Ви є тут

Мутаційні спектри у різних груп дітей, які зазнали впливу низькодозового іонізуючого випромінення

Автор: 
Настюкова Вікторія Володимирівна
Тип роботи: 
Дис. канд. наук
Рік: 
2003
Артикул:
0403U001625
129 грн
Додати в кошик

Вміст

<p>РАЗДЕЛ 2<br />ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ<br /> 2.1. Объект исследований<br /> <br /> Исследования выполнялись на метафазных пластинках периферической крови у детей и их родителей, проживающих в разных регионах, в том числе и в условиях повышенного уровня радиационного загрязнения вследствие аварии на ЧАЭС.<br /> <br />2.1.1. Дети с врожденными пороками развития<br /> Анализ связи между носительством конститутивных цитогенетических аномалий и наличием различных типов врожденных пороков развития (ВПР) выполнялся на образцах крови 382 детей, родители которых обратились за консультацией в медико-генетическое отделение "ОХМАТДЕТ".<br /> <br />2.1.1.1. Место проживания<br /> Среди родившихся после 1986г. (без учета синдрома Дауна) в г. Киеве проживают 148, в Киевской области - 71 человек, в других областях Украины - 39. Количество детей, которые родились до 1986г., по указанным регионам проживания составило 13, 4 и 6 соответственно.<br /> <br />2.1.1.2. Характеристика врожденных пороков развития<br /> На основании предварительного диагноза поставленного врачами-педиатрами-генетиками врожденных пороков развития (ВПР) у детей, подвергавшихся цитогенетическим исследованиям, варианты ВПР систематизированы по разным типам анатомо-физиологических дефектов. В результате больные подразделены на ряд групп, (табл. 2.1).<br /> Таблица 2.1<br />Анатомо-физиологические дефекты у детей с ВПР<br />Анатомо-физиологические дефектыКоличествоЧерепно-лицевые130Центральная нервная система132Сердечно-сосудистая система239Желудочно-кишечный тракт 96Мочеполовая система 212Нарушение роста26 <br /> Средний возраст детей, родившихся до Чернобыльской аварии составил 13,5?0,6 лет, а после - 6 лет?0,2 лет.<br /> <br />2.1.2. Родители детей с врожденными пороками развития<br /> У родителей детей с ВПР выполнялся анализ наличия конститутивных цитогенетических аномалий. Обследовано 153 человека, у каждого из которых выполнялся анализ 29 метафазных пластинок среди клеток периферической крови. Образцы периферической крови от каждого родителя приготовляли в трех повторностях. Всего в группе родителей детей с ВПР исследовано 4437 метафазных пластинок.<br /> <br />2.1.3. Пациенты с нарушением полового развития<br /> Проведено кариотипирование пациентов, направленных врачами генетиками-эндокринологами в связи с нарушениями полового развития. Предварительный диагноз ставился на основании клинического осмотра и анализа букального соскоба слизистой ротовой полости (выявление полового гетерохроматина). Обследовано 128 человек, у которых суммарно проанализировано 3712 клеток. Основную группу (112 человек) составили пациенты, родившиеся до 1986 года, среди которых 59 проживают в г. Киеве, 34 - в Киевской области, 19 - в других областях Украины. Во второй группе (16 человек), родившихся после 1986 года, эти цифры составили соответственно 10, 3 и 3.<br />2.1.4. Дети внутриутробнооблученные и проживающие на загрязненных радионуклидами территориях<br /> Дети, облученные in utero отобраны по месту жительства и приглашены в отделение врожденной и наследственной патологии Киевского Научного центра радиационной медицины АМН Украины.<br /> Обследованы две группы детей (по 8 человек в каждой). В первую вошли дети, родившиеся от беременных на момент аварии женщин, которых эвакуировали из г. Припяти. Возраст детей на момент обследования составлял 14-15 лет. Согласно данным лаборатории косвенных и расчетных методов дозиметрии НЦРМ АМН Украины, крайние величины доз общего облучения плода у беременных женщин, эвакуированных из г. Припять, находились в диапазоне от 5 до 376 мЗв [182], составляя в среднем 31.87 ? 14.46 мЗв [183].<br /> Гестационный возраст плода на момент аварии составлял: до 7 недель у 4.3% случаев; 8-15 недель - 9,9 %; 16-25 недель у - 41,5 %; больше 25 недель - у 44,3 %.<br /> Дозовые нагрузки на щитовидную железу плода колебались от 0.0 до 334.0 сГр. В зависимости от гестационного возраста средние дозы на щитовидную железу плода составили : до 8 недель - 0.0; от 8 до 15 недель - 31.1; от 16 до 25 недель - 84.5; больше 25 недель - 62.3 сГр. Суммарные эквивалентные дозы облучения тимуса и красного костного мозга плода в группе колебались от 1.0 до 30 сЗв [184]. <br /> Вторую группу составили дети, которые постоянно проживают на территориях, загрязненных радионуклидами (пгт. Народичи, г. Овруч Житомирской области). Среднегодовые паспортные дозы от внешнего и внутреннего облучения для г. Овруч и пгт. Народичи равнялись 0,77 и 1,5 мЗв, соответственно [185]. <br /> <br />2.1.5. Модельный объект (крупный рогатый скот), для оценки наследования продуктов амплификации ISSR-PCR<br /> Суммарно семейный анализ проведен на 3 поколениях голштинских коров, представленных 10 животными. Родительское поколение составили бык "Уран" и коровы "Альфа" и "Бета". Потомки первого поколения от коровы "Альфа" - № 120, №105, "Роза"; от коровы "Бета" - № 49; второе поколение - корова № 113 и бык № 144. Потомок третьего поколения представлен быком № 155. Поколения крупного рогатого скота воспроизводились в условиях повышенного радионуклидного загрязнения (около 200 Ки/км2 при усредненной поглощенной дозе, около 0,6 - 1,0 грея за год) в экспериментальном хозяйстве "Новошепеличи". <br />2.1.6. Пациенты, на геномной ДНК которых, выявляли полиморфизм фрагментов<br /> Эта группа представлена детьми, проходившими обследование в медико-генетическом отделении УДСБ "ОХМАТДЕТ", по поводу наличия ВПР, их родители детей, а также лица с нарушениями полового развития. Всего цитогенетическое обследование прошли 48 человек (проанализировано 1392 метафазы). Полиморфизм фрагментов геномной ДНК выявляли у 12 лиц, которым было проведено цитогенетическое обследование и у которых цитогенетические аномалии не были выявлены. Они представляли две группы - 5 человек взрослых (условно контрольная группа) и 7 детей с ВПР. <br /> <br />2.2. Методы исследования<br />2.2.1. Цитогенетический анализ с применением метода дифференциального окрашивания хромосом для выявления G-исчерченности<br />2.2.1.1. Краткосрочное культивирование к</p>