ГЛАВА 2
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ЛЕЧЕНИЯ
НАБЛЮДАЕМЫХ БОЛЬНЫХ
2.1. Методы исследований
При выполнении работы использовались общеклинические, гемо-динамические,
иммунологические, биохимические, термометрические (контактный и бесконтактный),
индикаторный, антропометрический и статистические методы исследований.
Клиническое обследование и лечение больных псориазом проводилось в Клинике
кожный и венерических болезней Национального медицинского университета,
Киевском областном кожно-венерологическом диспансере, Клинической больнице
нефтеперерабатывающей промышленности Украины, Киевском научно-исследовательском
институте сердечно-сосудистой хирургии. Лабораторные исследования
осуществлялись в клинико-биохимической лаборатории кафедры кожных и
венерических болезней и научно-исследовательском лабораторном центре (НИЛЦ)
Национального медицинского университета, лаборатории биохимии Центральной
городской клинической больницы, лаборатории биохимии Киевского
научно-исследовательского института клинической и экспериментальной хирургии,
лаборатории биохимии Киевского научно-исследовательского института
сердечно-сосудистой хирургии и лаборатории токсикологии Института экогигиены и
токсикологии.
Исследования состояния периферической гемодинамики (артериальное давление,
частота пульса).
Исследования включали:
1. Измерение артериального давления (АД) проводили аускультативным методом по
Н.С.Короткову. Определяли систолическое АД, дистолическое АД и рассчитывали
среднединамическое АД.
2. Подсчет частоты сердечных сокращений, осуществляли пальпаторным метод.
Определяли ритм и наполнение пульса.
Иммунологические методы исследования
Для оценки иммунологического статуса обследуемых больных определяли состояние
клеточного и гуморального иммунитета по количественным и функциональным
показателям.
Исследования включали:
1. Подсчет абсолютного количества лейкоцитов и лимфоцитов периферической крови.
2. Определение суммарного содержания Т-лимфоцитов методом спонтанного
розеткообразования с эритроцитами барана (Е – РОК). Метод предложен A.Jondal
(1972). Феномен розеткообразования заключается во взаимодействии мембранных
рецепторов лимфоцитов с ксеногенными индикаторными клетками (эритроцитами
барана), приводящему к присоединению к лимфоцитам эритроцитов в виде розетки.
За розеткообразующую клетку (РОК) принимают лимфоцит, связавший 3 и более
эритроцитов барана.
3. Изучение суммарного содержания субпопуляций Т-лимфоцитов: Т-хелперов и
Т-супрессоров в тесте теофиллинзависимого розетко-образования с эритроцитами
барана. Метод предложен S. Limatibul et al. (1978). Т-лимфоциты – супрессоры
чувствительны к теофиллину, т.е. теряют способность образовывать розетки после
их обработки теофиллином. Реакция определения теафиллинрезистентных
Т-лимфоцитов-хелперов проводится так же как и для определения
теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов.
4. Определение функциональной активности Т-лимфоцитов в тесте бластной
трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА). Метод предложен
Е.Ф.Чернушенко и Л.С.Когововой (1978). Реакция бласттрансформации лимфоцитов
основана на способности Т-лимфоцитов под воздействием митогенов (ФГА и КОН-А)
увеличивать синтез ДНК и трансформироваться в недиффиренцированные "бластные"
клетки с последующим их делением.
5. Изучение суммарного содержания В - лимфоцитов с рецепторами к третьему
компоненту комплемента методом иммунного розеткообразования с эритроцитами
барана (ЕАС-РОК). Метод предложен А.Вlanko et al. (1970). Сущность ЕАС –
розеткообразования состоит в способности В-лимфоцитов, несущих на своей
поверхности рецепторы для третьего компонента комплемента (С3), образовывать
розетки с эритроцитами, сенсибилизированными антителами и обработанные
комплементом.
6. Установление путем вычисления относительного содержания О-лимфоцитов в
периферической крови, абсолютных значений содержания Т- и В-лимфоцитов, их
субпопуляций и функционального состояния.
7. Определение концентрации и размера циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК)
проводили методом дифференциальной преципитации с различными концентрациями
полиэтиленгликоля и последующей оценкой патогенных свойств исследуемых
иммунных комплексов. Метод предложенный М.Digeon et al. (1977) в модификации
П.В.Стручкова и соавт. (1985) основан на физико-химических свойствах комплексов
селективно осаждаться пропорционально концентрации полиэтиленгликоля.
Положительной стороной применявшегося метода является возможность одновременной
оценки размера и концентрации ЦИК в биологических жидкостях.
Биохимические методы исследования
При выполнении работы больным проводился общий анализ крови, мочи, определяли
содержание сахара в крови. Кроме вышеперечисленных анализов исследовали
состояние белкового обмена, активность печеночных ферментов, концентрацию
билирубина, содержание продуктов остаточного азота, Сигма - СОЭ и СОЭ по Т.П.
Панченко.
Исследования включали:
1. Определение общего белка в сыворотке крови по биурентной реакции. Согласно
методике белки реагируют в щелочной среде с сернокислой медью и образованием
соединений, окрашенных в фиолетовый цвет (биурентная реакция) с последующим
измерением оптической плотности на ФЭКе с длиной волны 540-560 нм (зеленый
светофильтр) в сравнении с контролем.
2. Изучение содержания белковых фракций в сыворотке крови методом зонального
электрофореза на хроматографической бумаге.
3. Определение количественных и качественных изменений белков сыворотки крови
при помощи теста на лабильность сывороточных белков (тимоловая проба) (Chromy
at al., 197
- Київ+380960830922