревающими
элементами и вентиляционными устройствами, а также освещением в камере в
зависимости от избранного режима. Поскольку объем камеры достаточно
значительный, температура воздуха измеряется на различных вертикальных уровнях
и при разнице показателей датчиков. После анализа информации через
коммутирующее устройство включается вентилятор (7) для перемешивания слоев
воздуха внутри камеры. Кроме этого, по протоколу TCP/IP, по сети (14)
информация о состоянии в камере передается на отдаленный компьютер (15), с
которого ведется общий контроль за ходом эксперимента. С помощью программы
„CamerаPower” устанавливаются режимы работы камеры, при достижении заданной
температуры включается отсчет времени экспозиции, при окончании времени
проводится вентиляция для снижения температуры в камере до комнатной.
Рис. 2.1. Блок-схема камеры.
Условные обозначения: 1- шкаф; 2 - о
- Киев+380960830922