РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом исследований служили образцы адгезивных композиций, изготовленных в лаборатории гигиены полости рта Института стоматологии АМН Украины. В качестве объекта экспериментального исследования использовали 240 белых крыс линии Вистар стадного разведения, проведено 880 лабораторных анализов. Животные находились на стандартном рационе вивария Института стоматологии АМН Украины.
В клинических исследованиях для подтверждения эффективности действия разработанных "Адгезивных гелей" приняло участие 86 пациентов, пользующихся полными съемными протезами. Для установления характера анатомо - топографического состояния протезного поля обследовано 386 больных с полным отсутствием зубов.
2.1. Лабораторные методы исследования
Методика определения рН адгезивного средства
рН изучали путем погружения стеклянного электрода рН-метра ЛПУ-01 в суспензию адгезивной композиции, которую готовили путем ее разжижения смеси глицерина с водой в соотношении 1:1 (ГОСТ 8756.16-70).
В стеклянную емкость помещают 30 см3 20% -ой водной суспензии геля. Перед началом определения рН производят калибровку шкалы устройства по буферному разведению, значение рН которого ближе к ожидаемому значению рН геля. Электроды тщательно промывают дистилированной водой и ополаскивают суспензией, подключают к рН-метру и определяют значение рН по шкале прибора. Результатом исследования считают среднее арифметическое результатов трех параллельных показаний, допустимые расхождения между которыми не должны превосходить 0,2 абсолютного значения рН.
Методика определения вязкости адгезивного средства
Разработанная методика определения вязкости заключается в процентном определении растяжки капли и фиксации времени ее отрыва. В стеклянную трубочку диаметром 0,5 см всасывают адгезив или гель до метки 1 см. Трубочку с адгезивом закрепляют в штативе с встроенной линейкой. Адгезив принудительно с помощью резиновой груши, выдувают до края трубочки и по секундомеру определяют время отрыва капли. Критерием высокой степени вязкости нами приняты показатели, когда процент растяжки капли до метки отрыва составляет не менее 50, а время отрыва более 1 минуты.
Среднестатистический размер выдуваемой капли - 1 см. С момента образования полноценной капли, принятой за 1, требуется увеличение ее не менее чем в 2 раза или на 50 %. Показатели, превышающие установленный стандарт свидетельствуюет о положительном результате.
Время отрыва капли фиксируется с момента образования капли до ее отрыва от края трубочки. Единицей измерения служит 1 минута. Положительными результатами следует считать только те, когда время отрыва капли происходит только спустя 1 минуту после начала наблюдения.
Для оценки результатов исследования использованы индексы-показатели, приведенные в табл.2.1.
Таблица 2.1
Индексы-показатели степени вязкости гелеобразных средств, применяемых в стоматологии
Качественные показатели вязкостиПроцент растяжки капли (%)Время отрыва капли (мин.)Хорошая90...1002,0...2,5Удовлетворительная65...901,5...2,0Неудовлетворительная50...651,0...1,5Методика определения адгезивных свойств адгезивных средств
Адгезивные свойства композиций изучали на универсальной испытательной машине типа "Instrom 1195" со скоростью 5 мм/мин и охватом силовой нагрузки 200N. Установка имеет диск из суперакрила, лежащий непосредственно на основе. На диск наносится 10 см3 адгезива. С помощью силовой части аппарата диск подвергается силовой нагрузке вплоть до его отклеивания от поверхности. Через силоизмеритель электрический сигнал, пропорционально силе подвергаемого напряжения, трансформируется в преобразовательный блок, после чего поступает сигнал в записывающий блок.
Адгезивная сила рассчитывается по формуле:
А= Fср/ S (кг/м2) или (МР)
где, F - среднее значение силы напряжения для проводимых исследований, а S - контактная площадь в м2.
2.2. Токсикологические методы исследования
Токсикологические исследования гелей проводились согласно требованям "Методических указаний по экспериментальному (фармакологическому) и клиническому испытанию гигиенических и лечебно-профилактических средств для ухода за полостью рта" [322] Фармкомитет МЗ Украины, 1994г. и "Государственных санитарных правилам и норм безопасности продукции парфюмерно-косметической промышленности", ДСанПiН 2.2.9.027-99. и включали изучение следующих токсико-гигиенических показателей: "острой" и "хронической" токсичности гелей при нанесении на кожу, "острой" и "хронической" токсичности при введении в желудок, кожно-раздражающего действия, раздражающего действия на слизистую оболочку полости рта, сенсибилизирующего действия, а также микробной обсемененности гелей.
Методика изучения острой токсичности адгезивных средств при нанесении на кожу
Острую токсичность изучали путем испытания на "предельную" дозу.
Для исследования были взяты половозрелые животные (белые крысы линии Вистар возрастом 2,5 - 3 месяца обоих полов массой 160-220г). Одна группа контрольная и две опытные (обрабатывали адгезивом №1 и адгезивом №2).
На боковой поверхности выбривали шерсть с кожи площадью 4 см2. Опытным группам (2 группы по 10 животных) втирали адгезивные гели №1 и №2 из расчета 2500 мг/кг массы животного. Контрольной группе (10 животных) втирали вазелиновое масло. В течении 3-х суток производили наблюдение за оказываемым действием и случаями смерти. Все данные в опытных группах сравнивали с таковыми в контрольной группе.
Методика изучения острой токсичности адгезивных средств при введении в желудок
Острую токсичность изучали путем испытания на "предельную" дозу.
Средство считается нетоксичным, если после введения "предельной" дозы (5000мг на 1 кг живой массы) не происходит ни одного случая смерти подопытных животных по причине исследуемого препарата.
Испытание проводили на белых крысах линии Вистар, которым с помощью желудочного зонда вводили суспенз