РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
В процесі виконання даної роботи використовувалось ряд різних тест-об'єктів та методів досліджень. Але ми не вважаємо необхідним наводити всі ці матеріали у даному розділі. Це продиктовано намаганнями уникнути небажаних повторювань та деталізації окремих загальноприйнятих методів, опис яких представлений у літературних джерелах.
Методи загального характеру, зокрема методи культивування об'єктів дослідження, проведення їх скринінгу за різними властивостями, виділення активного метаболіту, а також визначення його окремих параметрів будуть наведені нами у цьому розділі. Окремі методи будуть розглядатися нами у відповідних розділах експериментальної частини роботи. Це стосується, головним чином, методів, які використовувались нами у ході досліджень, але не сприяли вирішенню поставлених завдань.
2.1 Об'єкти дослідження
При виконанні даної роботи об'єктами досліджень були різні види мікроміцетів р. Aspergillus, а також набір тест-організмів, що використовувались для визначення антибіотичної, антифунгальної та фітотоксичної активності досліджуваних грибів, а саме - бактерії, дріжджоподібні гриби, зелені водорості та насіння рослин.
2.1.1. Мікроміцети
Для проведення скринінгу за антибіотичними та фітотоксичними властивостями було використано 128 штамів мікроміцетів р. Aspergillus, які належать до 18 видів та 3 різновидностей (табл. 2.1).
Таблиця 2.1
Досліджувані види мікроміцетів
№ п/п
Види, автори, рік описанняКількість досліджених штамів
Роки, місця виділення12341A. candidus Link, 1809
21999 - 2002, м. Київ, повітря приміщення; Миколаївська обл., грунт2A. clavatus Desm., 183411999, Житомирська обл., грунт3A. deflectus Fennell et Raper, 1955
11999, Житомирська обл., грунт4A. flavipes (Bain. et Sart.) Thom et Church, 1926
101998 - 2002, Київська, Луганська, Кіровоградська, Миколаївська обл., Крим, грунти5A. flavus Link, 1809
42000 - 2002, м. Київ, повітря приміщення; Миколаївська обл., грунт6A. flavus Link. var. columnaris Raper et Fennell, 1965
12003, Запорізька обл., грунт7A. fumigatus Fres., 1863
51998 - 2003, Київська обл., IV блок ЧАЕС, поверхня стіни; Львівська, Сумська обл., Крим, грунти8A. niger v. Tiegh., 1867
52001 - 2002, Київська обл., IV блок ЧАЕС, поверхня стіни; Полтавська обл., давній грунт9A. ochraceus Wilhelm, 1877
131995 - 2002, Київська обл., м. Чорнобиль, м. Прип'ять, радіоактивний грунт; Крим, грунт10A. parvulus Smith, 1961
201988 - 2001, Київська обл.,
м. Ново-Шепеличі, лісова підстилка; м. Чорнобиль, радіоактивний грунт123411A. sydowii (Bain. et Sart.) Thom et Church, 1926
51999 - 2000, Київська обл., м. Чорнобиль, зона відчуження, грунт; м. Київ, повітря службового приміщення12A. terreus Thom, 1918
121999 - 2003, Луганська обл., грунт; Миколаївська обл., грунт; м. Київ, повітря приміщень13A. terreus var. africanus Fennell et Raper, 1955
31998 - 2000, Ужгородська обл., грунт; м. Київ, повітря; Крим, ризосфера ялівця14A. terreus var. aureus Fennell et Raper, 1945
11998, м. Київ, повітря15A. ustus (Bain.) Thom et Church, 1926
141996 - 2001, Київська обл., радіоактивний грунт; Херсонська, Житомирська, Запорізька обл., Крим, грунти16A. versicolor (Vuill.) Tiraboschi, 1926191997 - 2001, Київська обл., IV блок ЧАЕС, поверхня стіни; Житомирська обл., лісова підстилка; Крим, грунт17Emericella fruticulosa (Raper et Fennell) Malloch et Cain, 1972 (A. fruticulosus Raper et Fennell, 1965)11999, Крим, грунт18E. nidulans (Eidam) Vuill., 1927, (A. nidulans (Eidam) Wint., 1884)21998 - 2001, Київська обл., м. Лютіж, грунт; м. Київ, повітря приміщення
123419Fennellia nivea (Wiley et Simmons) Sams., (A. niveus Blochwitz, 1929)12002, м. Київ, повітря приміщення20Neosartorya fischeri (Wehmer) Malloch et Cain, 1972 (A. fischeri Wehmer, 1907)22003, Запорізька, Луганська обл., грунти21Petromyces alliaceus Malloch et Cain, 1972, (A. alliaceus Thom et Church em. Fennell et Warcup, 1959)
51998 - 2003, Луганська обл., м. Картомиш, грунт; Запорізька обл., с. Велика Знам'янка, грунт; Крим, м. Саки, грунт
Досліджувані штами мікроміцетів були люб'язно надані у наше розпорядження з музею відділу фізіології і систематики мікроміцетів (завідуюча - проф. Н.М. Жданова) ст. наук. співробітниками А.І. Василевською, О.В. Соколовою і наук. співробітником В.О. Захарченко за що ми їм щиро вдячні.
2.1.2. Дріжджоподібні гриби
Антифунгальні властивості досліджуваних мікроміцетів визначали відносно 3 штамів дріжджоподібних грибів. Перелік досліджуваних штамів наведений в таблиці 2.2.
Штами дріжджоподібних грибів були люб'язно надані в наше розпорядження з відділу фізіології промислових мікроорганізмів (завідуючий - член-кор. НАНУ В.С. Підгорський) ст. наук. співробітником С.С. Нагорною, за що ми їй щиро вдячні.
Таблиця 2.2
Досліджувані штами дріжджоподібних грибів
№ п/пВиди№№ штамів1Candida albicans6902C. kefyr8993Trichosporon cutaneum1502
2.1.3. Бактерії
Антибіотичні властивості досліджуваних мікроміцетів вивчали відносно 7 штамів бактерій, що належать до різних груп тест-культур. Перелік досліджуваних бактеріальних штамів наведений в таблиці 2.3.
Таблиця 2.3
Досліджувані штами бактерій
№ п/пВиди№№ штамівГрампозитивні бактерії1Staphylococcus aureus2092Bacillus subtilis6173B. licheniformis5Грамнегативні бактерії4Escherichia coli25225Salmonella typhimurium11в тому числі фітопатогенні бактерії6Pseudomonas syringae pv. lachrymans75917Erwinia aroidea8636
Штами фітопатогенних бактерій були люб'язно надані в наше розпорядження з відділу фітопатогенних бактерій (завідуючий - проф. Р.І. Гвоздяк) провідним інженером Н.В. Житкевич, штами грампозитивних та грамнегативних бактерій - з відділу антибіотиків пров. наук. співробітником І.Б. Сорокуловою - за що ми їм щиро вдячні.
2.1.4. Водорості
Фітотоксичні властивості вивчали відносно 16 штамів зелених водоростей (серед яких 7 хлороф
- Київ+380960830922