РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
Для вирішення у роботі задач були проведені експериментальні дослідження контрольних та дослідних серій на тваринах: 90 білих статевозрілих щурах-самицях лінії Вістар вагою 160-200 г та 24 кролицях породи Шиншила вагою 2,5-3,0 кг.
На білих щурах були проведені 3 групи експериментів: у першій проводили апробацію можливої біорегуляторної дії поліпептиду "Вермілат" на систему гемостазу та метаболічні зміни у тканинах шкіри, підшкірної клітковини, сполучної тканини при проліферативному запаленні; у другій - при ексудативному запаленні; у третій - при аутоімунному ураженні тканин пародонта та слизової порожнини рота.
На кролицях експериментальні дослідження проводили для обґрунтування можливого застосування комплексу регуляторних пептидів "Вермілат" з метою корекції стромально-епітеліальних порушень епітелію рогівки. Тварини були поділені на дві групи: 1 групі місцево застосовували на ушкоджену рогівку 0,9% розчин хлориду натрію (контроль) і 2 групі місцево закрапували гель "Вермілат" у вигляді аплікацій 3 рази на добу. Гель створений на основі субстанції "Вермілат" і запатентований як засіб для лікування запально-дистрофічних захворювань тканин пародонту та слизових оболонок (рішення про видачу патенту на винахід від 17.05.2001 р.; заявка № 97041958).
Спостереження здійснені на 100 жінках віком 25-30 років, які знаходилися на диспансерному обліку в стоматологічному кабінеті з приводу генералізованого пародонтиту. 10 жінок не страждали хворобами слизової шийки матки і були здорові в загальному плані; 90 жінок страждали псевдоерозіями слизової шийки матки і були поділені на 3 групи: 1 група - хворі, у яких після традиційного лікування наставало одужання; 2 група - пацієнтки, для яких традиційне лікування виявилося неефективним і наставало рецидивування процесу; 3 група - хворі з рецидивними епітеліальними ектопіями шийки матки, у яких традиційне лікування псевдоерозій шийки матки і генералізованого пародонтиту поєднували із застосуванням додатково до цього в рамках програми лікування генералізованого пародонтиту комплексу поліпептидів "Вермілат". Лікування полягало в тому, що на фоні загальноприйнятих методів лікування як протизапальний і стимулюючий засіб використовували гель "Вермілат" у вигляді аплікацій на ясна з експозицією 20-30 хвилин з одночасним внутрішньом'язовим введенням препарату "Вермілат для ін'єкцій" у дозуванні 15 мкг на добу протягом 10 діб.
Розподіл тварин і пацієнтів по групах та підгрупах наведено у табл. 2.1.
Таблиця 2.1
Розподіл серій експериментів на тваринах і спостережень на людях
ГрупаЕкспериментальний впливПрепарат, дозаКількість1234Щури
Проліферативне специфічне запаленняІнтактна--10КонтрольнаПідшкірне введення вазелінового масла з додаванням туберкульозної вакцини БЦЖ0,5 мл вазелінового масла;
0,25 мл вакцини БЦЖ10ДосліднаТе саме + введення "Вермілата" протягом 7 діб"Вермілат" 0,12 мг/кг внутрішньом'язово10Щури
Ексудативне запалення шкіри і підшкірної клітковини кінцівкиІнтактна--10КонтрольнаВведення 1% розчину карагеніну субплантарно, дослідження через 2 години0,1 мл карагеніну; через 2 години 0,2 мл 0,9% розчину NaCl внутрішньом'язово10
Продовження табл. 2.1
1234ДосліднаТе саме + введення "Вермілата". Дослідження через 2 години."Вермілат" 0,12 мг/кг в 0,2 мл 0,9% розчину NaCl внутрішньом'язово10Щури
Аутоімунний пародонтитІнтактна--10КонтрольнаІмунізація гомологічною тканиною пародонта у суміші з повним ад'ювантом Фрейнда у співвідношенні 1:1 по 0,2 млЧерез місяць 0,2 мл внутрішньом'язово10ДосліднаТе саме + введення "Вермілата" протягом 7 діб"Вермілат" 0,12 мг/кг в 0,2 мл 0,9% розчину NaCl внутрішньом'язово10Кролі
Епітеліальний дефект рогівкиКонтрольнаМісцевий вплив 0,9% розчину NaCl протягом 8 діб 2 рази на добу0,9% NaCl 0,2 мл10ДосліднаМісцевий вплив препарату "Вермілат", розчиненого у 0,9% розчині NaCl протягом 8 діб 2 рази на добу"Вермілат", розчинений у 0,9% розчині NaCl протягом 0,12 мг/кг10
Продовження табл. 2.1
1234Групи обстежених жінок
Псевдоерозія слизової шийки маткиЗдорові--101 групаПроста псевдоерозія слизової шийки матки:1 підгрупа: лікування хімічною коагуляцією-302 підгрупа: лікування діатермокоагуляцією-303 підгрупа: лікування кріогенною коагуляцією-302 групаРецидивна псевдоерозія слизової шийки матки:1 підгрупа: лікування хімічною коагуляцією-152 підгрупа: лікування діатермокоагуляцією-153 підгрупа: лікування кріогенною коагуляцією-153 групаРецидивна псевдоерозія слизової шийки матки:1 підгрупа: лікування хімічною коагуляцією + "Вермілат""Вермілат" 0,12 мг/кг місцево в порожнину піхви у вигляді тампона з гелем15
Продовження табл. 2.1
12342 підгрупа: лікування діатермокоагуляцією + "Вермілат"Так само303 підгрупа: лікування кріогенною коагуляцією + "Вермілат"Так само30
Класичну модель проліферативного мікобактеріального запалення здійснювали за методикою Г.Сельє (1950) [181].
Аутоімунний пародонтит відтворювали за методикою А.М.Камінського (1992) [182].
Експериментальну модель епітеліального дефекту рогівки здійснювали за методом Д.М.Майчука (1981) [183].
Об'єктами дослідження служили: кров, плазма, сироватка крові, тканини експериментальних тварин.
Кров у тварин забирали під гексеналовим наркозом з правого шлуночка серця у пластиковий шприц. Евтаназію тварин здійснювали під гексеналовим наркозом. Кров у людей забирали з ліктьової вени. У подальшому її змішували з цитратом натрію (3,8% водний розчин) у співвідношенні 9:1 і центрифугували при 1500 об./хв протягом 10 хв для отримання тромбоцитарної плазми та 3000 об./хв для отримання плазми, збідненої тромбоцитами.
У роботі також використовували еритроцити без відмивання, відмиті та змив з еритроцитів - супернатант. Еритроцити відмивали тричі фізіологічним розчином з подальшою декантацією.
Враховуючи мету і задачі даної роботи, схема обстеження х
- Київ+380960830922