Глава 2
Материалы и методы исследования
2.1. Особенности методологии исследования и его клинико-параклинические методы
Для достижения цели научной работы и решения её задач нами предложена
методология исследования, которая схематически изображена на рис. 2.1. Цифрами,
расположенными над стрелками, обозначены основные направления научного поиска,
которые соответствуют задачам исследования и являются основой для формирования
выводов диссертации.
На 1-м этапе работы изучена взаимосвязь между наличием у женщины того или иного
аллеля А, В, DR локусов HLA-системы и частотой какой-либо акушерской патологии.
Для данного анализа нами выделена наиболее распространённая и тяжёлая
акушерская патология, которая обладает высокой степенью риска материнской и
перинатальной заболеваемости и смертности (гестозы 1-й и 2-й половины
беременности; угроза прерывания беременности и угроза преждевременных родов;
анемия беременных; многоводие; хроническая фетоплацентарная недостаточность;
задержка внутриутробного развития плода; аномалии родовой деятельности). В
результате 1-го этапа у беременных определены аллели А, В, DR локусов
HLA-системы, которые ассоциированы с конкретной акушерской патологией.
На 2-м этапе работы изучена взаимосвязь между клиническим течением
беременности, родов и совместимостью супругов по аллелям А, В, DR локусов
HLA-системы. При анализе исследования критерием совместимости супружеской пары
по А, В, DR локусам HLA-системы являются: 1) наличие хотя бы одного одинакового
аллеля по одному из локусов; 2) обладание супругами хотя бы одним аллелем
одновременно по трём локусам. В результате 2-го этапа установлены ассоциации
совместимости супругов по аллелям локусов HLA-системы с риском возникновения
определённой акушерской патологии.
Рис. 2.1. Схематическое изображение методологии исследования.
На 3-м этапе исследования проведен анализ состояния НИЭ системы беременной и
системы «мать-плацента-плод» с 1-го триместра и до родоразрешения при
акушерской патологии, клинические формы которой были обозначены условиями 1-го
этапа исследования. Особенностью данного этапа являлось динамическое наблюдение
первобеременных с ранних сроков гестации с использованием метода случайной
выборки при обращении пациенток в женскую консультацию по поводу задержки
менструаций с последующей диагностикой беременности в сроке 7-8 нед.
Дополнительными критериями являлись: согласие пациентки на консультативное
наблюдение и обследование в условиях клиники; отсутствие экстрагенитальной
патологии в стадии суб/декомпенсации или признаков TORCH-инфекции [15];
пролонгирование беременности до конца 2-го триместра гестации. У всех пациенток
показатели глюкозы крови соответствовали физиологической норме. Результаты 3-го
этапа исследования позволяют выявить характерные изменения в
нейроиммуноэндокринной регуляции гомеостаза беременной с 1-го триместра,
которые реализуются клинически в виде осложнений беременности, родов и
послеродового периода.
На 4-м этапе научной работы изучено состояние НИЭ системы в зависимости от
наличия у беременных характерных аллелей А, В, DR локусов HLA-системы, которые
были обозначены на 1-м этапе исследования. Результатом 4-го этапа является
констатация особенностей функционирования НИЭ системы беременной в зависимости
от наличия или отсутствия у неё конкретного аллеля А, В, DR локусов
HLA-системы.
На 5-м этапе работы дана оценка морфофункционального состояния последа в
зависимости от совместимости супругов по аллелям А, В, DR локусов HLA-системы
при физиологическом и осложнённом течении беременности. Результаты 5-го этапа
исследования позволяют на морфологическом уровне констатировать регуляторное
влияние HLA-системы на процессы плацентогенеза и прогрессирования беременности
с изменением НИЭ статуса женщины и нарушением иммунологической реактивности и
толерантности.
На завершающем этапе исследования обобщены и проанализированы взаимосвязи между
HLA-системой, НИЭ системой и клиническими особенностями акушерской патологии. С
использованием статистических методов разработаны алгоритмы прогнозирования
развития акушерских осложнений, даны критерии степени риска возникновения
тяжёлой акушерской патологии, что позволило оптимизировать диспансерное
наблюдение беременных и формирование групп высокого риска по возникновению
материнской и перинатальной заболеваемости и смертности.
Для решения поставленных задач использованы: клинический, антропометрический,
физический (ультразвуковое обследование, допплерография, кардиотокография),
иммуноферментный методы; метод полимеразной цепной реакции; методы клинической
иммунологии (определение показателей неспецифического, клеточного и
гуморального иммунитета; иммунохимический, иммуногистологический,
иммуногенетический методы), гистологические методы (морфологический,
гистохимический, иммуногистохимический, иммуноцитохимический), статистические
методы.
В настоящем исследовании проведено клиническое наблюдение за течением
беременности, родов и послеродового периода у 294 первобеременных. Особенности
клинического течения беременности и родов, морфофункциональной структуры
последа в зависимости от совместимости супругов по аллелям локусов А, В, DR
HLA-системы изучены у 51 супружеской пары, которые отобраны с использованием
методов рандомизации из общей выборки (метод случайных чисел). Клиническое
обследование беременных соответствовало положениям действующих приказов
Министерства здравоохранения Украины по обследованию беременных в условиях
женской консультации и акушерского стационара, а также по алго
- Київ+380960830922