1.6.1 Фитотерапия ХВН. Номенклатура, состав, показатели качества венотоиизирующих лекарственных средств растительного
происхождения...................................................35
1.6.1.1 Растительные препараты, содержащие тритерленовые
гликозиды и другие сапонины. Применение конского каштана в медицине.....................................................36
1.6.1.2 Номенклатура биологически активных добавок к пище (БАД) растительного происхождения, способствующие нормализации периферического (капиллярного) кровообращения и улучшению состояния сосудов нижних конечностей.........................39
1.6.2 Фармакологические свойства препаратов семян конского каштана обыкновенного...............................................39
1.7 Организационно-экономическое обоснование целесообразности создания отечественных препаратов на основе семян конского каштана обыкновенного43
Выводы к главе 1....................................................45
ЧАСТЬ II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Объекты, материалы и методы исследования............................46
ГЛАВА 2. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИХ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА СЕМЯН КОНСКОГО КАШТАНА ОБЫКНОВЕННОГО......................................55
2.1 К фармакогнозии семян конского каштана обыкновенного и установление методов определения подлинности семян...............................55
2.1.1 Исследование морфологических признаков семян..............55
2.1.2 Исследование микроскопических признаков цельных и измельченных семян.......................................................56
2.1.3 Установление подлинности семян............................61
2.2 Разработка методики количественного определения ТГ..............64
в сырье.............................................................64
16
Многие ТГ вызывают гемолиз эритроцитов крови. Для проведения этой реакции из растительного сырья готовят настой на изотоническом растворе. Однако положительный результат гемолитической пробы еще не является доказательством наличия ТГ, так как ее дают и другие растительные вещества (некоторые эфирные масла, кислоты, спирты). Кроме того, ТГ могут находиться в растении в виде комплекса со стеролами и не проявлять гемолитической активности до разрушения этого комплекса.
Методы определения ТГ, основанные на повышенной токсичности этих соединений для холоднокровных животных (рыб, головастиков, жаб, червей), не имеют преимущества по сравнению с гемолитическим индексом и сохраняют его главный недостаток - невысокую надежность, невозможность строгого отнесения исследуемых веществ к классу ТГ.
1.1.3.2 Хроматографическое обнаружение
Для обнаружения и идентификации ТГ широко используют как бумажную (БХ), так и тонкослойную (ТСХ) хроматографию.
Для разделения нейтральных гликозидов пользуются в основном водноспиртовыми системами, например, хлороформ - метанол - вода (65:35:10). Применение этой системы удобно и для препаративных целей. Ею также можно пользоваться при хроматографии на колонке и при разделении сложных смесей ТГ. Соотношение растворителей можно изменять в зависимости от полярности разделяемых веществ; для слабо полярных гликозидов воду в смесь не добавляют, причем органические растворители берут в соотношении 8:2. Удобной менее полярной смесью является система этилацетат-четыреххлористый углерод. Кислые гликозиды делят в смесях, содержащих бутанол, например, н-бутанол-этанол-25 % раствор аммиака (7:2:5).
ТГ в сапарале (ВФС 42-555-75, ВФС 42-456-75) определяют методом хроматографии в тонком слое силикагеля (марки КСК) в системе хлороформ -метанол - вода (61:32:7). Для обнаружения гликозидов на хроматсирамме пластинку опрыскивают 20 % раствором серной кислоты, затем нагревают- в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин, ТГ - аралозиды
17
проявляются в форме пятен вишневого цвета с соответствующими значениями Rf (0,35; 0,25; 0,15) [67,93].
Также в качестве проявляющих реактивов используют следующие реагенты: насыщенный хлороформный раствор сурьмы - Sb (III) и Sb (V) хлоридов, 20 %-ный спиртовый раствор кислоты фосфорновольфрамовой, кислоту серную и другие. Последняя реагирует главным образом с сапогениновой частью. Однако чем больше сахарная цепь, тем меньше относительная доля генина и, следовательно, чувствительность реакции. В качестве проявляющего реактива используют также раствор бараньей крови в фосфатном буфере для гемолиза эритроцитов [60]. Например, при анализе ТГ девясила высокого (Inula helenium L.) помощью ТСХ на пластинках Silufol в системе бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:1) детектирование проводилось 10 %-ным раствором серной кислоты и 25 %-ным спиртовым раствором фосфорновольфрамовой кислоты [75]. ТСХ синюхи голубой (Polemonium coeruleum L.) выполняли на пластинках Sorbfil, 10 х 10 см с использованием системы растворителей н-бутанол-кислота уксусная-вода (5:1:4). В качестве проявителя для хроматографических пластин использовали 10 % раствор фосфорно-молибденовой кислоты в спирте этиловом 96 % с последующей обработкой пластин парами аммиака [29].
1.1.3.3 ЯМР и масс- спектроскопия Особенно большую роль в решении структурных проблем тритерпеноидов играют инструментальные методы, такие как спектроскопия ‘Н-ЯМР и |3С-ЯМР, масс-спектрометрия. В спектрах протонного резонанса характеристическими сигналами пентациклических тритерпеноидов является мультиплет около 3 м. д. (Н-3) и 5 м. д. (Н-11). Эти спектры дают возможность различать производные а- и (3-амирина на основании характера сигналов СНз-групп в области 0,5-1,1 м. д. В первом случае наблюдается два дублетных сигнала и 5 - синглетных, во втором - все сигналы синглетные [26]. С помощью С-ЯМР спектров определяется общее число углеродных атомов в молекуле. Специальные методы позволяют различать метальные, метиленовые
- Київ+380960830922