РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
2.1. Матеріал дослідження
Дослідження були проведені у 107 чоловіків , в яких в 1986 р. було встановлено діагноз гострої променевої хвороби. До основної групи увійшли реконвалесценти ГПХ 1-3 ступеню тяжкості та пацієнти , у яких при перегляді діагнозів у 1989 році діагноз ГПХ не було підтверджено, через відсутность типового кістково-мозкового синдрому (ГПХ-0). Всі обстежені перебували на лікуванні у відділенні променевої патології Інституту клінічної радіології НЦРМ АМН України. Клінічно-імунологічне дослідження проводили, як складову частину комплексного обстеження хворих, що використовується в ІКР НЦРМ АМН України. Контрольну групу склали 40 практично здорових донорів Київської міської станції переливання крові. Вікову та дозиметричну характеристику обстежених груп наведено у табл. 2.1.
Таблиця 2.1
Характеристика обстежених груп
Група
спостереженняКількість
обстеженихСередній вік на момент oпроміненняСередня доза
oпромінення (Гр)ГПХ-05035+0.130.28+0.023ГПХ-1 2534+0.231.07+0.064ГПХ-2-3 3236+0.463.00+0.16Контрольна група4036+0.51В межах природного фону
Обстеження проведено в період з 1993 по 1998 рік; більша частина осіб основної групи була обстежена частіше ніж двічі. Число осіб основної групи за кожний рік періоду обстеження наведено у таблиці 2.2.
Таблиця 2.2
Число обстежень, проведених у осіб основної групи в період з 1993-1998 р.р.
Група спостереженняКількість обстежених за рік
199319941995199619971998ГПХ-0271623171814ГПХ-11381712178ГПХ-2-3 21131815207
Дані про вміст лейкоцитів та лімфоцитів периферичної крові реконвалесцентів ГПХ в залежності від терміну після опромінення та ступеню перенесеної ГПХ наведено у таблиці 2.3.
Таблиця 2.3
Вміст лейкоцитів, відносний та абсолютний вміст лімфоцитів в периферичній крові реконвалесцентів ГПХ
Група обстеженихРоки обстеження Вміст*лейкоцитів
(109/л)лімфоцитів
(%)лімфоцитів
(109/л)Донори6,32?0,4132,47?1,922,06?0,17ГПХ-01993-19945,94?0,2133,56?1,302,00?0,101995-19966,02?0,2534,66?1,272,05?0,101997-19986,11?0,4436,43?1,742,22?0,18ГПХ-11993-19946,15?0,3234,87?2,352,18?0,221995-19966,13?0,3136,71?1,562,15?0,171997-19985,84?0,3337,71?2,592,19?0,18ГПХ- 2-31993-19946,69?0,4929,22?1,211,92?0,151995-19966,66?0,3835,06?1,362,37?0,181997-19986,39?0,4134,53?2,042,16?0,16Примітка
*- Дані подано як М+m
Наведені у таблиці 2.3 результати свідчать про відсутність достовірних відмінностей середніх показників вмісту лейкоцитів та лімфоцитів у реконвалесцентів ГПХ порівняно з донорами. Не відмічалося також суттєвих коливань цих показників впродовж періоду спостереження. Проте, при аналізі індивідуальної динаміки вмісту лейкоцитів та лімфоцитів відзначалися стани стабільної лейкопенії у 7,0 %, лейкоцитозу у 9,7% та лімфоцитозу у 8,5% паціентів. Стійкі відхилення з боку показників периферичної крові розцінюються як передпатологічні стани в системі кровотворення [120]. За час спостереження у двох реконвалесцентів ГПХ розвинувся міелодиспластичний синдром. У цих випадках проводилося імунофенотипування лейкоцитів периферичної крові з використанням набору моноклональних антитіл Acute Leukemia (Becton Dickinson, США ). Результати імуноцитологічних досліджень у цих хворих аналізувалися окремо [12] і не увійшли до загальної статистики.
Більшість обстежених основної групи до аварії на ЧАЕС були практично здоровими особами. За роки після перенесеної ГПХ спостерігались виникнення та хронізація соматичних захворювань, формування органічної нейросудинної патології. Через 6 років після аварії спектр хронічної соматичної патології у реконвалесцентів ГПХ був сформованим. Хронічна патологія органів дихання (хронічний бронхіт) реєструвалася у 26,9 % осіб в групі з непідтвердженою ГПХ , 23% та 27,3% осіб відповідно у групах ГПХ 1ст. та ГПХ 2-3ст. Захворювання системи травлення у реконвалесцентів ГПХ проявлялися у вигляді виразкової хвороби 12-палої кишки та шлунку (ГПХ-0 - 25%; ГПХ-1 - 19,2%; ГПХ-2-3 - 21,2%); хронічного ерозивного гастродуоденіту (ГПХ-0 - 48,1%; ГПХ-1 - 53,8%; ГПХ-2-3 - 48,5%); хронічного персистуючого гепатиту (ГПХ-0 - 26,9%; ГПХ-1 - 30,8%; ГПХ-2-3 - 33,8%); хронічного холецистоангіохоліту/холецистіту (ГПХ-0 - 36,5%; ГПХ-1 - 42,3%; ГПХ-2-3 - 45,5%); хронічного коліту з дисбактеріозом ( ГПХ-0 - 48,1%; ГПХ-1 - 50,0%; ГПХ-2-3 - 48,1%) . Сердцевосудинна патологія - гіпертонічна хвороба, ішемічна хвороба сердця - зустрічалася у 25% реконвалесцентів ГПХ. Органічна нейросудинна патологія у вигдяді дисциркуляторної енцефалопатії спостерігалася у всіх осіб , що хворіли на ГПХ.
Таким чином аналіз спектру хронічної патології у реконвалесцентів ГПХ не виявив суттєвих відмінностей між групами в залежності від ступеню тяжкості перенесеної ГПХ , тобто вплив супутньої хронічної патології на імунну систему в усіх групах обстежених можна вважати однаковим.
2.2. Методи дослідженння
Дослідження імунного статусу проводили за рекомендаціями по обстеженню осіб, що потерпіли від дії іонізуючої радіації [81, 97]. Вивчався популяційний та супопуляційний склад ІКК, рівні сироваткових імуноглобулінів (IgA, IgG, IgM), концентрації дрібно- і великодисперсних циркулюючих імунних комплексів (ЦІК).
Концентрацію імуноглобулінів основних класів в сироватці крові визначали методом простої радіальної дифузії [169]. Визначення рівня ЦІК проводили в градієнті поліетиленгліколю за методом [100].
Субпопуляційний склад імунокомпетентних клітин і експресію поверхневого фенотипу вивчали методом протічної цитофлюориметрії у прямому імунофлюоресцентному тесті за допомогою панелі моноклональних антитіл (МКАТ) серії Leu (Becton Dickinson, США ) [123]. Набори IMK Plus включали МКАТ для двоколірного аналізу МПК, помічені флюоресцеїну ізотіоціанатом (FITC) або фікоеритрином (РЕ), у тому числі к