ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал и методы клинических исследований
Для выделения и изучения факторов риска возникновения патологических акушерских
кровотечений, а также факторов влияющих на величину кровопотери, возникновение
и развитие акушерского геморрагического шока, развития ОРДС осуществлен
ретроспективный анализ 306 историй родов: 1-я группа – женщины с высоким риском
патологического кровотечения (104 человека). 2-я группа – женщины с
патологическими кровотечениями в обьеме более 0,5% массы тела (102 человека);
3-я группа (контроль) – женщины с отсутствием факторов риска и физиологической
кровопотерей в родах (100 человек).
С целью изучения частоты и объёма патологической акушерской кровопотери, а
также для определения целесообразности введения ингибиторов протеолиза
родильницам с кровопотерей, достигшей объёма 1000 мл., проведен проспективный
анализ 209 историй родов женщин с патологической акушерской кровопотерей,
рожавших в клиническом родильном доме №2 г.Симферополя в 1997-2001г.г.
Для оценки состояния фибринолитической активности крови у родильниц
определялись следующие параметры: содержание растворимых комплексов
фибрин-мономера (РКФ), этаноловый тест, содержание фибриногена В,
антиплазминовая активность крови по методу N.S.Niewiarowski.
Проведены исследования у 47 женщин с кровопотерей достигшей объёма 1000 мл. (26
женщин без применения ингибиторов протеолиза и 21 – с их применением), через 1
час после введения, через 12 часов и через 24 часа.
Проведен ретроспективный анализ 32 случаев смерти женщин, умерших при явлениях
акушерского геморрагического шока.
Анализу подверглись данные клинических, лабораторных, ультразвуковых,
рентгенологических и других исследований. Осуществлен ретроспективный анализ
архивных микропрепаратов с окраской срезов внутренних органов (легкие, почки,
печень, головной мозг, сердце и др.) гемотоксилин-эозином и по Ван Гизону из
парафиновых блоков указанных внутренних органов были изготовлены срезы и
применены дополнительные методики их окраски при помощи реакции МSB и Масон
44/41 для морфологической диагностики синдрома ДВС крови [6, 74, 143, 130].
2.2. Построение эксперимента и материал исследования
Общая характеристика экспериментального материала
Наши эксперименты проведены на модели геморрагического шока у беременных
крольчих. Все опыты были выполнены в соответствии с заключением комитета по
биологической этике при Крымском государственном медицинском университете им.
С.И.Георгиевского протокол №2 от 12.01.03 года регламентирующим гуманное
отношение к животным.
Исследования проведены на 87 серых крольчихах породы шиншилла массой 2,80-3,30
кг со сроком беременности 25-28 дней. До эксперимента они содержались в
условиях вивария на обычном рационе. За двое суток до опыта крольчихи
помещались в специальные просторные индивидуальные клетки, в которых они
находились в течении всего эксперимента. Распределение наблюдений и общее
количество животных, использованных в работе, представлено в таблице 2.2.1.
Все исследования были выполнены в лаборатории кафедры патологической физиологии
и на кафедре акушерства и гинекологии №1 Крымского государственного
медицинского университета в период с сентября 1999г. по май 2000г. Каждая серия
экспериментов проводилась параллельно с контролем.
Модель шока
В работе использован видоизмененный метод моделирования геморрагического шока у
крольчих по Миджерсу путем создания постгеморрагической гипотонии в течении 1
часа на уровне артериального давления равного 60 мм.рт.ст., окончательная
кровопотеря составила около 40% от должного ОЦК.
Таблица 2.2.1.
Распределение животных по сериям экспериментов.
№ п/п
Серия экспериментов
Кол-во животных
1.
Изучение исходных показателей здоровых крольчих
22
2.
Изучение показателей при геморрагическом шоке:
а) у погибших животных к 14 часам после проведения кровопускания
б) у выживших животных к 14 часам от начала развития шока
3.
Влияние контрикала на течение геморрагического шока
10
4.
Влияние на проявление геморрагического шока иммунизации протеолитическими
ферментами:
а) трипсином
б) калликреином
в) химотрипсином
5.
Иммунизация крольчих протеолитическими ферментами для получения гипериммунных
сывороток
18
Итого
87
Применена также методика Уиттерса в модификации экспериментального
геморрагического шока во время беременности, разработанной на нашей кафедре
[54, 112, 130].
Длительность гипотензивного периода определена экспериментально и равна времени
от момента кровопускания до срока, близкого к началу спонтанного снижения
артериального давления у большинства животных, что считалось началом стадии
декомпенсации в торпидной стадии шока [112].
Результатом проведенных нами первоначальных исследований показательные
изменения при экспериментальном геморрагическом шоке на фоне беременности у
крольчих наступают к 14 часам от начала кровопускания.
У фиксированных к станку крольчих под местной анестезией с использованием 0,25%
раствора новокаина препарировали и катетеризировали правую сонную артерию и
правую наружную яремную вену. Гепарин вводился из расчета 2000 ЕД/кг [55], при
использовании меньших доз гепарина катетер, введенный в артерию быстро
тромбировался.
Кровь извлекалась в течение 10 мин. с помощью шприца до достижения уровня
артериального давления, равного 60 мм рт. ст., которое поддерживалось на этом
уровне в течение 1 часа с помощью дробных заборов крови. Извлеченная кровь
хранилась в стерильном стеклянном флаконе при температуре 18-20°С, затем
реинфузировалась в течение 15-20 минут. Спустя 14 часов 50% животны
- Київ+380960830922